| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 主要英文缩写表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 菌根真菌和菌根的研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1.1 丛枝菌根的发育 | 第11-15页 |
| 1.1.2 丛枝菌根的作用 | 第15-16页 |
| 1.1.3 丛枝菌根的研究现状 | 第16页 |
| 1.1.4 丛枝菌根的应用 | 第16-17页 |
| 1.2 丛枝菌根共生中的信号通路 | 第17-21页 |
| 1.2.1 丛枝菌根真菌与宿主接触前的小分子信号交换 | 第17-18页 |
| 1.2.2 丛枝菌根共生信号通路中的受体蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.3 细胞核内钙信号激活及钙信号解析 | 第19-21页 |
| 1.2.4 共生途径中的转录因子及其下游基因 | 第21页 |
| 1.3 蒺藜苜蓿的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.4 选题意义及依据 | 第23-25页 |
| 2 实验材料与方法 | 第25-47页 |
| 2.1 实验常用仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.1 苜蓿材料 | 第26页 |
| 2.2.2 菌株 | 第26页 |
| 2.2.3 质粒载体 | 第26页 |
| 2.3 实验试剂 | 第26-27页 |
| 2.4 实验常用溶液的配制 | 第27-31页 |
| 2.4.1 DNA提取Buffer（1 升的量）的配置 | 第27页 |
| 2.4.2 提取DNA时溶液III的配置 | 第27页 |
| 2.4.3 SOB-Mg2+培养基的配置（pH 6.7-7.0) | 第27页 |
| 2.4.4 酵母实验所用试剂的配置 | 第27-28页 |
| 2.4.5 蛋白印迹溶液和蛋白胶的配制 | 第28-29页 |
| 2.4.6 菌根染色液配制 | 第29-30页 |
| 2.4.7 分离拟南芥原生质体溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.5 实验方法: | 第31-45页 |
| 2.5.1 苜蓿种子消毒和萌发 | 第31页 |
| 2.5.2 苜蓿的种植 | 第31-32页 |
| 2.5.3 苜蓿基因组DNA的提取 | 第32页 |
| 2.5.4 苜蓿根中RNA的提取 | 第32页 |
| 2.5.5 去除RNA中的基因组DNA | 第32-33页 |
| 2.5.6 反转录PCR | 第33页 |
| 2.5.7 荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 2.5.8 扩增基因普通PCR程序和体系 | 第34-35页 |
| 2.5.9 DNA凝胶片段的回收 | 第35页 |
| 2.5.10 质粒提取 | 第35-36页 |
| 2.5.11 大肠杆菌热激感受态制备与转化 | 第36-37页 |
| 2.5.12 酵母双杂的转化方法 | 第37-38页 |
| 2.5.13 酵母杂交（Mating） | 第38页 |
| 2.5.14 点板子 | 第38页 |
| 2.5.15 蛋白诱导 | 第38-42页 |
| 2.5.16 苜蓿Tnt1插入纯合体鉴定步骤 | 第42页 |
| 2.5.17 菌根染色 | 第42-43页 |
| 2.5.18 菌根侵染率的统计 | 第43页 |
| 2.5.19 拟南芥原生质体的分离与转化 | 第43-44页 |
| 2.5.20 构建载体 | 第44-45页 |
| 2.6 实验所用引物 | 第45-47页 |
| 2.6.1 RT-PCR所用引物 | 第45页 |
| 2.6.2 纯合突变体鉴定引物 | 第45-46页 |
| 2.6.3 构建载体所用引物 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-63页 |
| 3.1 MtDIP1生物学信息分析 | 第47-50页 |
| 3.1.1 MtDIP1与OsDIP1序列对比分析 | 第47-48页 |
| 3.1.2 MtDIP1的基因表达图谱分析 | 第48-49页 |
| 3.1.3 丛枝菌根真菌诱导前后MtDIP1转录水平的分析 | 第49-50页 |
| 3.2 苜蓿中dip1的表型和DIP1表达模式分析 | 第50-58页 |
| 3.2.1 dip1-1 和dip1-2 的Tnt1突变体的获得和鉴定 | 第50-51页 |
| 3.2.2 dip1-1 和dip1-2 纯合植株的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.2.3 dip1-1 和dip1-2 突变体中DIP1的表达量分析 | 第52-53页 |
| 3.2.4 dip1-1 和dip1-2 的丛枝菌根表型分析 | 第53-54页 |
| 3.2.5 dip1-1 的根瘤表型分析 | 第54-55页 |
| 3.2.6 DIP1对丛枝菌根真菌侵染过程的分析 | 第55-57页 |
| 3.2.7 dip1突变体中丛枝菌根真菌诱导基因的表达分析 | 第57-58页 |
| 3.3 DIP1调控丛枝菌根共生的分子机制研究 | 第58-60页 |
| 3.3.1 酵母双杂(Y_2H）与Pull down证明DIP1与DELLA相互作用 | 第59-60页 |
| 3.3.2 酵母双杂(Y_2H）与Pull down证明DIP1与RAM1相互作用 | 第60页 |
| 3.4 苜蓿中DELLA-MtDIP1-RAM1对下游基因的直接激活 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 4.1 MtDIP1的表达模式 | 第63页 |
| 4.2 丛枝菌根真菌共生中GRAS蛋白的调控网络 | 第63-65页 |
| 5 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
