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内皮祖细胞移植通过miR-141-3p-Notch-Nrf2轴减轻百草枯中毒所致急性肺损伤的研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-17页
第一部分:内皮祖细胞移植对百草枯中毒所致急性肺损伤生物学作用的研究第17-38页
    1 前言第17-19页
    2 材料和方法第19-28页
        2.1 实验材料第19-21页
            2.1.1 实验动物第19页
            2.1.2 主要试剂第19-20页
            2.1.3 主要仪器第20页
            2.1.4 主要试剂的配制第20-21页
            2.1.5 培养板的包被第21页
        2.2 实验方法第21-28页
            2.2.1 小鼠EPCs细胞分离培养和鉴定第21-22页
            2.2.2 动物分组第22页
            2.2.3 动物模型的构建及标本采集第22-23页
            2.2.4 实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)检测小鼠肺组织VEGF、CXCR4、SDF-1mRNA水平第23-25页
            2.2.5 肺湿/干比测定第25页
            2.2.6 肺组织病理学检测第25页
            2.2.7 肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、IL-10水平测定第25-26页
            2.2.8 肺组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)水平测定第26-27页
            2.2.9 统计学处理第27-28页
    3 结果第28-34页
        3.1 内皮祖细胞的特点第28页
        3.2 小鼠一般状态观察第28-30页
        3.3 EPCs归巢因子表达情况第30页
        3.4 EPCs移植对PQ-ALI的生物学效应第30-34页
            3.4.1 肺组织病理学表现第30-31页
            3.4.2 肺组织湿/干比(W/D)第31-32页
            3.4.3 肺组织炎症因子表达水平第32-33页
            3.4.4 肺组织氧化应激情况第33-34页
    4 讨论第34-37页
    5 结论第37-38页
第二部分:内皮祖细胞移植通过Notch-Nrf2轴治疗百草枯中毒所致急性肺损伤的研究第38-58页
    1 前言第38-41页
    2 材料和方法第41-47页
        2.1 实验材料第41-43页
            2.1.1 实验动物第41页
            2.1.2 供体细胞第41页
            2.1.3 实验试剂第41-42页
            2.1.4 主要仪器第42页
            2.1.5 主要试剂的配制第42-43页
        2.2 实验方法第43-47页
            2.2.1 外周血内皮祖细胞提取、培养及鉴定第43页
            2.2.2 实验动物分组第43-44页
            2.2.3 实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)检测肺组织相关mRNA水平第44页
            2.2.4 蛋白免疫印迹(Westernbolt)检测小鼠肺组织相关蛋白水平第44-46页
            2.2.5 肺湿/干比测定第46页
            2.2.6 肺组织病理学检测第46页
            2.2.5 肺组织TNF-α、IL-6、IL-10水平测定第46页
            2.2.7 肺组织MDA、SOD水平测定第46页
            2.2.8 统计学处理第46-47页
    3 结果第47-55页
        3.1 EPCs移植对PQ-ALI小鼠肺组织Notch-1信号通路表达水平影响第47-48页
        3.2 EPCs移植对PQ-ALI小鼠肺组织Nrf2信号通路表达水平的影响第48-50页
        3.3 EPCs移植通过激活Notch-Nrf2轴对PQ-ALI发挥保护作用第50-55页
            3.3.1 体内阻断Notch-1信号通路干扰效果验证第50-51页
            3.3.2 体内阻断Notch-1信号通路后肺组织病理学变化第51-52页
            3.3.3 体内阻断Notch-1信号通路后肺组织湿/干比第52-53页
            3.3.4 体内阻断Notch-1信号通路后肺组织炎症因子表达水平第53-54页
            3.3.5 体内阻断Notch-1信号通路后肺组织氧化应激情况第54-55页
    4 讨论第55-57页
    5 结论第57-58页
第三部分:miR-141-3p在内皮祖细胞移植治疗百草枯中毒所致急性肺损伤中发挥的作用及其相关机制探讨第58-77页
    1 前言第58-60页
    2 材料和方法第60-66页
        2.1 实验材料第60页
            2.1.1 实验动物第60页
            2.1.2 实验细胞第60页
            2.1.3 供体细胞第60页
        2.2 主要试剂和仪器第60-62页
            2.2.1 主要试剂第60-61页
            2.2.2 主要仪器第61-62页
        2.3 实验方法第62-66页
            2.3.1 外周血内皮祖细胞提取、培养及鉴定第62页
            2.3.2 MLE-12细胞的培养第62-63页
            2.3.3 细胞转染第63-64页
            2.3.4 动物分组第64-65页
            2.3.5 MLE-12的分组及处理第65页
            2.2.6 统计学处理第65-66页
    3 结果第66-74页
        3.1 小鼠肺组织中miR-200a-3p、miR-21、miR-141-3p和miR-153的相对表达水平第66页
        3.2 PQ通过上调miR-141-3p,对Notch-1-Nrf2轴发挥抑制性调控作用第66-70页
            3.2.1 miR-141-3pminic和inhibitor的干扰效果验证第66-67页
            3.2.2 miR-141-3p抑制性调节Notch-1通路的表达第67-68页
            3.2.3 MLE-12细胞中,PQ通过上调miR-141-3p对Notch-1-Nrf2轴发挥抑制性调控作用第68-70页
        3.3 EPCs移植通过下调miR-141-3p的表达,从而激活Notch-1信号通路发挥保护作用第70-74页
            3.3.1 体内过表达miR-141-3p对Notch-1信号通路的干扰效应第70-71页
            3.3.2 体内过表达miR-141-3p后肺组织病理学表现第71-72页
            3.3.3 体内过表达miR-141-3p后小鼠肺组织W/D第72页
            3.3.4 体内过表达miR-141-3p肺组织炎症因子水平第72-73页
            3.3.5 体内过表达miR-141-3p肺组织氧化应激情况第73-74页
    4 讨论第74-76页
    5 结论第76-77页
本研究创新性的自我评价第77-78页
参考文献第78-85页
综述第85-100页
    参考文献第93-100页
攻读学位期间取得的研究成果第100-101页
致谢第101-102页
个人简历第102页

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