| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 疱疹病毒简介 | 第10页 |
| 1.2 病毒形态结构和分类命名 | 第10-12页 |
| 1.3 KHV 的发现及流行现状 | 第12页 |
| 1.4 流行病学分析 | 第12-13页 |
| 1.5 临床症状及病理特征 | 第13-15页 |
| 1.6 分子生物学特性 | 第15页 |
| 1.7 检测方法 | 第15-17页 |
| 1.8 防治措施 | 第17页 |
| 1.9 锦鲤疱疹病毒病疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.10 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PET-32a-ORF30、PET-32a-ORF131 重组表达载体的构建及表达 | 第20-36页 |
| 1.材料 | 第20-21页 |
| 1.1 主要仪器 | 第20页 |
| 1.2 主要材料 | 第20-21页 |
| 1.3 溶液配制 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-28页 |
| 2.1 锦鲤疱疹病毒(KHV)基因组的提取 | 第21页 |
| 2.2 载体质粒的提取 | 第21页 |
| 2.3 感受态大肠杆菌 JM109，BL21(DE3)的制备 | 第21-22页 |
| 2.4 ORF30 及 ORF131 基因扩增引物的设计及合成 | 第22页 |
| 2.5 ORF30 和 ORF131 基因的扩增 | 第22-23页 |
| 2.6 ORF30 和 ORF131 基因的克隆 | 第23-24页 |
| 2.7 ORF30 和 ORF131 重组表达质粒的构建 | 第24-27页 |
| 2.8 ORF30 和 ORF131 蛋白的诱导表达及条件优化 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 锦鲤疱疹病毒(KHV)基因组 DNA 检测 | 第28页 |
| 3.2 目的基因的 PCR 扩增 | 第28页 |
| 3.3 KHVORF30 和 ORF131 基因的 T 载体克隆鉴定 | 第28-29页 |
| 3.4 重组表达质粒 pET-32a-ORF30 和 pET-32a-ORF131 的鉴定 | 第29页 |
| 3.5 表达产物蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 的鉴定 | 第29-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 4.1 目的基因的选择 | 第33页 |
| 4.2 载体的选择 | 第33-34页 |
| 4.3 重组质粒的表达 | 第34-35页 |
| 5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 的纯化及免疫保护 | 第36-56页 |
| 1.材料 | 第36-38页 |
| 1.1 主要仪器 | 第36页 |
| 1.2 主要材料 | 第36-37页 |
| 1.3 溶液配制 | 第37-38页 |
| 2 方法 | 第38-42页 |
| 2.1 工程菌的发酵 | 第38页 |
| 2.2 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 基本理化性质预测 | 第38页 |
| 2.3 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 的纯化 | 第38-40页 |
| 2.4 免疫原的制备 | 第40页 |
| 2.5 实验鲤鱼的选择 | 第40页 |
| 2.6 实验鲤鱼分组及免疫 | 第40-41页 |
| 2.7 抗体消长规律及抗体效价水平监测 | 第41页 |
| 2.8 攻毒剂量的确定 | 第41-42页 |
| 2.9 攻毒保护实验研究 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-51页 |
| 3.1 工程菌发酵产率计算结果 | 第42页 |
| 3.2 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 基本理化性质预测 | 第42-44页 |
| 3.3 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 纯化结果 | 第44-45页 |
| 3.4 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 纯化后浓度检测结果 | 第45页 |
| 3.5 实验鲤鱼 PCR 检测结果 | 第45-46页 |
| 3.6 抗体消长规律及抗体效价水平监测结果 | 第46-49页 |
| 3.7 攻毒剂量实验结果 | 第49-50页 |
| 3.8 攻毒保护性实验结果 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 工程菌的发酵 | 第51页 |
| 4.2 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 基本理化性质预测 | 第51-52页 |
| 4.3 蛋白 ORF30 和蛋白 ORF131 的纯化 | 第52页 |
| 4.4 实验鲤鱼的免疫 | 第52-53页 |
| 4.5 抗体消长规律及抗体效价水平监测 | 第53页 |
| 4.6 攻毒保护实验研究 | 第53-54页 |
| 5 小结 | 第54-56页 |
| 第四章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录A | 第65-68页 |
| 附录B | 第68-69页 |
| 附录C | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
