摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第1章 前言 | 第13-23页 |
1.1 赤拟谷盗概述 | 第13-14页 |
1.2 储粮害虫的磷化氢抗性研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1 磷化氢的作用机制 | 第14-16页 |
1.2.2 昆虫的磷化氢抗性机制 | 第16-19页 |
1.3 生物信息学简介 | 第19-20页 |
1.4 荧光实时定量PCR | 第20-21页 |
1.5 研究目的与意义 | 第21-23页 |
第2章 研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
2.1 研究内容 | 第23页 |
2.2 技术路线 | 第23-25页 |
第3章 赤拟谷盗p53类似基因的克隆 | 第25-39页 |
3.1 实验材料 | 第25-27页 |
3.1.1 动物材料 | 第25页 |
3.1.2 主要实验仪器及设备 | 第25-26页 |
3.1.3 主要实验试剂 | 第26页 |
3.1.4 实验常用溶液的配方 | 第26-27页 |
3.2 实验方法 | 第27-32页 |
3.2.1 总RNA的提取 | 第27-28页 |
3.2.2 第一条cDNA链的合成 | 第28-29页 |
3.2.3 设计与合成引物 | 第29页 |
3.2.4 赤拟谷盗不同品系p53类似基因编码区cDNA序列扩增 | 第29-32页 |
3.2.5 赤拟谷盗p53类似基因开放阅读框的预测 | 第32页 |
3.2.6 赤拟谷盗不同品系p53类似蛋白的对比 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-37页 |
3.3.1 总RNA的提取 | 第32-33页 |
3.3.2 赤拟谷盗p53类似基因编码区cDNA序列的扩增 | 第33-34页 |
3.3.3 赤拟谷盗p53类似基因cDNA开放阅读框的预测 | 第34页 |
3.3.4 不同品系赤拟谷盗p53类似蛋白的比对 | 第34-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
3.4.1 关于总RNA的提取 | 第37-38页 |
3.4.2 赤拟谷盗不同品系p53类似基因的克隆 | 第38页 |
3.4.3 不同品系赤拟谷盗p53类似蛋白的比对 | 第38-39页 |
第4章 赤拟谷盗p53类似蛋白序列的的生物信息学分析 | 第39-47页 |
4.1 分析方法 | 第39-40页 |
4.1.1 分析蛋白质的基本性质 | 第39页 |
4.1.2 分析蛋白质序列的同源性 | 第39页 |
4.1.3 分析蛋白质的保守结构域 | 第39页 |
4.1.4 分析蛋白质的功能基序 | 第39-40页 |
4.1.5 分析蛋白质的二级结构 | 第40页 |
4.1.6 分析蛋白质的三级结构 | 第40页 |
4.2 结果与分析 | 第40-46页 |
4.2.1 赤拟谷盗p53类似蛋白质序列的分析结果 | 第40-46页 |
4.3 讨论 | 第46-47页 |
第5章 基于荧光实时定量RT-PCR的赤拟谷盗内参基因的筛选 | 第47-59页 |
5.1 实验材料 | 第47页 |
5.1.1 动物材料 | 第47页 |
5.1.2 主要实验试剂和仪器 | 第47页 |
5.2 实验方法 | 第47-50页 |
5.2.1 总RNA的提取及第一链cDNA的制备 | 第47-48页 |
5.2.2 qRT-PCR实验 | 第48-50页 |
5.3 结果分析 | 第50-57页 |
5.3.1 总RNA提取结果 | 第50-51页 |
5.3.2 引物专一性检测 | 第51-54页 |
5.3.3 qRT-PCR的扩增效率 | 第54-55页 |
5.3.4 内参基因的表达稳定性分析 | 第55-57页 |
5.4 讨论 | 第57-59页 |
第6章 荧光实时定量RT-PCR技术检测赤拟谷盗p53类似基因mRNA水平的表达 | 第59-81页 |
6.1 实验材料 | 第59页 |
6.1.1 动物材料 | 第59页 |
6.1.2 主要实验试剂和仪器 | 第59页 |
6.2 实验方法 | 第59-63页 |
6.2.1 总RNA的提取及第一链cDNA的制备 | 第59页 |
6.2.2 qRT-PCR实验 | 第59-63页 |
6.3 结果分析 | 第63-78页 |
6.3.1 引物的专一性检测 | 第63-64页 |
6.3.2 赤拟谷盗qRT-PCR结果分析 | 第64-78页 |
6.4 讨论 | 第78-81页 |
第7章 总结 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第95页 |