| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| ·纳他霉素概述 | 第11-12页 |
| ·纳他霉素的特性 | 第11-12页 |
| ·纳他霉素的应用 | 第12页 |
| ·纳他霉素国内外的生产水平及研究现状 | 第12-16页 |
| ·纳他霉素的发酵生产研究状况 | 第12-14页 |
| ·纳他霉素产生菌的基因工程研究 | 第14-16页 |
| ·链霉菌次级代谢调控途径 | 第16-21页 |
| ·途径特异性调控 | 第16-17页 |
| ·多效性调控 | 第17-19页 |
| ·全局调控 | 第19-21页 |
| 第2章 基因工程菌株的构建 | 第21-44页 |
| ·引言 | 第21-22页 |
| ·材料与方法 | 第22-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·实验仪器和设备 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·抗生素 | 第25页 |
| ·酶和生化试剂 | 第25页 |
| ·PCR扩增的引物序列 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌质粒小量提取 | 第26-27页 |
| ·E.coli的Ca2+法感受态细胞的制备及转化 | 第27页 |
| ·PCR回收产物加A | 第27页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第27-28页 |
| ·DNA酶切和连接 | 第28页 |
| ·DNA片段凝胶回收(试剂盒回收) | 第28页 |
| ·Southern Blotting | 第28-31页 |
| ·梯度平板法测定链霉菌的抗生素天然抗性水平(范秀容等，1993) | 第31页 |
| ·质粒从大肠杆菌到恰塔努加链霉菌的接合转移 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-42页 |
| ·恰塔努加链霉菌对常用抗生素的天然抗性水平 | 第31-32页 |
| ·途径特异性正调控基因ScnRI的克隆与分析 | 第32-36页 |
| ·增加途径特异性正调控基因，构建基因工程菌株 | 第36-42页 |
| ·讨论与小结 | 第42-44页 |
| 第3章 基因工程菌株的发酵工艺研究 | 第44-56页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·材料与方法 | 第45-47页 |
| ·菌株 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45-46页 |
| ·恰塔努加链霉菌的培养方法 | 第46页 |
| ·恰塔努加链霉菌袍子悬液的制备 | 第46页 |
| ·摇瓶发酵实验 | 第46-47页 |
| ·发酵液中Natamycin含量测定 | 第47页 |
| ·生产菌生物量的测定—菌体干重法 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-54页 |
| ·紫外分光光度法测定纳他霉素的标准曲线 | 第47-48页 |
| ·YEME培养基中的摇瓶发酵 | 第48-49页 |
| ·YSG培养基中的摇瓶发酵和优化 | 第49-54页 |
| ·讨论与小结 | 第54-56页 |
| 第4章 结论与展望 | 第56-58页 |
| ·结论 | 第56页 |
| ·展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |