| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-37页 |
| ·Withanolide类成分的研究概况 | 第15-23页 |
| ·概述 | 第15-20页 |
| ·化学成分的研究进展 | 第20-21页 |
| ·生物活性的研究进展 | 第21-23页 |
| ·自身免疫性疾病的研究进展 | 第23-26页 |
| ·常见的自身免疫性疾病 | 第23-24页 |
| ·自身免疫性疾病发病机制 | 第24-25页 |
| ·自身免疫性疾病治疗 | 第25-26页 |
| ·免疫抑制剂的研究进展 | 第26-29页 |
| ·肾上腺皮质激素类抑制剂 | 第27页 |
| ·嘌呤类抗代谢抑制剂 | 第27页 |
| ·微生物代谢产物抑制剂 | 第27-28页 |
| ·烷化剂抑制剂 | 第28页 |
| ·生物免疫抑制剂 | 第28页 |
| ·天然产物提取物免疫抑制剂 | 第28-29页 |
| ·天然产物免疫调节作用机理的研究进展 | 第29-33页 |
| ·改善免疫器官功能,调节免疫细胞发育分化 | 第30页 |
| ·调节机体特异性免疫功能 | 第30页 |
| ·调节机体非特异性免疫功能 | 第30-32页 |
| ·免疫调节作用 | 第32-33页 |
| ·研究目标、内容、创新点和意义 | 第33-37页 |
| ·研究目标 | 第33页 |
| ·研究内容 | 第33-35页 |
| ·研究创新点和意义 | 第35-37页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第37-52页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·实验动物及细胞 | 第37页 |
| ·实验提取物 | 第37页 |
| ·常用试剂 | 第37-39页 |
| ·仪器与设备 | 第39-40页 |
| ·常用试剂的配制 | 第40-45页 |
| ·常用方法 | 第45-52页 |
| ·小鼠脾脏淋巴细胞的分离及培养 | 第45页 |
| ·小鼠T淋巴细胞的分离及培养 | 第45页 |
| ·细胞计数法 | 第45-46页 |
| ·MTT法测定细胞毒性 | 第46页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第46页 |
| ·细胞质蛋白与细胞核蛋白的提取 | 第46-47页 |
| ·蛋白质的定量 | 第47页 |
| ·Western blot实验步骤 | 第47-48页 |
| ·细胞和组织中总RNA的提取 | 第48-49页 |
| ·RNA的完整性检测 | 第49-50页 |
| ·PCR反应实验步骤 | 第50-51页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳实验步骤 | 第51-52页 |
| 第3章 Withanolide类成分免疫抑制活性的体外筛选研究 | 第52-69页 |
| ·引言 | 第52-53页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·实验动物和细胞 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·统计学方法 | 第55页 |
| ·实验结果 | 第55-67页 |
| ·Withanolide类化合物(W1-W30)结构鉴定 | 第55-58页 |
| ·Withanolide类化合物的细胞毒性测定 | 第58-61页 |
| ·Withanolide类化合物对ConA活化的小鼠T淋巴细胞增殖功能的影响 | 第61-63页 |
| ·Withanolide类化合物对LPS活化的小鼠B淋巴细胞增殖功能的影响 | 第63-66页 |
| ·Withanolide类化合物的免疫抑制活性与构效关系的研究 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第4章 Withangulatin A免疫抑制活性的初步探讨 | 第69-78页 |
| ·引言 | 第69-70页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·实验动物 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70-71页 |
| ·主要试剂 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| ·统计学方法 | 第72页 |
| ·实验结果 | 第72-76页 |
| ·Withangulatin A对正常小鼠脾脏淋巴细胞的毒性研究 | 第72-73页 |
| ·Withangulatin A对ConA活化的小鼠T淋巴细胞增殖功能的影响 | 第73页 |
| ·Withangulatin A对LPS活化的小鼠B淋巴细胞增殖功能的影响 | 第73-74页 |
| ·Withangulatin A对MLR中异体抗原刺激的淋巴细胞增殖功能的影响 | 第74-75页 |
| ·Withangulatin A对二甲苯致炎的BALB/c小鼠的抗炎作用 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| ·小结 | 第77-78页 |
| 第5章 Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞功能的影响 | 第78-87页 |
| ·引言 | 第78-79页 |
| ·材料与方法 | 第79-80页 |
| ·实验动物 | 第79页 |
