| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 文献综述 | 第16-35页 |
| 第一章 PPARs—脂肪代谢的关键调控子 | 第16-23页 |
| ·PPARs 的发现、分类和染色体定位 | 第16页 |
| ·PPARs 的结构和DNA 结合特性 | 第16-17页 |
| ·PPARs 的转录调控 | 第17-18页 |
| ·PPARs 辅激活子 | 第18-20页 |
| ·PPARs 在脂肪代谢中的作用 | 第20-23页 |
| 第二章 转录辅激活子MED1 | 第23-30页 |
| ·MED1 简介 | 第23-24页 |
| ·MED1 基因的表达 | 第24页 |
| ·周身MED1 基因敲除鼠 | 第24-25页 |
| ·MED1 组织特异性敲除鼠 | 第25-26页 |
| ·MED1 对PPARs 核受体的调控作用 | 第26-29页 |
| ·MED1 对其他核受体和转录因子的调控作用 | 第29-30页 |
| 第三章 其他转录辅激活子SRCs、PRIP、PRIC285 和PIMT 概述 | 第30-35页 |
| ·SRCs 研究进展 | 第30-32页 |
| ·PRIC285 研究进展 | 第32-33页 |
| ·PRIP 研究进展 | 第33-34页 |
| ·PIMT 研究进展 | 第34-35页 |
| 实验研究前言 | 第35-100页 |
| 第四章 肝脏MED1 特异性敲除鼠的繁殖鉴定及重组腺病毒的制备 | 第37-47页 |
| ·材料与方法 | 第37-41页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·实验用细胞系 | 第37页 |
| ·重组腺病毒载体来源 | 第37页 |
| ·重组腺病毒的扩繁、纯化和浓度测定 | 第37-39页 |
| ·基因型鉴定 | 第39页 |
| ·X-gal 染色法 | 第39-40页 |
| ·苏木素-伊红（H&E）染色法 | 第40页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第40页 |
| ·总RNA 提取和Real-time PCR | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·MED1 肝脏特异性敲除鼠的鉴定 | 第41-43页 |
| ·腺病毒载体的制备与鉴定 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·基因敲除技术的发展 | 第45-46页 |
| ·重组腺病毒的生产 | 第46-47页 |
| 第五章 MED1 是PPARγ诱导小鼠脂肪肝生成的必需辅激活子 | 第47-71页 |
| ·材料与方法 | 第47-51页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·苏木素-伊红（H&E）染色法 | 第47页 |
| ·油红O 染色法 | 第47-48页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第48页 |
| ·免疫荧光染色 | 第48页 |
| ·总RNA 提取和Real-time PCR | 第48页 |
| ·Northern Blot 检测基因m RNA 表达变化 | 第48-49页 |
| ·基因芯片分析 | 第49-50页 |
| ·Western Blot 检测蛋白表达水平 | 第50页 |
| ·Chromatin immunoprecipitation (ChIP)分析 | 第50-51页 |
| ·统计学分析 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-68页 |
| ·MED1 是PPARγ刺激脂肪肝形成的必需辅激活子 | 第51-54页 |
| ·MED1 是PPARγ诱导肝脏生脂基因表达的必需辅激活子 | 第54-57页 |
| ·基因表达谱分析 | 第57-64页 |
| ·外源表达MED1 恢复PPARγ诱导的MED1~(ΔLiv) 鼠脂肪肝形成 | 第64-65页 |
| ·外源表达MED1 挽救PPARγ诱导的MED1~(ΔLiv) 鼠肝脏生脂基因的表达 | 第65-66页 |
| ·高表达PPARγ的MED1~(ΔLiv) 鼠肝脏aP2 启动子区辅激活子的募集 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| ·PPARγ调控脂肪肝的形成 | 第68页 |
| ·MED1 通过PPARγ介导调控脂肪肝的形成 | 第68-69页 |
