| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第14-23页 |
| 第一章 Foxc2 的生物学功能 | 第14-18页 |
| 1.1 FOXC2 与脂代谢 | 第14-16页 |
| 1.1.1 Foxc2 与脂肪细胞分化 | 第14-15页 |
| 1.1.2 Foxc2 与线粒体 | 第15-16页 |
| 1.2 FOXC2 与代谢性疾病 | 第16-17页 |
| 1.3 FOXC2 的作用机制 | 第17-18页 |
| 第二章 细胞凋亡研究进展 | 第18-23页 |
| 2.1 参与细胞凋亡的关键蛋白 | 第18-20页 |
| 2.1.1 半胱氨酸蛋白酶家族 | 第18-19页 |
| 2.1.2 Bcl-2 蛋白家族 | 第19页 |
| 2.1.3 IAP 蛋白家族 | 第19-20页 |
| 2.2 细胞凋亡调控机制 | 第20-22页 |
| 2.2.1 受体介导的细胞凋亡 | 第20页 |
| 2.2.2 内源的细胞凋亡途径 | 第20-21页 |
| 2.2.3 p53 直接参与的细胞凋亡 | 第21页 |
| 2.2.4 其他调控 | 第21-22页 |
| 2.3 FOXC2 基因与细胞凋亡 | 第22-23页 |
| 试验研究 | 第23-51页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 第三章 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞增殖的影响 | 第24-34页 |
| 3.1 材料 | 第24页 |
| 3.1.1 细胞 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 3.1.3 设备仪器 | 第24页 |
| 3.2 方法 | 第24-28页 |
| 3.2.1 质粒载体提取 | 第24-25页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第25页 |
| 3.2.3 质粒载体转染 | 第25-26页 |
| 3.2.4 细胞总 RNA 提取 | 第26页 |
| 3.2.5 反转录及实时定量 PCR | 第26页 |
| 3.2.6 细胞计数 | 第26-27页 |
| 3.2.7 细胞周期流式分析 | 第27页 |
| 3.2.8 细胞总蛋白提取 | 第27页 |
| 3.2.9 Western Blotting 检测 | 第27-28页 |
| 3.2.10 数据统计及分析 | 第28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-31页 |
| 3.3.1 Foxc2 基因过表达及干扰效率检测 | 第28-29页 |
| 3.3.2 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞细胞数量的影响 | 第29-30页 |
| 3.3.3 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞细胞周期的影响 | 第30页 |
| 3.3.4 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞增殖相关蛋白的影响 | 第30-31页 |
| 3.3.5 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞增殖调控相关信号通路的影响 | 第31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-34页 |
| 第四章 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞凋亡的影响 | 第34-43页 |
| 4.1 材料 | 第34页 |
| 4.1.1 细胞 | 第34页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.3 设备仪器 | 第34页 |
| 4.2 方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 质粒载体提取 | 第34页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第34页 |
| 4.2.3 质粒载体转染 | 第34-35页 |
| 4.2.4 JC-1 染色及流式分析 | 第35页 |
| 4.2.5 Tunel 染色 | 第35页 |
| 4.2.6 细胞总 RNA 提取 | 第35页 |
| 4.2.7 反转录及实时定量 PCR | 第35-36页 |
| 4.2.8 细胞总蛋白提取 | 第36页 |
| 4.2.9 Western Blotting 检测 | 第36页 |
| 4.2.10 数据统计及分析 | 第36页 |
| 4.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 4.3.1 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞线粒体膜电位的影响 | 第36-37页 |
| 4.3.2 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞基因组 DNA 片段化的影响 | 第37页 |
| 4.3.3 Foxc2 基因对 3T3-L1 脂肪细胞凋亡相关因子的影响 | 第37-38页 |
| 4.3.4 Foxc2 基因对血清饥饿引起的 3T3-L1 脂肪细胞凋亡的影响 | 第38-39页 |
| 4.3.5 Foxc2 基因对棕榈酸诱导的 3T3-L1 脂肪细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-43页 |
| 第五章 Foxc2 基因启动子克隆及活性研究 | 第43-51页 |
| 5.1 材料 | 第43页 |
| 5.1.1 实验动物、菌株、质粒及细胞株 | 第43页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 5.1.3 设备仪器 | 第43页 |
| 5.2 方法 | 第43-46页 |
| 5.2.1 苯酚—氯仿法提取小鼠基因组 DNA | 第43-44页 |
| 5.2.2 PCR 扩增 | 第44页 |
| 5.2.3 胶回收 | 第44-45页 |
| 5.2.4 双酶切-T4 连接 | 第45页 |
| 5.2.5 质粒载体提取 | 第45页 |
| 5.2.6 感受态细胞的制备与质粒转化 | 第45-46页 |
| 5.2.7 细胞培养 | 第46页 |
| 5.2.8 质粒载体转染 | 第46页 |
| 5.2.9 双荧光素酶活性检测 | 第46页 |
| 5.2.10 数据统计与分析 | 第46页 |
| 5.3 结果与分析 | 第46-50页 |
| 5.3.1 Foxc2 基因启动子区扩增 | 第46-47页 |
| 5.3.2 Foxc2 基因不同长度启动子片段荧光素酶报告载体的构建 | 第47-48页 |
| 5.3.3 Foxc2 基因启动子活性分析 | 第48-49页 |
| 5.3.4 Foxc2 基因启动子转录结合位点分析与鉴定 | 第49-50页 |
| 5.4 讨论 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51页 |
| 创新点 | 第51页 |
| 进一步研究内容 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 缩略词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
