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斑马鱼Ly6家族成员的鉴别及PSCA-like基因功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 引言第13-37页
    1.1 淋巴抗原 6(lymphocyte antigen 6,Ly6)家族第13-18页
        1.1.1 Ly6 家族的特征第13-14页
        1.1.2 Ly6 家族成员的功能第14-18页
            1.1.2.1 哺乳动物中Ly6 成员的功能第15-17页
            1.1.2.2 Ly6 基因在其他物种的功能第17-18页
    1.2 斑马鱼的视觉系统第18-34页
        1.2.1 斑马鱼眼的结构第18-19页
        1.2.2 斑马鱼视网膜结构第19-21页
        1.2.3 光传导第21-23页
        1.2.4 斑马鱼眼的发育第23-30页
            1.2.4.1 眼原基的特异形成第24-25页
            1.2.4.2 眼的形态发生第25页
            1.2.4.3 视网膜的神经发生第25-28页
            1.2.4.4 感光细胞的发育第28-30页
        1.2.5 测量斑马鱼视觉行为第30-32页
            1.2.5.1 视动力学反应(Optokinetic response (OKR))第30-31页
            1.2.5.2 视运动学反应(Optomotor response (OMR))第31页
            1.2.5.3 惊吓反应(The startle response,SR)第31页
            1.2.5.4 趋光行为(Phototactic behaviour (PTB))第31-32页
            1.2.5.5 躲避反应 (Escape response (ER))第32页
        1.2.6 斑马鱼是一个眼科学研究的优势动物模型第32-33页
        1.2.7 应用斑马鱼突变体研究人类眼科疾病第33-34页
    1.3 Ly6 基因与视网膜第34-35页
    1.4 本论文研究的目的和意义第35-36页
    1.5 本研究采取的技术路线和方案第36-37页
第二章 实验材料与方法第37-50页
    2.1 实验材料第37-39页
        2.1.1 主要的实验试剂第37页
        2.1.2 主要的实验仪器第37-38页
        2.1.3 主要的溶液配制第38-39页
    2.2 实验方法第39-50页
        2.2.1 斑马鱼养殖第39-40页
        2.2.2 构建和筛选斑马鱼 PSCA-like突变体第40-42页
        2.2.3 基因组提取第42页
        2.2.4 RNA提取第42页
        2.2.5 cDNA 合成和 PCR 反应第42-43页
        2.2.6 连接和转化第43页
        2.2.7 整体胚胎原位杂交第43-45页
        2.2.8 冰冻切片第45-46页
        2.2.9 冰冻切片原位杂交第46页
        2.2.10 冰冻切片免疫组化第46-47页
        2.2.11 整体胚胎免疫组化第47-48页
        2.2.12 TUNEL原位检测细胞死亡第48页
        2.2.13 体外合成mRNA第48页
        2.2.14 显微注射第48-49页
        2.2.15 生物信息学分析第49-50页
第三章 结果第50-89页
    3.1 斑马鱼中的Ly6 家族成员第50-56页
        3.1.1 鉴别斑马鱼的Ly6 家族基因第50-52页
        3.1.2 斑马鱼Ly6 家族基因组结构第52-53页
        3.1.3 斑马鱼Ly6 家族成员的序列分析第53-56页
    3.2 几个Ly6 基因在斑马鱼发育中的表达模式第56-64页
        3.2.1 Ly6 家族基因XP_706427 表达在表皮第56-59页
        3.2.2 Ly6 家族基因XP_002664005 和XP_002664937 表达在侧线神经丘第59-63页
        3.2.3 其他几个Ly6 基因的表达模式第63-64页
    3.3 Ly6 家族基因 PSCA-like在斑马鱼发育中的作用第64-89页
        3.3.1 斑马鱼 PSCA-like基因的分子特征第65-66页
        3.3.2 斑马鱼的 PSCA-like基因编码一个GPI锚定的膜蛋白第66-67页
        3.3.3 斑马鱼 PSCA-like基因的时空表达模式第67-69页
        3.3.4 PSCA-like基因的调控序列分析第69-71页
        3.3.5 Otx5 调节 PSCA-like基因在松果体上的表达第71-72页
        3.3.6 PSCA-like在松果体上的表达不受光照的调控第72-74页
        3.3.7 敲降 PSCA-like基因的斑马鱼表型第74-75页
        3.3.8 敲降斑马鱼 PSCA-like不会影响视网膜的背腹模式第75-76页
        3.3.9 敲降PSCA-like会延迟感光细胞的分化第76-77页
        3.3.10 PSCA-like突变体的构建第77-78页
        3.3.11 PSCA-like突变体早期发育正常第78-79页
        3.3.12 感光细胞在 PSCA-like突变体中发生退化第79-83页
        3.3.13 感光细胞细胞表达另外一个Ly6 基因第83-84页
        3.3.14 PSCA-like和PSCA-like2 的直系同源基因第84-89页
第四章 讨论和结论第89-96页
    4.1 讨论第89-94页
        4.1.1 斑马鱼中的Ly6 基因第89-90页
        4.1.2 斑马鱼 PS CA-like在视网膜早期发育中的作用第90-91页
        4.1.3 PSCA-like突变体中视网膜病变的机制第91-92页
        4.1.4 PSCA-like在松果体中的作用第92-93页
        4.1.5 PSCA-like调节神经元兴奋性第93-94页
    4.2 结论第94-96页
参考文献第96-113页
附录 1 克隆基因所用的引物序列第113-114页
附录 2 探针质粒第114-115页
个人简历第115-116页
发表的学术论文第116-117页
致谢第117-118页

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