| ·MED1 在PPARγ介导下调控脂滴蛋白的表达 | 第69-70页 |
| ·MED1 在PPARγ介导下调控FGF21 的表达 | 第70-71页 |
| 第六章 MED1 是PPARγ刺激小鼠肝细胞脂肪变的必需辅激活子 | 第71-76页 |
| ·材料与方法 | 第71-72页 |
| ·实验动物 | 第71页 |
| ·实验试剂 | 第71页 |
| ·原代肝细胞的分离和培养 | 第71页 |
| ·细胞油红O 染色法 | 第71-72页 |
| ·总RNA 提取和Real-time PCR | 第72页 |
| ·Western Blot 法 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-75页 |
| ·MED1 对PPARγ诱导的肝细胞脂肪变性是必需的 | 第72-74页 |
| ·MED1 对PPARγ诱导的肝细胞脂肪生成基因的表达是必需的 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-76页 |
| ·原代肝细胞的分离培养 | 第75页 |
| ·MED1 在PPARγ诱导肝细胞脂肪变中的重要调控作用 | 第75-76页 |
| 第七章 转录辅激活子SRC-1、PRIC285、PRIP 和PIMT 在PPARγ诱导脂肪肝形成中的调控作用 | 第76-86页 |
| ·材料与方法 | 第76页 |
| ·实验动物 | 第76页 |
| ·H&E 染色法 | 第76页 |
| ·油红O 染色法 | 第76页 |
| ·Northern Blot 检测RNA 表达变化 | 第76页 |
| ·结果 | 第76-84页 |
| ·SRC-1 在PPARγ诱导的脂肪肝形成中是冗余的 | 第76-78页 |
| ·PRIC285 对PPARγ诱导的脂肪肝生成无影响 | 第78-80页 |
| ·PRIP 在PPARγ刺激的脂肪肝生成中是冗余的 | 第80-82页 |
| ·PIMT 对PPARγ诱导的脂肪肝生成无影响 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·周身敲除SRC-1 或PRIC285 鼠在PPARγ诱导下形成脂肪肝 | 第84-85页 |
| ·肝脏特异性敲除PRIP 或PIMT 鼠在PPARγ刺激下形成脂肪肝 | 第85-86页 |
| 第八章 MED1 是高脂日粮诱导脂肪肝形成的必需调控子 | 第86-93页 |
| ·材料与方法 | 第86-88页 |
| ·实验动物 | 第86-87页 |
| ·H&E 染色法 | 第87页 |
| ·油红O 染色法 | 第87页 |
| ·生化分析 | 第87页 |
| ·Western Blot 分析法 | 第87页 |
| ·葡萄糖耐受性试验(glucose tolerance test, GTT) | 第87页 |
| ·胰岛素耐受性试验(Insulin tolerance test, ITT) | 第87-88页 |
| ·结果 | 第88-92页 |
| ·MED1~(ΔLiv) 鼠抵抗高脂日粮诱导的脂肪肝形成 | 第88-90页 |
| ·MED1 能够提高葡糖糖耐受性和胰岛素敏感性 | 第90-92页 |
| ·讨论 | 第92-93页 |
| ·MED1 调控高脂日粮诱导的脂肪肝形成不依赖PPARγ信号通路 | 第92页 |
| ·小鼠MED1 肝脏特异性敲除促进葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性增加 | 第92-93页 |
| 第九章 禁食状态下MED1 肝脏特异性敲除鼠呈现高脂血症 | 第93-100页 |
| ·材料与方法 | 第93-94页 |
| ·实验动物 | 第93页 |
| ·实验试剂 | 第93-94页 |
| ·甘油三酯和胆固醇含量测定 | 第94页 |
| ·快速蛋白液相色谱（FPLC）分析 | 第94页 |
| ·统计学分析 | 第94页 |
| ·结果 | 第94-98页 |
| ·形态学分析 | 第94-95页 |
| ·生物化学分析 | 第95页 |
| ·小鼠肝脏特异性缺失MED1 导致VLDL 积聚 | 第95-98页 |
| ·讨论 | 第98-100页 |
| 结论 | 第100-101页 |
| 创新点 | 第101-102页 |
| 下一步研究工作 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 缩略词表 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 个人简介 | 第119-120页 |
