| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-46页 |
| 1.1 细胞周期及其调控机制概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 细胞周期概述及其参与调控的重要蛋白 | 第12-14页 |
| 1.1.2 细胞周期检查点 | 第14-16页 |
| 1.2 DNA复制检查点 | 第16-18页 |
| 1.2.1 细胞对DNA复制过程的感应 | 第16页 |
| 1.2.2 S期DNA复制检查点的主要调控机制 | 第16-18页 |
| 1.3 DNA损伤检查点 | 第18-26页 |
| 1.3.1 细胞对DNA损伤的感应 | 第20页 |
| 1.3.2 调控DNA损伤检查点的主要信号通路 | 第20-23页 |
| 1.3.3 G1期损伤检查点 | 第23-24页 |
| 1.3.4 S期损伤检查点 | 第24-25页 |
| 1.3.5 G2/M期的DNA损伤检查点调控机制 | 第25-26页 |
| 1.4 细胞凋亡 | 第26-31页 |
| 1.4.1 细胞凋亡途径概述 | 第26-29页 |
| 1.4.2 促凋亡和抗凋亡的关键因子 | 第29-30页 |
| 1.4.3 细胞色素c与细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 1.5 p53在细胞对DNA损伤响应过程中的作用 | 第31-40页 |
| 1.5.1 p53与细胞凋亡 | 第31-34页 |
| 1.5.2 p53与DNA损伤检查点 | 第34-38页 |
| 1.5.3 p53与HeLa细胞 | 第38-40页 |
| 1.6 Chk1在细胞对DNA损伤响应过程中的作用 | 第40-46页 |
| 1.6.1 Chk1与细胞周期调控 | 第40-42页 |
| 1.6.2 Chk1与DNA损伤检查点 | 第42-46页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第46-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 2.1.1 本论文中所用的细胞株来源及siRNA序列 | 第46页 |
| 2.1.2 本论文中所用抗体来源 | 第46-47页 |
| 2.1.3 本论文中所用试剂 | 第47页 |
| 2.1.4 本论文中所用仪器 | 第47-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-56页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第48页 |
| 2.2.2 药物处理 | 第48页 |
| 2.2.3 细胞同步化 | 第48-49页 |
| 2.2.4 siRNA转染 | 第49页 |
| 2.2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第49-50页 |
| 2.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第50页 |
| 2.2.7 免疫印记(Western blotting) | 第50-51页 |
| 2.2.8 Trizol法提取细胞总RNA | 第51页 |
| 2.2.9 半定量RT-PCR | 第51-52页 |
| 2.2.10 实时荧光定量PCR(Real time PCR) | 第52-53页 |
| 2.2.11 DAPI染色 | 第53-54页 |
| 2.2.12 胞质和线粒体组分的分离 | 第54-56页 |
| 第三章 实验结果 | 第56-80页 |
| 3.1 抑制HPV18病毒的E6蛋白能够增加HeLa细胞中p53蛋白含量 | 第56-59页 |
| 3.1.1 18E6 siRNA处理导致对数生长期的HeLa细胞中p53蛋白的含量增加 | 第56-57页 |
| 3.1.2 18E6 siRNA处理导致同步化的HeLa细胞中p53蛋白的含量增加 | 第57-59页 |
| 3.2 18E6 siRNA处理使得HeLa细胞中p53蛋白功能恢复 | 第59-61页 |
| 3.2.1 顺铂(CDDP)对HeLa细胞中p53的激活 | 第59-60页 |
| 3.2.2 甲磺酸甲酯(MMS)对HeLa细胞中p53的激活 | 第60-61页 |
| 3.3 p53阻止Chk1失活的S期HeLa细胞在MMS处理下的周期蛋白Cyclin B1的上调 | 第61-64页 |
| 3.4 p53阻止Chk1活的S期HeLa细胞在MMS处理下发生异常有丝分裂 | 第64-66页 |
| 3.5 p53诱导Chk1失活的S期HeLa细胞在MMS处理下进入细胞凋亡 | 第66-69页 |
| 3.6 Chk1抑制p53诱导的细胞凋亡过程 | 第69-70页 |
| 3.7 Chk1不抑制p53介导的Bax表达水平的上调 | 第70-73页 |
| 3.8 Chk1通过维持Bcl-2和XIAP蛋白的高表达水平抑制p53诱导的Bax促凋亡效应 | 第73-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-86页 |
| 4.1 Chk1在S期DNA损伤检查点的作用 | 第80-81页 |
| 4.2 p53在S期DNA损伤检查点的作用 | 第81-83页 |
| 4.3 Chk1与p53在S期DNA损伤检查点调控过程中的相互关系 | 第83-86页 |
| 第五章 结论与展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-110页 |
| 附录 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第114页 |
