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轮状病毒WA株感染树鼩动物模型的初步研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
英文缩写词表第17-18页
第一章 绪论第18-40页
    1.1 轮状病毒的概况第18页
    1.2 轮状病毒的遗传信息、结构和功能第18-24页
        1.2.1 轮状病毒的遗传信息第18-19页
        1.2.2 轮状病毒的蛋白-结构-功能第19-24页
    1.3 轮状病毒的分类和流行病学第24-28页
        1.3.1 轮状病毒的分类第24-25页
        1.3.2 轮状病毒的流行病学第25页
        1.3.3 轮状病毒的季节性流行第25-26页
        1.3.4 轮状病毒的地域性流行第26-27页
        1.3.5 轮状病毒的流行趋势第27-28页
    1.4 轮状病毒感染与致病机制第28-30页
        1.4.1 轮状病毒的传染源与传播途径第28页
        1.4.2 轮状病毒的生活史第28-29页
        1.4.3 轮状病毒的致病机制第29-30页
    1.5 轮状病毒的免疫保护机制第30-31页
        1.5.1 局部粘膜免疫机制第30-31页
        1.5.2 血清抗体免疫机制第31页
        1.5.3 细胞免疫机制第31页
    1.6 轮状病毒的检测技术第31-33页
        1.6.1 经典检测技术第32页
        1.6.2 免疫学检测技术第32页
        1.6.3 基因检测技术第32-33页
    1.7 轮状病毒的预防和治疗第33-34页
        1.7.1 轮状病毒的预防和治疗第33-34页
        1.7.2 轮状病毒疫苗研究现状第34页
    1.8 轮状病毒的动物模型第34-38页
        1.8.1 大鼠模型第35页
        1.8.2 乳鼠模型第35-36页
        1.8.3 兔子模型第36-37页
        1.8.4 无菌猪模型第37-38页
    1.9 本研究的目的和意义第38-39页
    1.10 实验技术路线图第39-40页
第二章 轮状病毒的培养与病毒滴度研究第40-58页
    2.1 前言第40-41页
    2.2 实验材料和设备第41-43页
        2.2.2 实验试剂第41-42页
        2.2.3 其他试剂的配制第42页
        2.2.4 主要实验设备第42-43页
    2.3 实验方法第43-50页
        2.3.1 细胞的培养第43-45页
        2.3.2 病毒的培养第45-46页
        2.3.3 轮状病毒滴度的测定第46-47页
        2.3.4 轮状病毒的浓缩第47-48页
        2.3.5 轮状病毒总RNA的提取第48-49页
        2.3.6 测定RNA浓度第49页
        2.3.7 逆转录PCR第49-50页
    2.4 结果和分析第50-55页
        2.4.1 轮状病毒WA株和JM-103临床株感染两种细胞的情况第50-51页
        2.4.2 轮状病毒WA株滴度的测定结果第51-52页
        2.4.3 TCID50测定病毒滴度条件的优化第52-53页
        2.4.4 轮状病毒培养增殖特性的研究第53-54页
        2.4.5 RNA浓度测定结果第54页
        2.4.6 凝胶电泳结果以及病毒的验证第54-55页
    2.5 讨论第55-56页
    2.6 小结第56-58页
第三章 轮状病毒感染树鼩原代细胞的研究第58-72页
    3.1 引言第58-59页
    3.2 实验材料与设备第59-61页
        3.2.1 实验材料第59页
        3.2.2 实验试剂第59-60页
        3.2.3 其他试剂的配制第60页
        3.2.4 主要实验设备第60-61页
    3.3 实验方法第61-65页
        3.3.1 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的分离第61-62页
        3.3.2 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的培养第62-64页
        3.3.3 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的纯化第64页
        3.3.4 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的增殖情况第64-65页
        3.3.5 轮状病毒感染树鼩原代细胞的病变效应第65页
        3.3.6 轮状病毒对树鼩原代细胞感染后培养上清的滴度测定第65页
    3.4 实验结果第65-69页
        3.4.1 树鼩原代细胞的分离第65-66页
        3.4.2 树鼩原代细胞的纯化第66页
        3.4.3 树鼩原代细胞的增殖能力测定结果第66-67页
        3.4.4 轮状病毒感染树鼩原代细胞的病变结果第67-68页
        3.4.5 原代细胞感染病毒后细胞悬液中病毒滴度的测定结果第68-69页
    3.5 讨论第69-70页
    3.6 小结第70-72页
第四章 轮状病毒WA株感染树鼩致病性的研究第72-94页
    4.1 引言第72-73页
    4.2 实验材料与设备第73-76页
        4.2.1 实验材料第73页
        4.2.2 实验试剂第73-74页
        4.2.3 其他试剂的配制第74-75页
        4.2.4 主要实验设备第75-76页
    4.3 实验方法第76-83页
        4.3.1 树鼩的适应性喂养第76-77页
        4.3.2 病毒的灌胃第77页
        4.3.3 生命体征、活动情况的记录第77页
        4.3.4 样本的采集第77-78页
        4.3.5 样本的处理第78-80页
        4.3.6 蛋白质免疫印迹第80-83页
        4.3.7 数据分析第83页
    4.4 实验结果第83-90页
        4.4.1 树鼩感染轮状病毒后腹泻百分数和粪便等级第83-84页
        4.4.2 树鼩感染轮状病毒后活动情况第84-85页
        4.4.3 树鼩体重变化情况第85-86页
        4.4.4 树鼩体温变化情况第86页
        4.4.5 血常规指数第86-87页
        4.4.6 树鼩感染轮状病毒后排毒情况第87-88页
        4.4.7 样本(血液、粪便、唾液)的PCR电泳结果第88-89页
        4.4.8 WesternBlot检测树鼩组织中轮状病毒VP6蛋白第89-90页
    4.5 讨论第90-93页
    4.6 小结第93-94页
第五章 总结与展望第94-96页
    5.1 总结第94-95页
    5.2 展望第95-96页
致谢第96-97页
参考文献第97-107页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第107页
附录B 其他需要说明的内容第107页

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