缩略语表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-37页 |
一、胶质瘤及其分类 | 第15-21页 |
二、HGF-Met调控胶质瘤生长 | 第21-25页 |
三、胶质瘤的治疗现状与未来 | 第25-31页 |
References | 第31-37页 |
第一部分 MIR-144/MIR-451A分子簇在胶质瘤中的表达 | 第37-49页 |
1 实验材料 | 第37-38页 |
1.1 传代细胞系 | 第37页 |
1.2 实验所用分子生物学及细胞生物学试剂及购买公司 | 第37-38页 |
1.3 实验所用主要仪器及生产公司 | 第38页 |
1.4 实时定量PCR引物序列 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-42页 |
2.1 细胞培养及miRNA转染 | 第38-40页 |
2.2 细胞及组织RNA提取 | 第40-41页 |
2.3 反转录PCR | 第41页 |
2.4 实时定量PCR | 第41-42页 |
3 实验结果 | 第42-47页 |
3.1 miR-144-3p/miR-451a分子簇在人和小鼠染色质定位高度保守 | 第42-44页 |
3.2 miR-144/miR-451a分子簇在胶质瘤患者不同组织中的表达差异 | 第44-45页 |
3.3 miR-144/miR-451a分子簇在不同病理学分级胶质瘤中的表达差异 | 第45页 |
3.4 miR-144/miR-451a分子簇在不同人源胶质瘤细胞系中的表达差异 | 第45-46页 |
3.5 miR-144-3p、miR-144-5p和miR-451a表达相关性 | 第46-47页 |
3.6 miR-144-3p、miR-144-5p和miR-451a的表达量与病人预后相关性 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
第二部分 MIR-144-3P分子抑制胶质瘤增殖、迁移和药物耐受 | 第49-61页 |
1 实验材料 | 第49-50页 |
1.1 实验所用分子生物学及细胞生物学试剂及购买公司 | 第49页 |
1.2 实验所用主要仪器及生产公司 | 第49-50页 |
1.3 实时定量PCR引物序列 | 第50页 |
2 实验方法 | 第50-54页 |
2.1 miRNA细胞转染 | 第50-51页 |
2.2 MTT | 第51页 |
2.3 流式细胞技术进行细胞周期测定实验 | 第51-52页 |
2.4 软琼脂细胞集落形成实验 | 第52页 |
2.5 划痕实验 | 第52-53页 |
2.6 Transwell实验 | 第53页 |
2.7 细胞凋亡实验 | 第53-54页 |
2.8 caspase3/7活性检测实验 | 第54页 |
3 实验结果 | 第54-60页 |
3.1 miR-144-3p抑制胶质瘤细胞增殖 | 第54-56页 |
3.2 miR-144-3p抑制胶质瘤细胞转移和侵袭 | 第56-58页 |
3.3 miR-144-3p分子促进胶质瘤的化疗药物耐药性 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-61页 |
第三部分 MIR-144-3P通过靶基因FOS和HGF抑制胶质瘤发生发展的分子机制 | 第61-73页 |
1 实验材料 | 第61-63页 |
1.1 真核表达载体和菌株 | 第61页 |
1.2 实验小鼠 | 第61页 |
1.3 实验所用分子生物学及细胞生物学试剂及购买公司 | 第61-62页 |
1.4 实验所用主要仪器及生产公司 | 第62页 |
1.5 引物序列 | 第62-63页 |
1.5.1 PCR扩增引物 | 第62-63页 |
1.5.2 实时定量PCR引物 | 第63页 |
2 实验方法 | 第63-65页 |
2.1 表达载体构建 | 第63-64页 |
2.2 Western Blot | 第64-65页 |
2.3 报告基因 | 第65页 |
3 实验结果 | 第65-72页 |
3.1 miR-144-3p下游靶基因预测及验证 | 第65-68页 |
3.2 miR-144-3p靶基因FOS、HGF与胶质瘤的相关性 | 第68-70页 |
3.3 FOS或HGF对miR-144-3p抑制胶质瘤增殖作用的挽救 | 第70-72页 |
4 讨论 | 第72-73页 |
小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
附录 | 第79-80页 |
个人简历和研究成果 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |