| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 引言 | 第8-26页 |
| 1.1 普通野生稻的特点及应用 | 第8-9页 |
| 1.1.1 普通野生稻的特点 | 第8页 |
| 1.1.2 普通野生稻种质资源的利用 | 第8-9页 |
| 1.1.3 普通野生稻干旱相关基因研究进展 | 第9页 |
| 1.2 水稻抗旱分子机理研究进展 | 第9-14页 |
| 1.2.1 通过数量性状位点(QTL)定位主效基因 | 第10-13页 |
| 1.2.2 利用基因组学的方法对抗旱机理的研究 | 第13-14页 |
| 1.3 水稻抗旱基因工程研究 | 第14-20页 |
| 1.3.1 碱性亮氨酸拉链转录因子 | 第15页 |
| 1.3.2 NAC转录因子家族 | 第15-17页 |
| 1.3.3 DREBs/CBFs转录因子家族 | 第17页 |
| 1.3.4 锌指蛋白 | 第17页 |
| 1.3.5 其他抗旱相关转录因子 | 第17-18页 |
| 1.3.6 其他抗旱相关分子、蛋白 | 第18-20页 |
| 1.4 启动子的种类及应用 | 第20-23页 |
| 1.4.1 启动子的结构 | 第20页 |
| 1.4.2 启动子的分类 | 第20-23页 |
| 1.4.3 启动子功能的研究方法 | 第23页 |
| 1.5 本实验研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第26页 |
| 2.1.3 实验试剂与仪器 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 普通野生稻总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.3 普通野生稻总DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.4 根特异基因筛选 | 第29页 |
| 2.2.5 RT-PCR引物设计 | 第29页 |
| 2.2.6 RT-PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.2.7 目的片段引物设计 | 第30页 |
| 2.2.8 目的片段的扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.9 PCR扩增产物的回收 | 第31页 |
| 2.2.10 构建表达载体、转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
| 2.2.11 农杆菌EHA105的转化 | 第32-33页 |
| 2.2.12 根特异启动子GUS基因表达载体的构建 | 第33页 |
| 2.2.13 农杆菌注射渗透法转化烟草 | 第33-34页 |
| 2.2.14 农杆菌蘸花法转化拟南芥 | 第34页 |
| 2.2.15 转基因植株的种植与鉴定 | 第34页 |
| 2.2.16 GUS报告基因的定性检测 | 第34-35页 |
| 2.2.17 GUS报告基因的定量检测 | 第35-36页 |
| 2.2.18 抗旱相关差异基因的筛选及分析 | 第36页 |
| 2.2.19 培养基种植拟南芥 | 第36页 |
| 2.2.20 实时定量荧光PCR检测 | 第36-37页 |
| 2.2.21 丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量检测 | 第37页 |
| 2.2.22 过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性检测 | 第37-38页 |
| 2.2.23 植物可溶性糖含量检测 | 第38页 |
| 2.2.24 脯氨酸(Pro)含量测定 | 第38-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-57页 |
| 3.1 根特异启动子的筛选与鉴定 | 第40-48页 |
| 3.1.1 根特异表达候选基因的筛选 | 第40页 |
| 3.1.2 半定量PCR(RT-PCR)筛选结果 | 第40-41页 |
| 3.1.3 GUS表达载体的构建及转化 | 第41页 |
| 3.1.4 候选基因瞬时转化烟草的GUS染色结果 | 第41-42页 |
| 3.1.5 OrRSGp启动子序列分析 | 第42页 |
| 3.1.6 转OrRSGp-GUS拟南芥各组织GUS染色结果 | 第42-45页 |
| 3.1.7 转基因拟南芥各株系GUS定量分析 | 第45-46页 |
| 3.1.8 OrRSGp启动子在水稻中的表达 | 第46-48页 |
| 3.2 抗旱基因的筛选与鉴定 | 第48-57页 |
| 3.2.1 抗旱相关差异基因的筛选及分析 | 第48页 |
| 3.2.2 17个候选基因转化拟南芥T2代株系的表型统计 | 第48-51页 |
| 3.2.3 土培候选基因过表达拟南芥的干旱处理 | 第51-52页 |
| 3.2.4 基因4序列分析结果 | 第52-53页 |
| 3.2.5 不同胁迫处理下普通野生稻中OrAELP1的表达情况 | 第53页 |
| 3.2.6 转OrAELP1拟南芥抗旱相关生理指标的检测 | 第53-55页 |
| 3.2.7 转OrAELP1拟南芥抗旱相关基因表达检测 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 普通野生稻抗旱基因筛选与鉴定 | 第57页 |
| 4.2 普通野生稻根特异启动子筛选与鉴定 | 第57-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 缩略语表 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
