摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第10-24页 |
1.1 脐带血 | 第10-13页 |
1.1.1 脐带血特性 | 第10-11页 |
1.1.2 脐带血应用 | 第11-13页 |
1.2 外泌体 | 第13-15页 |
1.2.1 外泌体生物学特性 | 第13-14页 |
1.2.2 外泌体应用 | 第14-15页 |
1.3 T细胞免疫调节 | 第15-19页 |
1.3.1 T淋巴细胞相关功能亚群 | 第16-18页 |
1.3.2 老年人免疫特性 | 第18-19页 |
1.4 外泌体免疫调节作用的研究 | 第19-22页 |
1.4.1 T细胞外泌体研究现状 | 第20-21页 |
1.4.2 血浆外泌体研究现状 | 第21-22页 |
1.5 文章结构安排及意义 | 第22-24页 |
1.5.1 结构安排 | 第22-23页 |
1.5.2 本文的意义 | 第23-24页 |
第二章 脐血浆外泌体(Pexo)对老年人T淋巴细胞亚群的影响 | 第24-48页 |
2.1 引言 | 第24-25页 |
2.2 实验材料与仪器设备 | 第25-27页 |
2.2.1 主要实验材料和试剂 | 第25-26页 |
2.2.2 主要实验仪器设备 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-34页 |
2.3.1 脐血浆的分离 | 第27页 |
2.3.2 外泌体提取 | 第27-28页 |
2.3.3 外泌体用于透射电镜的样品制备 | 第28页 |
2.3.4 外泌体蛋白提取 | 第28页 |
2.3.5 BCA法蛋白定量 | 第28-29页 |
2.3.6 蛋白质印迹法检测蛋白表达 | 第29-30页 |
2.3.7 老年人外周血单个核细胞(PBMCs)的提取 | 第30页 |
2.3.8 老年人外周血单个核细胞(PBMCs)的CFSE染色 | 第30页 |
2.3.9 PBMCs与脐血浆外泌体(Pexo)共培养 | 第30页 |
2.3.10 流式细胞仪检测调节性T淋巴细胞亚群 | 第30-31页 |
2.3.11 流式细胞仪检测记忆型T淋巴细胞亚群 | 第31页 |
2.3.12 AnnexinV-FITC细胞凋亡检测 | 第31-32页 |
2.3.13 qRT-PCR检测PBMCs相关免疫因子 | 第32-34页 |
2.4 实验结果 | 第34-45页 |
2.4.1 脐血浆外泌体的鉴定 | 第34页 |
2.4.2 BCA法蛋白定量 | 第34页 |
2.4.3 刚分离出的老年人PBMCs中调节性T细胞的表达 | 第34-35页 |
2.4.4 Pexo与老年人PBMCs共培养后检测调节性T细胞的表达 | 第35-36页 |
2.4.5 Pexo与老年人PBMCs共培养后检测CD4+记忆性T细胞的表达 | 第36-37页 |
2.4.6 Pexo与老年人PBMCs共培养后检测CD8+记忆性T细胞的表达 | 第37-38页 |
2.4.7 Pexo对老年人PBMCs体外增殖的影响 | 第38-39页 |
2.4.8 老年人PBMCs中CD25+细胞亚群的表达 | 第39-40页 |
2.4.9 检测老年人PBMCs中细胞凋亡情况 | 第40-41页 |
2.4.10 24h、48h和96h调节性T细胞表达情况 | 第41-42页 |
2.4.11 24h、48h和96h相关免疫分子的表达情况 | 第42-43页 |
2.4.12 对激活后老年人PBMCs中T细胞相关亚群检测 | 第43-44页 |
2.4.13 qRT-PCR检测激活后老年人PBMCs中相关细胞因子的表达 | 第44-45页 |
2.5 讨论 | 第45-47页 |
2.6 本章小结 | 第47-48页 |
第三章 脐血源T细胞分泌的外泌体(Texo)对老年人T淋巴细胞亚群的影响 | 第48-64页 |
3.1 引言 | 第48-49页 |
3.2 实验材料与仪器设备 | 第49页 |
3.2.1 主要实验材料和试剂 | 第49页 |
3.2.2 主要实验仪器设备 | 第49页 |
3.3 实验方法 | 第49-50页 |
3.3.1 脐带血中T淋巴细胞的提取和培养 | 第49页 |
3.3.2 ELISA检测PBMCs表达的相关免疫因子 | 第49-50页 |
3.3.3其它实验方法同2.3 | 第50页 |
3.4 实验结果 | 第50-59页 |
3.4.1 脐血源T淋巴细胞分泌的外泌体的鉴定 | 第50页 |
3.4.2 BCA法蛋白定量 | 第50-51页 |
3.4.3 Texo与老年人PBMCs共培养后检测调节性T细胞的表达 | 第51-52页 |
3.4.4 Texo与老年人PBMCs共培养后检测CD4+记忆性T细胞的表达 | 第52-53页 |
3.4.5 Texo与老年人PBMCs共培养后检测CD8+记忆性T细胞的表达 | 第53页 |
3.4.6 Texo对老年人PBMCs体外增殖的影响 | 第53-54页 |
3.4.7 老年人PBMCs中CD25+细胞亚群的表达 | 第54-55页 |
3.4.8 检测老年人PBMCs中细胞凋亡情况 | 第55-56页 |
3.4.9 qRT-PCR检测PBMCs相关免疫因子 | 第56-57页 |
3.4.10 ELISA检测PBMCs相关免疫因子 | 第57-58页 |
3.4.11 24h、48h和96h调节性T细胞表达情况 | 第58-59页 |
3.5 讨论 | 第59-62页 |
3.6 本章小结 | 第62-64页 |
第四章 总结与展望 | 第64-68页 |
4.1 论文总结 | 第64-66页 |
4.2 论文创新 | 第66页 |
4.3 论文不足 | 第66-67页 |
4.4 展望 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78-84页 |
作者简介 | 第84页 |