| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1.文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 棉花与棉花病害 | 第11-12页 |
| 1.2 植物免疫系统与系统获得性抗性 | 第12-16页 |
| 1.2.1 植物先天免疫 | 第12-13页 |
| 1.2.2 系统获得性抗性及其信号专递 | 第13-16页 |
| 1.3 脂转运蛋白在植物免疫以及信号传递中的功能研究 | 第16-18页 |
| 1.4 抑制SSN表达引发的类病斑与棉花抗黄萎病 | 第18-19页 |
| 1.5 本课题的研究目的以及意义 | 第19页 |
| 2.材料方法 | 第19-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要菌株和载体 | 第20页 |
| 2.1.3 主要酶类和试剂 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 棉花幼苗的培育 | 第20-21页 |
| 2.2.2 壬二酸(AzA)处理 | 第21页 |
| 2.2.3 病毒介导基因沉默(Virus-InducedGeneSilence)载体构建 | 第21-22页 |
| 2.2.4 棉花幼苗的VIGS处理 | 第22-23页 |
| 2.2.5 病原菌的活化和培养 | 第23页 |
| 2.2.6 VIGS处理之后表达量检测以及黄萎病菌接种 | 第23-24页 |
| 2.2.7 棉花组织RNA的提取及浓度测定 | 第24页 |
| 2.2.8 反转录RNA合成cDNA | 第24页 |
| 2.2.9 RT-PCR和qRT-PCR分析 | 第24-25页 |
| 2.2.10 棉花幼苗接菌后发病率及病指统计 | 第25-26页 |
| 2.2.11 棉花子叶节的徒手剖杆 | 第26页 |
| 2.2.12 棉花茎杆的恢复培养 | 第26页 |
| 2.2.13 棉花接种黄萎病菌后菌量测定 | 第26-27页 |
| 2.2.14 过氧化氢含量测定 | 第27页 |
| 2.2.15 DAB(二氨基联苯胺)染色 | 第27页 |
| 2.2.16 茉莉酸含量的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.17 转基因表达载体构建和棉花遗传转化 | 第28-29页 |
| 2.2.18 转基因植株阳性鉴定以及表达量鉴定 | 第29页 |
| 2.2.19 转基因植株表达量鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.20 转基因植株拷贝数鉴定 | 第30页 |
| 3.结果分析 | 第30-43页 |
| 3.1 JA路径在SSN沉默产生类病斑过程中的功能研究 | 第30-33页 |
| 3.1.1 杂交材料表型鉴定及SSN和GhJAZ2表达量检测 | 第30-31页 |
| 3.1.2 JA路径关键基因的表达分析以及JA含量的测定 | 第31-32页 |
| 3.1.3 过氧化氢的定量测定与DAB活性氧染色 | 第32-33页 |
| 3.2 GhLTPd在棉花抗黄萎病及信号传递中功能研究 | 第33-43页 |
| 3.2.1 序列来源与分析 | 第33-34页 |
| 3.2.2 脂转运蛋白GhLTPd的基本结构特征 | 第34-35页 |
| 3.2.3 脂转运蛋白GhLTPd表达模式分析 | 第35-36页 |
| 3.2.4 利用VIGS抑制GhLTPd的表达之后减弱对黄萎病的抗性 | 第36-38页 |
| 3.2.5 GhLTPd在信号传递中的功能研究 | 第38-39页 |
| 3.2.6 GhLTPd转基因RNAi材料以及AtDIR1超表达材料的获得 | 第39-41页 |
| 3.2.7 GhLTPd具有类似抗病信号传递功能 | 第41页 |
| 3.2.8 棉花中GhLTPd与SSN共抑制试验 | 第41-43页 |
| 4.讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 JA路径的激活不是抑制SSN表达引起的类病斑的主要原因 | 第43-44页 |
| 4.2 抑制棉花中GhLTPd基因表达削弱棉花对黄萎病的抗性 | 第44页 |
| 4.3 GhLTPd在SSN沉默所引起的类病斑产生过程中有重要作用 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 附录1 引物序列 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
