| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 漆酶的分布及生理学功能 | 第11-12页 |
| 1.2 漆酶的催化机制 | 第12-13页 |
| 1.3 漆酶的底物和介体 | 第13页 |
| 1.4 漆酶的应用 | 第13-15页 |
| 1.4.1 造纸工业 | 第13-14页 |
| 1.4.2 纺织工业 | 第14页 |
| 1.4.3 食品工业 | 第14页 |
| 1.4.4 有机合成 | 第14-15页 |
| 1.4.5 制药工业 | 第15页 |
| 1.4.6 生物传感器 | 第15页 |
| 1.5 漆酶的研究概况 | 第15-16页 |
| 1.6 论文选题意义 | 第16-17页 |
| 第二章 漆酶基因的克隆及原核表达系统的构建 | 第17-26页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第17-19页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第17-18页 |
| 2.2.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-22页 |
| 2.3.1 基因组提取 | 第19页 |
| 2.3.2 基因的克隆与纯化 | 第19-20页 |
| 2.3.3 PCR产物的酶切与纯化 | 第20-21页 |
| 2.3.4 质粒pET28a(+)的扩增及提取 | 第21页 |
| 2.3.5 载体质粒的双酶切及纯化 | 第21页 |
| 2.3.6 重组质粒的构建 | 第21-22页 |
| 2.3.7 重组质粒的转化及鉴定 | 第22页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第22-25页 |
| 2.4.1 目的基因的扩增结果 | 第22-23页 |
| 2.4.2 质粒pET28a双酶切回收结果 | 第23-24页 |
| 2.4.3 重组质粒构建鉴定结果 | 第24-25页 |
| 2.4.4 测序结果 | 第25页 |
| 2.5 小结 | 第25-26页 |
| 第三章 重组漆酶Melac13220的表达及纯化 | 第26-34页 |
| 3.1 引言 | 第26页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第26-28页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第26页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第26-28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 3.3.1 转化 | 第28页 |
| 3.3.2 目的蛋白的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
| 3.3.3 漆酶活力测定 | 第29-30页 |
| 3.3.4 漆酶Melac13220的纯化 | 第30-31页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第31-33页 |
| 3.4.1 目的蛋白的SDS-PAGE | 第31-32页 |
| 3.4.2 目的蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 3.5 小结 | 第33-34页 |
| 第四章 漆酶Melac13220的酶学性质表征 | 第34-45页 |
| 4.1 前言 | 第34页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第34-35页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第34页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第34-35页 |
| 4.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 4.3.1 漆酶Melac13220的最适温度测定 | 第35页 |
| 4.3.2 漆酶Melac13220的最适pH测定 | 第35-36页 |
| 4.3.3 漆酶Melac13220的pH稳定性 | 第36页 |
| 4.3.4 漆酶Melac13220的温度稳定性 | 第36页 |
| 4.3.5 金属离子对漆酶Melac13220的影响 | 第36页 |
| 4.3.6 有机溶剂对漆酶Melac13220的影响 | 第36页 |
| 4.3.7 漆酶Melac13220反应动力学常数测定 | 第36-37页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 4.4.1 最适温度测定结果 | 第37页 |
| 4.4.2 最适pH测定结果 | 第37-38页 |
| 4.4.3 温度稳定性测定结果 | 第38-40页 |
| 4.4.4 pH稳定性测定结果 | 第40页 |
| 4.4.5 金属离子对酶活影响 | 第40-42页 |
| 4.4.6 有机溶剂对酶活影响 | 第42-43页 |
| 4.4.7 反应动力学常数测定结果 | 第43-44页 |
| 4.5 小结 | 第44-45页 |
| 第五章 漆酶Melac13220的应用性分析 | 第45-47页 |
| 5.1 引言 | 第45页 |
| 5.2 实验仪器与材料 | 第45页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第45页 |
| 5.2.2 实验材料 | 第45页 |
| 5.3 实验方法 | 第45-46页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第46-47页 |
| 全文总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
