| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 Aep1研究背景 | 第10-34页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 β类穿孔蛋白概述 | 第11-16页 |
| 1.2.1 结构特点 | 第11-12页 |
| 1.2.2 生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.2.3 生物学应用 | 第13-16页 |
| 1.3 Aerolysin家族蛋白研究现状 | 第16-22页 |
| 1.3.1 原核生物的aerolysin蛋白 | 第16-19页 |
| 1.3.2 真核生物的aerolysin蛋白 | 第19-22页 |
| 1.4 斑马鱼中的aerolysin类穿孔蛋白 | 第22-34页 |
| 1.4.1 斑马鱼背景简介 | 第22-23页 |
| 1.4.2 斑马鱼aerolysin类蛋白Aep1的研究背景 | 第23-27页 |
| 1.4.3 斑马鱼的免疫系统 | 第27-28页 |
| 1.4.4 斑马鱼作为感染模型 | 第28-34页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第34-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 实验质粒和细菌 | 第34页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第34页 |
| 2.1.3 引物 | 第34-35页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-42页 |
| 2.2.1 斑马鱼的饲养 | 第35-36页 |
| 2.2.2 细菌培养及感染样品制备 | 第36页 |
| 2.2.3 重组Aep1蛋白的表达纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.4 腹腔注射斑马鱼 | 第37-39页 |
| 2.2.5 成鱼解剖、总RNA提取及定量PCR | 第39-40页 |
| 2.2.6 数据的统计分析 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第42-60页 |
| 3.1 aep1基因在成年斑马鱼各组织中的表达情况 | 第42-46页 |
| 3.1.1 确定扩增aep1的引物的特异性 | 第42-45页 |
| 3.1.2 aep1在斑马鱼的各组织分布的结果分析 | 第45-46页 |
| 3.2 aep1基因在被细菌感染后的斑马鱼各组织中的表达情况 | 第46-47页 |
| 3.3 预注射重组Aep1蛋白对斑马鱼的影响 | 第47-52页 |
| 3.3.1 重组Aep1蛋白纯化 | 第48-50页 |
| 3.3.2 预注射重组Aep1蛋白对斑马鱼存活率的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.3 Aep1蛋白与金黄色葡萄球菌之间的相互作用 | 第51-52页 |
| 3.4 预注射重组Aep1蛋白对细胞因子的影响 | 第52-54页 |
| 3.5 斑马鱼发育不同时期的aep1基因 | 第54-56页 |
| 3.5.1 aep1基因在斑马鱼胚胎发育时期的表达情况 | 第54-56页 |
| 3.5.2 幼鱼被感染后aep1基因的表达情况 | 第56页 |
| 3.6 小结 | 第56-57页 |
| 3.7 讨论与展望 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 附录A 本论文所用主要仪器设备 | 第72-73页 |
| 附录B 常用溶液和培养基配制 | 第73-76页 |
| 附录C 常规试验方法 | 第76-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与参加的学术会议 | 第88页 |
