| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词简表 | 第11-13页 |
| 第1章 老年性痴呆发病机制及治疗方法研究进展 | 第13-30页 |
| 1.1 AD相关病理机制 | 第13-18页 |
| 1.1.1 AD病灶中的异常蛋白 | 第13-15页 |
| 1.1.2 突触相关病变 | 第15-16页 |
| 1.1.3 线粒体功能障碍 | 第16页 |
| 1.1.4 氧化应激与自由基损伤 | 第16-17页 |
| 1.1.5 胰岛素信号通路 | 第17页 |
| 1.1.6 钙代谢紊乱 | 第17-18页 |
| 1.1.7 炎症反应 | 第18页 |
| 1.2 Aβ及BACE1抑制剂研究进展 | 第18-24页 |
| 1.2.1 Aβ的产生途径 | 第18-19页 |
| 1.2.2 BACE1 | 第19-21页 |
| 1.2.3 γ-分泌酶 | 第21页 |
| 1.2.4 BACE1抑制剂研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3 Aβ清除的机制 | 第24-28页 |
| 1.3.1 Aβ降解相关的酶 | 第24-25页 |
| 1.3.2 自噬对Aβ清除的双向作用 | 第25-28页 |
| 1.4 AD其他的治疗方法 | 第28页 |
| 1.5 研究目的与展望 | 第28-30页 |
| 第2章 BACE1抑制剂的发现及其作用效果评价 | 第30-52页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 材料和方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.2.2 BACE1活性测定 | 第32-33页 |
| 2.2.3 BACE1蛋白表达和纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.4 表面等离子共振实验(SPR) | 第34-35页 |
| 2.2.5 差式扫描量热实验(DSC) | 第35页 |
| 2.2.6 其他天冬氨酸蛋白酶(Renin,Cathepsin D和BACE2)活性测定 | 第35-36页 |
| 2.2.7 细胞培养 | 第36页 |
| 2.2.8 基因稳定表达细胞株的构建 | 第36页 |
| 2.2.9 Aβ和sAPPβ含量测定 | 第36-38页 |
| 2.2.10 细胞活力测定 | 第38页 |
| 2.2.11 免疫印迹(western blot) | 第38-39页 |
| 2.2.12 实时定量PCR(RT-PCR) | 第39页 |
| 2.2.13 数据分析 | 第39页 |
| 2.3 实验结果 | 第39-49页 |
| 2.3.1 L655,240是BACE1的竞争性抑制剂 | 第39-40页 |
| 2.3.2 L655,240与BACE1存在直接的相互作用 | 第40-41页 |
| 2.3.3 L655,240对其它天冬氨酸蛋白酶选择性研究 | 第41-42页 |
| 2.3.4 L655,240在细胞水平减少sAPPβ、Aβ40和Aβ42的产生 | 第42-45页 |
| 2.3.5 L655,240抑制HEK293-APPswe中BACE1的活性 | 第45页 |
| 2.3.6 L655,240不影响细胞内BACE1和APP的mRNA水平和蛋白水平 | 第45-48页 |
| 2.3.7 L655,240不影响α-分泌酶和γ-分泌酶的活性 | 第48-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-51页 |
| 2.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第3章 基于降低Aβ含量的化合物筛选及相关机制探讨 | 第52-71页 |
| 3.1 引言 | 第52-53页 |
| 3.2 材料与方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第53页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第53页 |
| 3.2.3 化合物筛选 | 第53-54页 |
| 3.2.4 免疫印迹(western blot) | 第54-55页 |
| 3.2.5 乙酰胆碱酯酶活性检测 | 第55页 |
| 3.2.6 数据分析 | 第55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-68页 |
| 3.3.1 ACT在HEK293-APPswe细胞中减少Aβ的含量 | 第55页 |
| 3.3.2 ACT在HEK293-APPswe细胞中抑制BACE1的表达 | 第55-56页 |
| 3.3.3 ACT不影响乙酰胆碱酯酶活性和ADAM10的表达 | 第56-57页 |
| 3.3.4 ACT在HEK293-APPswe细胞中激活自噬 | 第57-62页 |
| 3.3.5 ACT在BV2细胞中激活自噬 | 第62-66页 |
| 3.3.6 ACT在BV2细胞中抑制BACE1表达 | 第66-67页 |
| 3.3.7 ACT衍生物的筛选 | 第67-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-70页 |
| 3.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 第4章 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-89页 |
| 论文发表情况 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
