摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 引言 | 第13-37页 |
1.1 淋巴抗原 6(lymphocyte antigen 6,Ly6)家族 | 第13-18页 |
1.1.1 Ly6 家族的特征 | 第13-14页 |
1.1.2 Ly6 家族成员的功能 | 第14-18页 |
1.1.2.1 哺乳动物中Ly6 成员的功能 | 第15-17页 |
1.1.2.2 Ly6 基因在其他物种的功能 | 第17-18页 |
1.2 斑马鱼的视觉系统 | 第18-34页 |
1.2.1 斑马鱼眼的结构 | 第18-19页 |
1.2.2 斑马鱼视网膜结构 | 第19-21页 |
1.2.3 光传导 | 第21-23页 |
1.2.4 斑马鱼眼的发育 | 第23-30页 |
1.2.4.1 眼原基的特异形成 | 第24-25页 |
1.2.4.2 眼的形态发生 | 第25页 |
1.2.4.3 视网膜的神经发生 | 第25-28页 |
1.2.4.4 感光细胞的发育 | 第28-30页 |
1.2.5 测量斑马鱼视觉行为 | 第30-32页 |
1.2.5.1 视动力学反应(Optokinetic response (OKR)) | 第30-31页 |
1.2.5.2 视运动学反应(Optomotor response (OMR)) | 第31页 |
1.2.5.3 惊吓反应(The startle response,SR) | 第31页 |
1.2.5.4 趋光行为(Phototactic behaviour (PTB)) | 第31-32页 |
1.2.5.5 躲避反应 (Escape response (ER)) | 第32页 |
1.2.6 斑马鱼是一个眼科学研究的优势动物模型 | 第32-33页 |
1.2.7 应用斑马鱼突变体研究人类眼科疾病 | 第33-34页 |
1.3 Ly6 基因与视网膜 | 第34-35页 |
1.4 本论文研究的目的和意义 | 第35-36页 |
1.5 本研究采取的技术路线和方案 | 第36-37页 |
第二章 实验材料与方法 | 第37-50页 |
2.1 实验材料 | 第37-39页 |
2.1.1 主要的实验试剂 | 第37页 |
2.1.2 主要的实验仪器 | 第37-38页 |
2.1.3 主要的溶液配制 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-50页 |
2.2.1 斑马鱼养殖 | 第39-40页 |
2.2.2 构建和筛选斑马鱼 PSCA-like突变体 | 第40-42页 |
2.2.3 基因组提取 | 第42页 |
2.2.4 RNA提取 | 第42页 |
2.2.5 cDNA 合成和 PCR 反应 | 第42-43页 |
2.2.6 连接和转化 | 第43页 |
2.2.7 整体胚胎原位杂交 | 第43-45页 |
2.2.8 冰冻切片 | 第45-46页 |
2.2.9 冰冻切片原位杂交 | 第46页 |
2.2.10 冰冻切片免疫组化 | 第46-47页 |
2.2.11 整体胚胎免疫组化 | 第47-48页 |
2.2.12 TUNEL原位检测细胞死亡 | 第48页 |
2.2.13 体外合成mRNA | 第48页 |
2.2.14 显微注射 | 第48-49页 |
2.2.15 生物信息学分析 | 第49-50页 |
第三章 结果 | 第50-89页 |
3.1 斑马鱼中的Ly6 家族成员 | 第50-56页 |
3.1.1 鉴别斑马鱼的Ly6 家族基因 | 第50-52页 |
3.1.2 斑马鱼Ly6 家族基因组结构 | 第52-53页 |
3.1.3 斑马鱼Ly6 家族成员的序列分析 | 第53-56页 |
3.2 几个Ly6 基因在斑马鱼发育中的表达模式 | 第56-64页 |
3.2.1 Ly6 家族基因XP_706427 表达在表皮 | 第56-59页 |
3.2.2 Ly6 家族基因XP_002664005 和XP_002664937 表达在侧线神经丘 | 第59-63页 |
3.2.3 其他几个Ly6 基因的表达模式 | 第63-64页 |
3.3 Ly6 家族基因 PSCA-like在斑马鱼发育中的作用 | 第64-89页 |
3.3.1 斑马鱼 PSCA-like基因的分子特征 | 第65-66页 |
3.3.2 斑马鱼的 PSCA-like基因编码一个GPI锚定的膜蛋白 | 第66-67页 |
3.3.3 斑马鱼 PSCA-like基因的时空表达模式 | 第67-69页 |
3.3.4 PSCA-like基因的调控序列分析 | 第69-71页 |
3.3.5 Otx5 调节 PSCA-like基因在松果体上的表达 | 第71-72页 |
3.3.6 PSCA-like在松果体上的表达不受光照的调控 | 第72-74页 |
3.3.7 敲降 PSCA-like基因的斑马鱼表型 | 第74-75页 |
3.3.8 敲降斑马鱼 PSCA-like不会影响视网膜的背腹模式 | 第75-76页 |
3.3.9 敲降PSCA-like会延迟感光细胞的分化 | 第76-77页 |
3.3.10 PSCA-like突变体的构建 | 第77-78页 |
3.3.11 PSCA-like突变体早期发育正常 | 第78-79页 |
3.3.12 感光细胞在 PSCA-like突变体中发生退化 | 第79-83页 |
3.3.13 感光细胞细胞表达另外一个Ly6 基因 | 第83-84页 |
3.3.14 PSCA-like和PSCA-like2 的直系同源基因 | 第84-89页 |
第四章 讨论和结论 | 第89-96页 |
4.1 讨论 | 第89-94页 |
4.1.1 斑马鱼中的Ly6 基因 | 第89-90页 |
4.1.2 斑马鱼 PS CA-like在视网膜早期发育中的作用 | 第90-91页 |
4.1.3 PSCA-like突变体中视网膜病变的机制 | 第91-92页 |
4.1.4 PSCA-like在松果体中的作用 | 第92-93页 |
4.1.5 PSCA-like调节神经元兴奋性 | 第93-94页 |
4.2 结论 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-113页 |
附录 1 克隆基因所用的引物序列 | 第113-114页 |
附录 2 探针质粒 | 第114-115页 |
个人简历 | 第115-116页 |
发表的学术论文 | 第116-117页 |
致谢 | 第117-118页 |