| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一篇 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 | 第9-16页 |
| 1.1 生长分化因子-15 | 第9-10页 |
| 1.2 糖尿病 | 第10-12页 |
| 1.3 脂质组学及在生物标志物发现中的应用 | 第12-16页 |
| 2 总结 | 第16-18页 |
| 第二篇 研究内容 | 第18-53页 |
| 第一章 人GDF-15的克隆及重组质粒的构建 | 第18-26页 |
| 1.1 材料 | 第18-19页 |
| 1.1.1 质粒载体与工程菌 | 第18页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 1.1.4 主要试剂配制 | 第19页 |
| 1.2 方法 | 第19-23页 |
| 1.2.1 hGDF-15基因的引物设计 | 第19-20页 |
| 1.2.2 hGDF-15基因的克隆 | 第20-23页 |
| 1.3 结果与分析 | 第23-25页 |
| 1.3.1 hGDF-15基因的克隆 | 第23页 |
| 1.3.2 pET28a-hGDF15表达载体的鉴定 | 第23-25页 |
| 1.4 讨论 | 第25页 |
| 1.5 小结 | 第25-26页 |
| 第二章 人GDF-15蛋白的表达及表达条件优化 | 第26-31页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 主要试剂的配置 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 hGDF-15蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-29页 |
| 2.3.1 hGDF-15蛋白诱导表达结果 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 人GDF-15蛋白的鉴定和纯化 | 第31-36页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-33页 |
| 3.2.1 Westernblot鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2.2 hGDF-15蛋白纯化 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-34页 |
| 3.3.1 Westernblot鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.3.2 hGDF-15蛋白纯化结果 | 第34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 3.5 小结 | 第35-36页 |
| 第四章 Ⅱ型糖尿病动物模型的建立及人GDF-15蛋白降糖降脂作用的初步研究 | 第36-53页 |
| 4.1 材料 | 第36-37页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第36-37页 |
| 4.2 方法 | 第37-41页 |
| 4.2.1 高脂动物模型建立方法 | 第37页 |
| 4.2.2 Ⅱ型糖尿病模型建立方法 | 第37页 |
| 4.2.3 动物分组及给药 | 第37页 |
| 4.2.4 检测指标 | 第37-38页 |
| 4.2.5 肝糖原测定 | 第38页 |
| 4.2.6 HE染色切片制作方法 | 第38-39页 |
| 4.2.7 小鼠肝脏的总 RNA 提取及浓度测定 | 第39-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-51页 |
| 4.3.1 实验小鼠指标检测结果 | 第41-42页 |
| 4.3.2 小鼠注射STZ后的血糖变化 | 第42-43页 |
| 4.3.3 hGDF15对Ⅱ型糖尿病小鼠空腹血糖的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.4 hGDF15对Ⅱ型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.5 hGDF15对Ⅱ型糖尿病小鼠体重的影响 | 第45-46页 |
| 4.3.6 hGDF15对Ⅱ型糖尿病小鼠血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-c)及高密度脂蛋白(HDL-c)的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.7 hGDF15对Ⅱ型糖尿病小鼠肝糖原含量影响 | 第47页 |
| 4.3.8 hGDF15对Ⅱ型糖尿病小鼠肝组织病理形态的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.9 hGDF15对Ⅱ糖尿病模型小鼠糖脂代谢相关基因表达的影响 | 第48-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-52页 |
| 4.5 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
