| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 ARF基因的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 生长素信号转导途径 | 第10-11页 |
| 1.1.2 ARF基因的相关研究 | 第11-13页 |
| 1.1.3 ARF基因在木霉诱导条件下的表达变化 | 第13页 |
| 1.2 基因过表达和RNAi干扰技术 | 第13-15页 |
| 1.2.1 基因过表达技术 | 第13-14页 |
| 1.2.2 RNAi干扰技术 | 第14-15页 |
| 1.3 杨树遗传转化的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 杨树遗传转化的主要方法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 影响农杆菌转化杨树效率的因素 | 第16-18页 |
| 1.4 课题来源及本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 1.4.1 课题来源 | 第18页 |
| 1.4.2 研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 山新杨生长素响应因子P成义F7基因的克隆及分析 | 第20-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 培养基和常用储液 | 第20-21页 |
| 2.1.4 供试试剂 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 山新杨基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 山新杨总RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.2.3 PdapARF1基因全长DNA及cDNA的克隆 | 第23-25页 |
| 2.2.4 PdapARF1基因及其编码的PdapARF1蛋白的生物信息学特征 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-39页 |
| 2.3.1 山新杨基因组DNA | 第26页 |
| 2.3.2 山新杨总RNA | 第26页 |
| 2.3.3 PdapARF1基因全长DNA和cDNA的克隆 | 第26-28页 |
| 2.3.4 大肠杆菌阳性克隆PCR检测和测序 | 第28-29页 |
| 2.3.5 PdapARF1基因及其编码的PdapARF1蛋白的生物信息学分析 | 第29-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.4.1 对于山新杨总RNA的提取的讨论 | 第39-40页 |
| 2.4.2 对于山新杨PadpARF1基因克隆的讨论 | 第40页 |
| 2.4.3 对于山新杨PadpARF1生物信息学分析的讨论 | 第40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 3 山新杨户抓MRFJ基因在棘抱木霉诱导下的差异表达 | 第41-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.1 菌株和植物材料 | 第41页 |
| 3.1.2 培养基 | 第41页 |
| 3.1.3 酶及试剂 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-43页 |
| 3.2.1 棘孢木霉孢子悬浮液的制备 | 第41-42页 |
| 3.2.2 棘孢木霉对山新杨的诱导实验 | 第42页 |
| 3.2.3 山新杨叶和根组织总RNA的提取及反转录 | 第42页 |
| 3.2.4 荧光定量RT-PCR实验 | 第42-43页 |
| 3.2.5 数据分析 | 第43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-45页 |
| 3.3.1 棘孢木霉Ta536和Ta429诱导下山新杨根和叶中PdapARF1的时空表达分析 | 第43-45页 |
| 3.3.2 多株棘孢木霉诱导下根和叶组织PdapARF1的时空表达分析 | 第45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-46页 |
| 3.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 4 山新杨P加护基因过表达及抑制表达载体的构建 | 第47-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 植物材料、质粒及菌株 | 第47-48页 |
| 4.1.2 培养基和缓冲液 | 第48页 |
| 4.1.3 酶和试剂 | 第48页 |
| 4.2 研究方法 | 第48-56页 |
| 4.2.1 植物过表达载体pROK2-ARFl的构建 | 第48-52页 |
| 4.2.2 pFGC-arf1B-Cis、pFGC-arf1R-Cis、pFGC-arf1BR-Cis和pFGC-arf1A-Cis载体的构建 | 第52-54页 |
| 4.2.3 pFGC-arf1B、pFGC-arf1R、pFGC-arf1BR和pFGC-arf1A载体的构建 | 第54-56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-63页 |
| 4.3.1 植物过表达载体pROK2-ARF1的构建 | 第56-58页 |
| 4.3.2 植物抑制表达载体pFGC-arf1B、pFGC-arf1R、pFGC-arf1BR和pFGC-arf1A的构建 | 第58-63页 |
| 4.4 讨论 | 第63页 |
| 4.5 本章小结 | 第63-65页 |
| 5 农杆菌介导山新杨的遗传转化 | 第65-72页 |
| 5.1 实验材料 | 第65页 |
| 5.1.1 植物材料、菌株及质粒 | 第65页 |
| 5.1.2 培养基 | 第65页 |
| 5.1.3 供试试剂 | 第65页 |
| 5.2 研究方法 | 第65-67页 |
| 5.2.1 农杆菌介导的遗传转化 | 第65-66页 |
| 5.2.2 转基因植株的PCR检测 | 第66-67页 |
| 5.3 结果与分析 | 第67-71页 |
| 5.3.1 抗性组织的分化 | 第67-68页 |
| 5.3.2 抗性转基因苗的生根 | 第68-69页 |
| 5.3.3 山新杨转基因植株的PCR验证 | 第69-71页 |
| 5.4 讨论 | 第71页 |
| 5.4.1 不同培养基对山新杨转化结果的影响 | 第71页 |
| 5.4.2 转基因植株的验证 | 第71页 |
| 5.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81页 |
| 攻读学位期间参加的科研项目 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
