| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 第一章 禽流感病毒 NS1 非结构蛋白研究进展 | 第11-21页 |
| 1.1 禽流感概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 禽流感病毒生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 AIV 的流行病学变化 | 第12-13页 |
| 1.1.3 H9N2 亚型禽流感概述 | 第13页 |
| 1.1.4 禽流感疫苗的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 A 型流感病毒 NS1 非结构蛋白研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 NS1 蛋白的分群及进化分析 | 第15页 |
| 1.2.2 NS1 基因及蛋白结构 | 第15-16页 |
| 1.2.3 NS1 蛋白的功能 | 第16-18页 |
| 1.3 NS1 蛋白的应用 | 第18-21页 |
| 1.3.1 NS1 蛋白在流感鉴别诊断上的应用 | 第18-19页 |
| 1.3.2 针对 NS1 蛋白的病毒疫苗 | 第19页 |
| 1.3.3 靶向 NS1 蛋白结构上功能的抗病毒药物 | 第19-20页 |
| 1.3.4 NS1 蛋白的抗肿瘤作用 | 第20-21页 |
| 试验研究 | 第21-45页 |
| 第二章 H9N2 亚型 AIV 诱导 DF-1 细胞凋亡检测 | 第21-31页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 病毒和细胞 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 病毒的增殖及 CPE 观察 | 第24页 |
| 2.2.2 H9N2 AIV TCID50的测定 | 第24页 |
| 2.2.3 H9N2 AIV 感染 DF-1 细胞后 NS1 蛋白表达的检测 | 第24-25页 |
| 2.2.4 DNA Ladder 检测 | 第25-26页 |
| 2.2.5 Hoechst 染色检测细胞凋亡 | 第26页 |
| 2.3 结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 H9N2 AIV TCID50检测结果 | 第26-27页 |
| 2.3.2 DF-1 细胞感染 AIV 后 NS1 蛋白的表达 | 第27页 |
| 2.3.3 细胞病变（CPE）的观察 | 第27-28页 |
| 2.3.4 DNA 片段化分析 | 第28页 |
| 2.3.5 DF-1 细胞凋亡细胞核形态学变化 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 H9N2 亚型 AIV NS1 基因突变体的构建及真核表达 | 第31-39页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 细胞和质粒 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第31-32页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 NS1 蛋白定点突变真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.2.2 NS1 蛋白突变体在 DF-1 细胞中的瞬时表达 | 第33-34页 |
| 3.2.3 NS1 蛋白及其突变体在 DF-1 细胞中的亚细胞定位 | 第34页 |
| 3.2.4 Western blotting 检测 NS1 蛋白突变体在 DF-1 细胞中的表达 | 第34页 |
| 3.3 结果 | 第34-37页 |
| 3.3.1 pEGFP-C1-NS1 的定点突变 PCR 扩增 | 第34-35页 |
| 3.3.2 NS1 蛋白突变体质粒序列分析 | 第35页 |
| 3.3.3 NS1 蛋白及其突变体在 DF-1 细胞中的表达 | 第35-36页 |
| 3.3.4 NS1 蛋白及其突变体在 DF-1 细胞中的亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 H9N2 禽流感 NS1 蛋白点突变对诱导细胞凋亡的影响 | 第39-45页 |
| 4.1 材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 细胞和质粒 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第39页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第39-40页 |
| 4.2 方法 | 第40-41页 |
| 4.2.1 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第40页 |
| 4.2.2 Caspase-3，9 活性检测 | 第40页 |
| 4.2.3 Western blotting 检测 Caspase-3，9 | 第40-41页 |
| 4.3 结果 | 第41-43页 |
| 4.3.1 NS1 蛋白及其突变体诱导细胞凋亡率的检测 | 第41-42页 |
| 4.3.2 Caspase-3，9 活性检测结果 | 第42-43页 |
| 4.3.3 Caspase-3，9 的表达变化 | 第43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-44页 |
| 4.5 小结 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
