中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第9-25页 |
1.1 柑橘黄龙病的危害及研究现状 | 第9-16页 |
1.1.1 柑橘黄龙病的历史 | 第10-11页 |
1.1.2 韧皮部杆菌的生物学特征及遗传多样性 | 第11-12页 |
1.1.3 柑橘黄龙病传病媒介木虱的生物学特征 | 第12-14页 |
1.1.4 柑橘黄龙病菌的寄主植物 | 第14页 |
1.1.5 柑橘黄龙病诊断及检测技术的研究发展 | 第14-15页 |
1.1.6 柑橘黄龙病的地理分布及经济影响 | 第15-16页 |
1.1.7 柑橘黄龙病的防治方法及防治效果 | 第16页 |
1.2 亚洲韧皮杆菌人工培养研究的历史及现状 | 第16-19页 |
1.3 难培养微生物培养方法的研究进展 | 第19-22页 |
1.3.1 未培养细菌不可培养的原因分析 | 第20-21页 |
1.3.2 改进微生物可培养性低的策略和方法 | 第21-22页 |
1.4 亚洲韧皮部杆菌的基因分析 | 第22-23页 |
1.5 研究目的及研究内容 | 第23页 |
1.6 本研究的意义 | 第23-24页 |
1.7 创新之处 | 第24页 |
1.8 技术路线 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-36页 |
2.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.1 实验样品 | 第25页 |
2.1.2 主要实验试剂及耗材 | 第25-26页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-36页 |
2.2.1 样品的采集与处理 | 第27页 |
2.2.2 培养基及配置方法 | 第27-29页 |
2.2.3 黄龙病病原菌的人工培养方法 | 第29-30页 |
2.2.4 伴生菌与黄龙病菌的共培养 | 第30-31页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第31-34页 |
2.2.6 共培养物的柯赫氏法验证 | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-57页 |
3.1 实验样品表面消毒方法 | 第36-37页 |
3.2 共培养用接种样品选择 | 第37-39页 |
3.3 实验样品材料及共培养菌液DNA提取方法比较 | 第39-40页 |
3.4 培养基各组分的确定及优化 | 第40-42页 |
3.5 体外共培养方法的确定及优化 | 第42-45页 |
3.5.1 厌氧及微需氧培养环境的制造及改进 | 第42-44页 |
3.5.2 其他培养条件的选择 | 第44-45页 |
3.6 功能性伴生菌的筛选 | 第45-48页 |
3.7 柯赫氏法验证 | 第48-49页 |
3.8 柑橘黄龙病病原菌共培养体系的分析讨论 | 第49-57页 |
3.8.1 选择罹病柑橘果实橘络组织作为共培养用接种样品 | 第49-50页 |
3.8.2 柑橘黄龙病菌共培养体系培养基组分分析 | 第50-52页 |
3.8.3 柑橘黄龙病菌共培养体系培养条件分析 | 第52-53页 |
3.8.4 柑橘黄龙病菌功能性伴生菌分析 | 第53-55页 |
3.8.5 柯赫氏法验证分析 | 第55-57页 |
4 结论与展望 | 第57-59页 |
4.1 主要结论 | 第57页 |
4.1.1 设计优化的柑橘黄龙病病原菌液体共培养体系能够使黄龙病菌在液体培养基中稳定增殖,获得了含黄龙病菌的液体共培养物 | 第57页 |
4.1.2 应用液体共培养体系筛选出3株黄龙病菌促生性伴生菌,5 株黄龙病菌抑制性伴生菌 | 第57页 |
4.2 后续工作与展望 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 | 第66-67页 |