| ·主要仪器 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·统计学方法 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-86页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞周期的影响 | 第80-82页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞CD4~+/CD8~+的影响 | 第82-83页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞CD25~+的影响 | 第83-84页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞上清中Th1细胞因子的影响 | 第84-85页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞上清中Th2细胞因子的影响 | 第85页 |
| ·Withangulatin A对二甲苯致炎的BALB/c小鼠血清中细胞因子的影响 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第6章 Withangulatin A促进HO-1表达的作用机理研究 | 第87-98页 |
| ·引言 | 第87页 |
| ·材料与方法 | 第87-89页 |
| ·实验动物及细胞 | 第87页 |
| ·主要仪器 | 第87页 |
| ·主要试剂 | 第87-88页 |
| ·实验方法 | 第88-89页 |
| ·统计学方法 | 第89页 |
| ·结果 | 第89-95页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞中HO-1酶活力的影响 | 第89-90页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞中HO-1蛋白表达的影响 | 第90-91页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞中HO-1 mRNA表达的影响 | 第91-92页 |
| ·Withangulatin A通过MAPK途径调节小鼠T淋巴细胞中HO-1的表达 | 第92-93页 |
| ·Withangulatin A对其他相关靶蛋白的影响 | 第93-94页 |
| ·Withangulatin A对NF-κB p65核转位的影响 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第7章 COX-1、COX-2双荧光素酶报告基因筛选模型的建立 | 第98-112页 |
| ·引言 | 第98-99页 |
| ·材料与方法 | 第99-106页 |
| ·主要试剂 | 第99页 |
| ·主要仪器 | 第99页 |
| ·实验方法 | 第99-106页 |
| ·统计学方法 | 第106页 |
| ·结果 | 第106-110页 |
| ·COX-1、COX-2基因启动子的克隆 | 第106页 |
| ·COX-1、COX-2表达载体的构建 | 第106-107页 |
| ·质粒转染条件的优化 | 第107-108页 |
| ·塞莱昔布(Celecoxib)对报告基因模型的验证 | 第108-109页 |
| ·Withanolide类化合物对COX-1、COX-2基因启动子活性的影响 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 第8章 Withangulatin A特异性抑制COX-2表达的作用机理研究 | 第112-122页 |
| ·引言 | 第112页 |
| ·材料与方法 | 第112-113页 |
| ·实验动物及细胞 | 第112页 |
| ·主要试剂 | 第112页 |
| ·实验方法 | 第112-113页 |
| ·统计分析 | 第113页 |
| ·结果 | 第113-120页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞上清中PGE_2的影响 | 第113-114页 |
| ·Withangulatin A对COX-1、COX-2基因启动子活性的影响 | 第114-115页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞中COX-1、COX-2蛋白表达的影响 | 第115-117页 |
| ·Withangulatin A对小鼠T淋巴细胞中COX-1、COX-2 mRNA表达的影响 | 第117页 |
| ·Withangulatin A通过MAPK途径调节小鼠T淋巴细胞中COX-2的表达 | 第117-118页 |
| ·Withangulatin A对NF-κB p65核转位的影响 | 第118-120页 |
| ·讨论 | 第120-121页 |
| ·小结 | 第121-122页 |
| 第9章 Withangulatin A对红斑狼疮MRL/lpr小鼠的治疗作用 | 第122-136页 |
| ·引言 | 第122-123页 |
| ·材料与方法 | 第123-125页 |
| ·实验动物 | 第123页 |
| ·主要仪器 | 第123页 |
| ·主要试剂 | 第123页 |
| ·实验方法 | 第123-125页 |
| ·统计学方法 | 第125页 |
| ·实验结果 | 第125-134页 |
| ·Withangulatin A提高MRL/lpr小鼠的存活率 | 第126页 |
| ·Withangulatin A降低MRL/lpr小鼠抗ds-DNA和尿蛋白/尿肌肝水平 | 第126-127页 |
| ·Withangulatin A改善MRL/lpr小鼠脾肿大等症状 | 第127-128页 |
| ·Withangulatin A改善MRL/lpr小鼠肾小球肾炎 | 第128-130页 |
| ·Withangulatin A降低MRL/lpr小鼠肺组织中的炎性细胞浸润 | 第130-131页 |
| ·Withangulatin A对MRL/lpr小鼠脾脏中BAFF和BAFF-R蛋白表达的影响 | 第131-133页 |
| ·Withangulatin A对MRL/lpr小鼠脾脏中BAFF,BAFF-R等mRNA表达的影响 | 第133-134页 |
| ·讨论 | 第134-135页 |
| ·小结 | 第135-136页 |
| 第10章 结论 | 第136-139页 |
| 参考文献 | 第139-152页 |
| 致谢 | 第152-153页 |
| 在读期间发表论文和专利情况 | 第153页 |
