| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 前言 | 第10页 |
| 1.2 抗体 | 第10-14页 |
| 1.2.1 抗体的发现与发展 | 第11页 |
| 1.2.2 抗体分子的特点 | 第11-12页 |
| 1.2.3 抗体的应用 | 第12-13页 |
| 1.2.4 单克隆抗体 | 第13页 |
| 1.2.5 SpA对抗体的色谱纯化 | 第13-14页 |
| 1.3 SpA | 第14-17页 |
| 1.3.1 SpA的发现 | 第14-15页 |
| 1.3.2 SpA的结构特征 | 第15-16页 |
| 1.3.3 新型SpA色谱的发展 | 第16-17页 |
| 1.3.4 SpA的应用 | 第17页 |
| 1.4 SpA分子改造的性能检测手段 | 第17-19页 |
| 1.4.1 差示扫描量热实验(DSC) | 第17-18页 |
| 1.4.2 等温滴定量热实验(ITC) | 第18-19页 |
| 1.4.3 圆二色法(CD) | 第19页 |
| 1.5 本论文的立题意义与研究内容 | 第19-22页 |
| 1.5.1 立题意义 | 第19-20页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第20-22页 |
| 第2章 重组SpA的稳定性研究 | 第22-32页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第22-24页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2.3 主要溶液的配置 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.3.1 结构域Z',Z"设计构建 | 第24页 |
| 2.3.2 CD实验检测突变结构域的二级结构 | 第24页 |
| 2.3.3 DSC实验检测突变结构域的热稳定性 | 第24-25页 |
| 2.4 实验结果和讨论 | 第25-30页 |
| 2.4.1 突变结构域的结构稳定性研究 | 第25-27页 |
| 2.4.2 突变结构域的热稳定性研究 | 第27-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-32页 |
| 第3章 重组SpA的表达与纯化 | 第32-44页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第32-34页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第33页 |
| 3.2.3 主要溶液的配置 | 第33-34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-38页 |
| 3.3.1 四串体融合蛋白Z4,Z'4的设计构建 | 第34-35页 |
| 3.3.2 重组SpA的诱导表达 | 第35-36页 |
| 3.3.3 重组SpA的制备 | 第36-37页 |
| 3.3.4 表达蛋白的SDS-PAGE电泳分析 | 第37-38页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第38-42页 |
| 3.4.1 大肠杆菌生长曲线 | 第38-39页 |
| 3.4.2 诱导条件的优化 | 第39-41页 |
| 3.4.3 目的蛋白纯化方式的选择与洗脱位点的确定 | 第41-42页 |
| 3.4.4 目的蛋白的色谱纯化与电泳分析 | 第42页 |
| 3.5 小结 | 第42-44页 |
| 第4章 重组SpA色谱介质制备及其吸附行为的研究 | 第44-60页 |
| 4.1 前言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料和仪器 | 第44-46页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第44-45页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第45页 |
| 4.2.3 主要溶液的配置 | 第45-46页 |
| 4.3 实验方法 | 第46-51页 |
| 4.3.1 重组SpA与抗体分子结合的等温滴定量热实验 | 第46-47页 |
| 4.3.2 重组SpA亲和色谱介质的制备 | 第47-50页 |
| 4.3.3 重组SpA亲和色谱介质的耐碱性实验 | 第50页 |
| 4.3.4 重组SpA色谱介质的动态吸附实验 | 第50-51页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第51-59页 |
| 4.4.1 重组SpA与抗体分子结合的ITC分析 | 第51-52页 |
| 4.4.2 重组SpA色谱配基密度的测定 | 第52-53页 |
| 4.4.3 离子强度对重组SpA色谱介质吸附性能的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.4 重组SpA的耐碱性能分析 | 第54-57页 |
| 4.4.5 重组SpA色谱对抗体的动态吸附 | 第57-58页 |
| 4.4.6 重组SpA色谱介质的寿命测定 | 第58-59页 |
| 4.5 小结 | 第59-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 5.1 结论 | 第60页 |
| 5.2 主要创新点 | 第60-61页 |
| 5.3 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
