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沉默β-catenin表达对人胃癌细胞生物学行为的影响

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
中英文缩略词表第10-12页
第1章 引言第12-15页
第2章 材料和方法第15-29页
    2.1 材料第15-17页
        2.1.1 实验细胞第15页
        2.1.2 主要试剂第15-16页
        2.1.3 实验设备及耗材第16-17页
    2.2 主要试剂的配置第17-19页
    2.3 细胞培养第19-20页
    2.4 病毒转染第20-21页
        2.4.1 干扰慢病毒制作第20页
        2.4.2 病毒感染第20-21页
    2.5 qRT-PCR 检测 AGS、MGC803 经慢病毒感染前后β-catenin 的 mRNA表达第21-23页
        2.5.1 RNA 提取第21-22页
        2.5.2 cDNA 合成第22-23页
        2.5.3 荧光定量 PCR第23页
    2.6 Wester Blot 检测 AGS、MGC803 经慢病毒感染前后目的蛋白的表达第23-25页
        2.6.1 蛋白提取第23-24页
        2.6.2 蛋白电泳第24页
        2.6.3 转膜第24页
        2.6.4 抗原抗体结合及曝光第24-25页
    2.7 MTT 法检测不同浓度 5-氟尿嘧啶(5-Fu)对转染前后 AGS、MGC803细胞的增殖抑制情况第25-26页
        2.7.1 原理第25页
        2.7.2 步骤第25-26页
    2.8 Transwell 法细胞侵袭实验和细胞迁移实验第26-27页
        2.8.1 细胞侵袭实验第26-27页
        2.8.2 细胞迁移实验第27页
    2.9 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞生长周期变化第27-28页
        2.9.1 Annexin-V-PE/7-AAD 双染 FCM 法检测细胞凋亡的变化第27页
        2.9.2 PI 单染 FCM 法检测细胞生长周期第27-28页
    2.10 统计方法第28-29页
第3章 结果第29-42页
    3.1 干扰β-catenin 慢病毒感染 AGS、MGC803 细胞后镜下观察第29页
    3.2 干扰β-catenin 慢病毒感染 AGS、MGC803 细胞后胞内β-catenin mRNA表达的影响第29-31页
    3.3 Western blot 检测干扰β-catenin 慢病毒感染 AGS、MGC803 细胞后细胞内β-catenin 蛋白表达第31-32页
    3.4 MTT 法检测不同浓度 5-Fu 对 AGS、MGC803 细胞株感染干扰慢病毒前后的增殖抑制情况第32-33页
    3.5 Transwell 法细胞侵袭实验和细胞迁移实验第33-36页
        3.5.1 Transwell 法细胞侵袭实验第33-35页
        3.5.2 Transwell 法细胞迁移实验第35-36页
    3.6 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞生长周期变化第36-39页
        3.6.1 Annexin-V-PE/7-AAD 双染 FCM 法检测细胞凋亡的变化第36-37页
        3.6.2 PI 单染 FCM 法检测细胞生长周期第37-39页
    3.7 Western blot 检测β-catenin 下游靶基因编码蛋白和 5-Fu 代谢酶第39-42页
第4章 讨论第42-50页
    4.1 细胞周期第44-45页
    4.2 细胞凋亡第45-46页
    4.3 细胞侵袭、转移第46-48页
    4.4 细胞药物敏感性第48-50页
第5章 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-57页
综述第57-64页
    参考文献第62-64页

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