| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 引言 | 第12-17页 |
| 0.1 大豆遗传转化的方法 | 第12页 |
| 0.2 大豆遗传转化的受体系统 | 第12-14页 |
| 0.2.1 大豆不定芽发生再生系统 | 第13-14页 |
| 0.2.2 大豆体细胞胚胎发生再生系统 | 第14页 |
| 0.2.3 原生质体再生系统 | 第14页 |
| 0.3 抗菌肽基因在植物基因工程中的研究与应用 | 第14-15页 |
| 0.4 转基因大豆的发展及应用 | 第15-16页 |
| 0.5 试验目的及意义 | 第16-17页 |
| 第1章 大豆子叶节植株再生体系的建立 | 第17-30页 |
| 1.1 主要仪器设备及基本试剂 | 第17-19页 |
| 1.1.1 主要仪器设备 | 第17页 |
| 1.1.2 基本试剂配制 | 第17-18页 |
| 1.1.3 基本培养基的组成 | 第18-19页 |
| 1.2 试验材料 | 第19页 |
| 1.3 试验方法 | 第19-21页 |
| 1.3.1 不同培养阶段培养基的配制 | 第19页 |
| 1.3.2 外植体的获得 | 第19-20页 |
| 1.3.3 不定芽的诱导 | 第20页 |
| 1.3.4 不定芽的伸长 | 第20页 |
| 1.3.5 不定根的诱导，筛选出最适生根条件 | 第20页 |
| 1.3.6 移栽 | 第20-21页 |
| 1.3.7 培养条件 | 第21页 |
| 1.4 结果与分析 | 第21-28页 |
| 1.4.1 大豆子叶节再生体系的建立 | 第21-27页 |
| 1.4.2 大豆子叶节再生体系与胚尖再生体系的比较 | 第27-28页 |
| 1.5 讨论 | 第28-29页 |
| 1.5.1 不同激素浓度对子叶节再生体系的影响 | 第28页 |
| 1.5.2 子叶节再生体系中外植体的不同获得方式的比较 | 第28-29页 |
| 1.5.3 大豆子叶节再生体系与胚尖再生体系的比较 | 第29页 |
| 1.6 结论 | 第29-30页 |
| 第2章 根癌农杆菌介导的抗菌肽基因的遗传转化 | 第30-49页 |
| 2.1 主要仪器设备及基本试剂 | 第30-32页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂配制方法 | 第30-31页 |
| 2.1.3 农杆菌生长培养基 | 第31页 |
| 2.1.4 子叶节遗传转化培养基的组成 | 第31-32页 |
| 2.2 试验材料 | 第32页 |
| 2.2.1 试验用大豆品种 | 第32页 |
| 2.2.2 质粒和农杆菌菌株 | 第32页 |
| 2.3 试验方法 | 第32-39页 |
| 2.3.1 农杆菌的培养 | 第32-33页 |
| 2.3.2 pBI-GFP-ABP 质粒DNA 的提取 | 第33-34页 |
| 2.3.3 根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 2.3.4 质粒DNA 冻融法转化农杆菌LBA4404 菌株 | 第34-35页 |
| 2.3.5 pBI-GFP-ABP 质粒转化农杆菌结果鉴定 | 第35页 |
| 2.3.6 抑菌性抗生素头孢霉素适宜浓度的确定 | 第35-36页 |
| 2.3.7 选择性抗生素卡那霉素对不定芽分化的影响 | 第36页 |
| 2.3.8 选择性抗生素卡那霉素对不定芽生根的影响 | 第36页 |
| 2.3.9 农杆菌介导的大豆子叶节再生的遗传转化 | 第36-37页 |
| 2.3.10 绿色荧光蛋白标记基因检测 | 第37页 |
| 2.3.11 大豆转化植株 PCR 分子检测 | 第37-39页 |
| 2.3.12 T1 代大豆植株的PCR 检测 | 第39页 |
| 2.4 结果与分析 | 第39-47页 |
| 2.4.1 农杆菌介导的抗菌肽基因的转化过程 | 第39-41页 |
| 2.4.2 PBI-GFP-ABP 质粒转化农杆菌结果鉴定 | 第41-42页 |
| 2.4.3 抑菌性抗生素头孢霉素适宜浓度的确定 | 第42页 |
| 2.4.4 卡那霉素对不定芽分化的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.5 卡那霉素对不定芽生根的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.6 绿色荧光蛋白表达的情况 | 第44-45页 |
| 2.4.7 PCR 扩增鉴定结果 | 第45-46页 |
| 2.4.8 农杆菌介导的辽豆17 子叶节的转化率 | 第46页 |
| 2.4.9 T1 代大豆植株的PCR 检测结果 | 第46-47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-48页 |
| 2.5.1 抗生素对遗传转化的影响 | 第47-48页 |
| 2.5.2 农杆菌介导法对大豆遗传转化效率的影响 | 第48页 |
| 2.6 结论 | 第48-49页 |
| 第3章 结论及展望 | 第49-50页 |
| 3.1 大豆子叶节再生体系的建立 | 第49页 |
| 3.2 农杆菌介导的抗菌肽基因的遗传转化 | 第49页 |
| 3.3 进一步工作方向 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 缩写符号说明 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
