| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩写对照表 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-22页 |
| 1.糖尿病肾病及其发病机制 | 第14-18页 |
| 1.1 糖尿病肾病 | 第14页 |
| 1.2 DN的发病机制 | 第14-18页 |
| 1.2.1 血流动力学改变 | 第15页 |
| 1.2.2 代谢紊乱 | 第15-16页 |
| 1.2.3 炎症反应 | 第16页 |
| 1.2.4 氧化应激 | 第16-17页 |
| 1.2.5 自噬 | 第17-18页 |
| 2.足细胞与DN | 第18-19页 |
| 2.1 DN足细胞损伤的形态特征及病理机制 | 第18-19页 |
| 2.1.1 足细胞肥大 | 第18页 |
| 2.1.2 足细胞上皮间充质转分化 | 第18-19页 |
| 2.1.3 足细胞脱落 | 第19页 |
| 2.1.4 足细胞凋亡 | 第19页 |
| 3.白皮杉醇的研究现状 | 第19-21页 |
| 3.1 基本介绍 | 第19-20页 |
| 3.2 白皮杉醇与肥胖 | 第20页 |
| 3.3 白皮杉醇与葡萄糖代谢 | 第20-21页 |
| 3.4 抗肿瘤作用及临床应用 | 第21页 |
| 4.本课题的研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-38页 |
| 1.实验对象 | 第22页 |
| 2.实验主要试剂和药物 | 第22-23页 |
| 3.主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| 4.主要溶液的制备 | 第24-25页 |
| 4.1 白皮杉醇溶液的配制 | 第24页 |
| 4.2 Western Blot试剂的配制 | 第24-25页 |
| 5.实验方法与步骤 | 第25-38页 |
| 5.1 细胞培养 | 第25-26页 |
| 5.1.1 细胞复苏 | 第25页 |
| 5.1.2 细胞传代 | 第25页 |
| 5.1.3 细胞冻存 | 第25-26页 |
| 5.2 足细胞分组 | 第26-27页 |
| 5.2.1 确定白皮杉醇的给药浓度 | 第26页 |
| 5.2.2 白皮杉醇对高糖诱导的足细胞损伤的影响 | 第26-27页 |
| 5.2.3 白皮杉醇不同处理时间对Nrf2核转位的影响 | 第27页 |
| 5.2.4 沉默Nrf2对高糖诱导的足细胞损伤的影响 | 第27页 |
| 5.3 细胞转染 | 第27-28页 |
| 5.3.1 sh-Nrf2序列及其溶解、分装、保存 | 第27页 |
| 5.3.2 Sh-Nrf2转染 | 第27-28页 |
| 5.4 实时荧光定量PCR(REAL-TIME PCR)检测基因的表达 | 第28-30页 |
| 5.4.1 细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| 5.4.2 RNA反转录合成cDNA | 第28-29页 |
| 5.4.3 实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
| 5.5 免疫蛋白印迹法(WESTERN BLOT法)检测蛋白的表达 | 第30-33页 |
| 5.5.1 细胞蛋白的提取 | 第30-31页 |
| 5.5.2 总蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| 5.5.3 SDS-PAGE胶的制备 | 第31-32页 |
| 5.5.4 上样和电泳 | 第32页 |
| 5.5.5 转膜和封闭 | 第32页 |
| 5.5.6 抗体孵育 | 第32-33页 |
| 5.5.7 显影和分析 | 第33页 |
| 5.6 CCK-8法检测细胞增殖 | 第33-34页 |
| 5.6.1 实验原理 | 第33页 |
| 5.6.2 制作细胞的标准曲线 | 第33页 |
| 5.6.3 细胞增殖-毒性检测 | 第33-34页 |
| 5.7 TUNEL检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 5.7.1 实验原理 | 第34页 |
| 5.7.2 实验步骤 | 第34-35页 |
| 5.8 ELISA检测IL-1β、IL-18、TNF-α、TGF-β1水平 | 第35-36页 |
| 5.8.1 实验原理 | 第35页 |
| 5.8.2 实验步骤 | 第35-36页 |
| 5.9 活性氧检测试剂盒检测ROS水平 | 第36-37页 |
| 5.9.1 实验原理 | 第36页 |
| 5.9.2 实验步骤 | 第36-37页 |
| 5.10 CASPASE-1活性检测 | 第37页 |
| 5.10.1 实验原理 | 第37页 |
| 5.10.2 实验步骤 | 第37页 |
| 5.11 统计学处理 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-47页 |
| 1.白皮杉醇给药浓度的确定 | 第38-39页 |
| 2.白皮杉醇对高糖条件下足细胞凋亡和足细胞活性的影响 | 第39-40页 |
| 3.白皮杉醇对高糖条件下足细胞IL-1β、IL-18、TNF-α、TGF-β1水平的影响 | 第40-41页 |
| 4.白皮杉醇对高糖条件下足细胞ROS水平的影响 | 第41-42页 |
| 5.白皮杉醇对高糖条件下足细胞NRF2核转位的影响 | 第42-43页 |
| 6.沉默NRF2逆转白皮杉醇对高糖诱导的足细胞NLRP3炎性小体激活的抑制作用 | 第43-44页 |
| 7.沉默NRF2抑制白皮杉醇对高糖诱导的足细胞损伤的保护作用 | 第44-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
