致谢 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-34页 |
1.1 激发子诱导植物免疫反应(PTI) | 第16-18页 |
1.2 效应子激发的植物免疫反应(ETI) | 第18-20页 |
1.3 MAPK级联反应在植物免疫中的作用 | 第20-23页 |
1.3.1 MAPK级联反应在拟南芥抗病中作用 | 第20-22页 |
1.3.1.1 MAPK级联反应参与PTI抗病反应 | 第20-21页 |
1.3.1.2 植物MAPK级联反应参与ETI抗病反应 | 第21-22页 |
1.3.1.3 MAPK级联反应参与其他免疫反应 | 第22页 |
1.3.2 MAPK级联反应在番茄抗病中作用 | 第22-23页 |
1.4 钙离子在植物抗病中的作用 | 第23-28页 |
1.4.1 CaMs和CMLs在植物免疫中作用 | 第23-24页 |
1.4.2 CDPKs在植物免疫中作用 | 第24-25页 |
1.4.3 CAMTA/SR在植物抗逆中的作用 | 第25-28页 |
1.4.3.1 CAMTA/SR蛋白结构 | 第25-27页 |
1.4.3.2 CAMTAs在植物中的作用 | 第27-28页 |
1.5 植物Rboh基因在植物中的作用 | 第28-31页 |
1.5.1 植物Rboh蛋白结构特征 | 第28-29页 |
1.5.2 植物Rboh基因细胞生长和植物发育中的作用 | 第29-30页 |
1.5.3 植物Rboh基因在植物非生物胁迫中的作用 | 第30页 |
1.5.4 植物Rboh在植物抗病中的作用 | 第30-31页 |
1.6 植物SAHH基因在植物中的作用 | 第31-33页 |
1.6.1 蛋氨酸循环 | 第31-32页 |
1.6.2 植物SAHH在甲基化过程中的作用 | 第32页 |
1.6.3 植物SAHH基因在植物中的作用 | 第32-33页 |
1.7 本研究的主要目的和主要内容 | 第33-34页 |
第二章 材料与方法 | 第34-43页 |
2.1 材料与处理 | 第34页 |
2.2 基因cDNA的克隆 | 第34页 |
2.3 DNA序列的测定及比对分析 | 第34-35页 |
2.4 总RNA的提取 | 第35页 |
2.5 VIGS载体构建和农杆菌转化 | 第35-36页 |
2.6 VIGS体系的建立 | 第36页 |
2.7 GFP过表达载体的构建 | 第36-37页 |
2.8 本氏烟瞬时表达体系的建立 | 第37页 |
2.9 蛋白的提取 | 第37页 |
2.10 Western blotting | 第37-38页 |
2.11 荧光实时定量PCR(Real-time PCR) | 第38页 |
2.12 灰霉菌的培养及其接种 | 第38-40页 |
2.12.1 灰霉菌的培养 | 第38-39页 |
2.12.2 灰霉菌的接种实验 | 第39页 |
2.12.3 灰霉菌病斑大小的统计 | 第39页 |
2.12.4 灰霉菌菌量测定 | 第39-40页 |
2.13 Pseudomonas syringae pv.tomato接种处理 | 第40页 |
2.14 DAB染色检测活性氧的产生 | 第40-41页 |
2.15 台酚蓝染色 | 第41页 |
2.16 转录活性分析 | 第41页 |
2.17 亚细胞定位 | 第41页 |
2.18 干旱处理 | 第41-43页 |
2.18.1 失水率的检测 | 第42页 |
2.18.2 根生长情况的检测 | 第42页 |
2.18.3 抗旱基因表达 | 第42-43页 |
第三章 番茄SlMKK2和SlMKK4在番茄对灰霉病抗性中的作用 | 第43-60页 |
摘要 | 第43-44页 |
3.1 结果 | 第44-57页 |
3.1.1 番茄SlMKKs家族基因序列分析 | 第44页 |
3.1.2 番茄SlMKKs基因表达分析 | 第44-47页 |
3.1.3 SlMKK2和SlMKK4沉默植株对灰霉菌感病 | 第47-49页 |
3.1.4 沉默SlMKK2和SlMKK4基因减弱灰霉菌诱导的植物抗病反应 | 第49-54页 |
3.1.5 瞬时过表达SlMKK2和SlMKK4激活对灰霉菌抗病反应 | 第54-57页 |
3.2 讨论 | 第57-60页 |
第四章 番茄SlSRs家族基因在植物抗病抗逆中的作用 | 第60-79页 |
摘要 | 第60-61页 |
4.1 结果 | 第61-76页 |
4.1.1 番茄CAMTA/SR家族基因诱导表达 | 第61-65页 |
4.1.2 SlSR1和SlSR3L沉默植株增强对灰霉菌和Pst DC3000的抗性 | 第65-69页 |
4.1.3 SlSR1和SlSR3L沉默植株自发诱导植物免疫反应 | 第69-71页 |
4.1.4 SlSR1L沉默植株对干旱逆境敏感 | 第71-72页 |
4.1.5 SlSRs亚细胞定位 | 第72-76页 |
4.1.6 SlSRs蛋白具有转录激活活性 | 第76页 |
4.2 讨论 | 第76-79页 |
第五章 SlRbohB在番茄对灰霉菌抗病中的作用 | 第79-100页 |
摘要 | 第79-80页 |
5.1 结果 | 第80-97页 |
5.1.1 番茄SlRbohs家族基因分析 | 第80-82页 |
5.1.2 番茄SlRbohs基因在病原菌侵染时表达模式 | 第82-84页 |
5.1.3 SlRbohB沉默植株对灰霉菌更加感病 | 第84-88页 |
5.1.4 SlRbohB沉默植株减弱灰霉菌诱导产生的免疫反应 | 第88-90页 |
5.1.5 SlRbohB沉默植株减弱激发子flg22诱导产生的免疫反应 | 第90-92页 |
5.1.6 本氏烟中瞬时过表达SlRbohB增强植株对灰霉菌的抗性 | 第92-94页 |
5.1.7 SlRbohB沉默植株对干旱敏感 | 第94-96页 |
5.1.8 SlRbohB亚细胞定位 | 第96-97页 |
5.2 讨论 | 第97-100页 |
第六章 SlSAHHs家族基因在植物抗病中的作用 | 第100-118页 |
摘要 | 第100-101页 |
6.1 结果 | 第101-114页 |
6.1.1 番茄SlSAHHs基因序列分析 | 第101-103页 |
6.1.2 SlSAHHs基因在不同组织和处理后表达模式 | 第103-106页 |
6.1.3 SlSAHHs沉默植株生长异常且诱导植物免疫反应 | 第106-108页 |
6.1.4 SlSAHHa沉默植株增强植物抗病性 | 第108-113页 |
6.1.5 SlSAHHa沉默植株增强对干旱逆境的适应 | 第113-114页 |
6.2 讨论 | 第114-118页 |
第七章 全文总结和今后研究 | 第118-120页 |
参考文献 | 第120-142页 |
附录Ⅰ 本文引物序列 | 第142-146页 |