| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩写词表 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-40页 |
| 1.1 轮状病毒的概况 | 第18页 |
| 1.2 轮状病毒的遗传信息、结构和功能 | 第18-24页 |
| 1.2.1 轮状病毒的遗传信息 | 第18-19页 |
| 1.2.2 轮状病毒的蛋白-结构-功能 | 第19-24页 |
| 1.3 轮状病毒的分类和流行病学 | 第24-28页 |
| 1.3.1 轮状病毒的分类 | 第24-25页 |
| 1.3.2 轮状病毒的流行病学 | 第25页 |
| 1.3.3 轮状病毒的季节性流行 | 第25-26页 |
| 1.3.4 轮状病毒的地域性流行 | 第26-27页 |
| 1.3.5 轮状病毒的流行趋势 | 第27-28页 |
| 1.4 轮状病毒感染与致病机制 | 第28-30页 |
| 1.4.1 轮状病毒的传染源与传播途径 | 第28页 |
| 1.4.2 轮状病毒的生活史 | 第28-29页 |
| 1.4.3 轮状病毒的致病机制 | 第29-30页 |
| 1.5 轮状病毒的免疫保护机制 | 第30-31页 |
| 1.5.1 局部粘膜免疫机制 | 第30-31页 |
| 1.5.2 血清抗体免疫机制 | 第31页 |
| 1.5.3 细胞免疫机制 | 第31页 |
| 1.6 轮状病毒的检测技术 | 第31-33页 |
| 1.6.1 经典检测技术 | 第32页 |
| 1.6.2 免疫学检测技术 | 第32页 |
| 1.6.3 基因检测技术 | 第32-33页 |
| 1.7 轮状病毒的预防和治疗 | 第33-34页 |
| 1.7.1 轮状病毒的预防和治疗 | 第33-34页 |
| 1.7.2 轮状病毒疫苗研究现状 | 第34页 |
| 1.8 轮状病毒的动物模型 | 第34-38页 |
| 1.8.1 大鼠模型 | 第35页 |
| 1.8.2 乳鼠模型 | 第35-36页 |
| 1.8.3 兔子模型 | 第36-37页 |
| 1.8.4 无菌猪模型 | 第37-38页 |
| 1.9 本研究的目的和意义 | 第38-39页 |
| 1.10 实验技术路线图 | 第39-40页 |
| 第二章 轮状病毒的培养与病毒滴度研究 | 第40-58页 |
| 2.1 前言 | 第40-41页 |
| 2.2 实验材料和设备 | 第41-43页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 2.2.3 其他试剂的配制 | 第42页 |
| 2.2.4 主要实验设备 | 第42-43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-50页 |
| 2.3.1 细胞的培养 | 第43-45页 |
| 2.3.2 病毒的培养 | 第45-46页 |
| 2.3.3 轮状病毒滴度的测定 | 第46-47页 |
| 2.3.4 轮状病毒的浓缩 | 第47-48页 |
| 2.3.5 轮状病毒总RNA的提取 | 第48-49页 |
| 2.3.6 测定RNA浓度 | 第49页 |
| 2.3.7 逆转录PCR | 第49-50页 |
| 2.4 结果和分析 | 第50-55页 |
| 2.4.1 轮状病毒WA株和JM-103临床株感染两种细胞的情况 | 第50-51页 |
| 2.4.2 轮状病毒WA株滴度的测定结果 | 第51-52页 |
| 2.4.3 TCID50测定病毒滴度条件的优化 | 第52-53页 |
| 2.4.4 轮状病毒培养增殖特性的研究 | 第53-54页 |
| 2.4.5 RNA浓度测定结果 | 第54页 |
| 2.4.6 凝胶电泳结果以及病毒的验证 | 第54-55页 |
| 2.5 讨论 | 第55-56页 |
| 2.6 小结 | 第56-58页 |
| 第三章 轮状病毒感染树鼩原代细胞的研究 | 第58-72页 |
| 3.1 引言 | 第58-59页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第59-61页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第59页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第59-60页 |
| 3.2.3 其他试剂的配制 | 第60页 |
| 3.2.4 主要实验设备 | 第60-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 3.3.1 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的分离 | 第61-62页 |
| 3.3.2 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的培养 | 第62-64页 |
| 3.3.3 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的纯化 | 第64页 |
| 3.3.4 树鼩原代肾细胞、小肠上皮细胞的增殖情况 | 第64-65页 |
| 3.3.5 轮状病毒感染树鼩原代细胞的病变效应 | 第65页 |
| 3.3.6 轮状病毒对树鼩原代细胞感染后培养上清的滴度测定 | 第65页 |
| 3.4 实验结果 | 第65-69页 |
| 3.4.1 树鼩原代细胞的分离 | 第65-66页 |
| 3.4.2 树鼩原代细胞的纯化 | 第66页 |
| 3.4.3 树鼩原代细胞的增殖能力测定结果 | 第66-67页 |
| 3.4.4 轮状病毒感染树鼩原代细胞的病变结果 | 第67-68页 |
| 3.4.5 原代细胞感染病毒后细胞悬液中病毒滴度的测定结果 | 第68-69页 |
| 3.5 讨论 | 第69-70页 |
| 3.6 小结 | 第70-72页 |
| 第四章 轮状病毒WA株感染树鼩致病性的研究 | 第72-94页 |
| 4.1 引言 | 第72-73页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第73-76页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第73页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第73-74页 |
| 4.2.3 其他试剂的配制 | 第74-75页 |
| 4.2.4 主要实验设备 | 第75-76页 |
| 4.3 实验方法 | 第76-83页 |
| 4.3.1 树鼩的适应性喂养 | 第76-77页 |
| 4.3.2 病毒的灌胃 | 第77页 |
| 4.3.3 生命体征、活动情况的记录 | 第77页 |
| 4.3.4 样本的采集 | 第77-78页 |
| 4.3.5 样本的处理 | 第78-80页 |
| 4.3.6 蛋白质免疫印迹 | 第80-83页 |
| 4.3.7 数据分析 | 第83页 |
| 4.4 实验结果 | 第83-90页 |
| 4.4.1 树鼩感染轮状病毒后腹泻百分数和粪便等级 | 第83-84页 |
| 4.4.2 树鼩感染轮状病毒后活动情况 | 第84-85页 |
| 4.4.3 树鼩体重变化情况 | 第85-86页 |
| 4.4.4 树鼩体温变化情况 | 第86页 |
| 4.4.5 血常规指数 | 第86-87页 |
| 4.4.6 树鼩感染轮状病毒后排毒情况 | 第87-88页 |
| 4.4.7 样本(血液、粪便、唾液)的PCR电泳结果 | 第88-89页 |
| 4.4.8 WesternBlot检测树鼩组织中轮状病毒VP6蛋白 | 第89-90页 |
| 4.5 讨论 | 第90-93页 |
| 4.6 小结 | 第93-94页 |
| 第五章 总结与展望 | 第94-96页 |
| 5.1 总结 | 第94-95页 |
| 5.2 展望 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第107页 |
| 附录B 其他需要说明的内容 | 第107页 |
