| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 低温对植物生长的影响 | 第13-16页 |
| 1.1.1 低温对植物细胞膜的影响 | 第13-15页 |
| 1.1.2 低温对植物光合作用的影响 | 第15-16页 |
| 1.1.3 低温对植物呼吸作用的影响 | 第16页 |
| 1.2 植物的抗冷/抗冻物质 | 第16-19页 |
| 1.2.1 抗氧化酶系统和非酶系统的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 蛋白质分子的作用 | 第17-18页 |
| 1.2.3 小分子渗透调节物质的作用 | 第18-19页 |
| 1.3 植物冷响应基因的分子调控机制 | 第19-23页 |
| 1.3.1 冷信号的感知 | 第19-20页 |
| 1.3.2 第二信使 | 第20-21页 |
| 1.3.3 转录调控 | 第21-23页 |
| 1.4 高山离子芥抗逆机制的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 高山离子芥冷冻胁迫下差异表达文库的构建 | 第26-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 低温处理 | 第26-27页 |
| 2.2.2 总RNA的提取和mRNA的分离 | 第27页 |
| 2.2.3 双链cDNA的合成 | 第27页 |
| 2.2.4 酶切消化和接头连接 | 第27-28页 |
| 2.2.5 消减杂交 | 第28-29页 |
| 2.2.6 PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.7 消减效率检测 | 第29-30页 |
| 2.2.8 冷冻胁迫差异表达文库的克隆与鉴定 | 第30页 |
| 2.2.9 cDNA微阵列 | 第30-31页 |
| 2.2.10 ESTs序列分析 | 第31页 |
| 2.2.11 荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-41页 |
| 2.3.1 高山离子芥再生苗的获得 | 第32-33页 |
| 2.3.2 消减杂交效率的检测分析 | 第33页 |
| 2.3.3 cDNA微阵列分析 | 第33-34页 |
| 2.3.4 差异表达基因的功能分析 | 第34-39页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR结果分析 | 第39-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-49页 |
| 第三章 高山离子芥冷诱导基因CINP1的克隆和功能分析 | 第49-67页 |
| 3.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 低温处理 | 第49-50页 |
| 3.2.2 CINP1引物的设计 | 第50页 |
| 3.2.3 CINP1基因全长的克隆 | 第50-51页 |
| 3.2.4 CINP1的同源性及结构与功能分析 | 第51页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR | 第51-52页 |
| 3.2.6 CINP1的亚细胞定位 | 第52-53页 |
| 3.2.7 CINP1的过表达载体的构建及转化 | 第53-54页 |
| 3.2.8 CINP1过表达株系离子渗漏率的测定 | 第54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-65页 |
| 3.3.1 高山离子芥CINP1基因(CbCINP1)的克隆 | 第54-55页 |
| 3.3.2 高山离子芥CINP1基因(CbCINP1)的同源性分析 | 第55-56页 |
| 3.3.3 高山离子芥CINP1蛋白的结构分析和功能预测 | 第56-62页 |
| 3.3.4 CINP1基因冷胁迫下的表达谱分析 | 第62-63页 |
| 3.3.5 CINP1蛋白定位于细胞核及质膜上 | 第63-64页 |
| 3.3.6 CINP1过表达株系的抗冻性分析 | 第64-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 冷敏感突变体c-1 2-41的基因克隆和功能分析 | 第67-84页 |
| 4.1 实验材料 | 第67页 |
| 4.2 实验方法 | 第67-73页 |
| 4.2.1 拟南芥培养 | 第67页 |
| 4.2.3 胁迫处理 | 第67-68页 |
| 4.2.4 成像分析 | 第68页 |
| 4.2.5 基因组DNA提取 | 第68页 |
| 4.2.6 PCR反应 | 第68-69页 |
| 4.2.7 遗传群体的构建 | 第69页 |
| 4.2.8 目的基因的初定位 | 第69页 |
| 4.2.9 目的基因的精细定位 | 第69-70页 |
| 4.2.10 目的基因的生物信息学分析 | 第70页 |
| 4.2.11 基因测序 | 第70-72页 |
| 4.2.12 功能互补验证 | 第72-73页 |
| 4.3 实验结果 | 第73-80页 |
| 4.3.1 突变体表型分析 | 第73页 |
| 4.3.2 遗传群体的获得 | 第73-74页 |
| 4.3.3 目的基因初定位于拟南芥第四条染色体 | 第74页 |
| 4.3.4 目的基因精细定位于FRY2/CPL1 | 第74-78页 |
| 4.3.5 FRY2/CPL1基因对突变体c-1 2-41表型的恢复 | 第78-79页 |
| 4.3.6 其它胁迫表型分析 | 第79-80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-84页 |
| 第五章 结论 | 第84-86页 |
| 第六章 参考文献 | 第86-95页 |
| 第七章 在学期间的研究成果 | 第95-96页 |
| 第八章 致谢 | 第96页 |
