英文缩写词对照表 | 第7-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13-14页 |
第一章 前言 | 第15-19页 |
一 Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)与先天免疫 | 第15-16页 |
二 ARF-GAP家族蛋白 | 第16页 |
三 GIT家族蛋白的病理生理功能 | 第16-18页 |
四 GIT2与免疫 | 第18-19页 |
第二章 GIT2在脓毒症中的作用 | 第19-41页 |
一 实验材料与方法 | 第19-29页 |
1 实验材料 | 第19-23页 |
1.1 菌株 | 第19页 |
1.2 实验动物 | 第19页 |
1.3 工具酶及化学试剂 | 第19-20页 |
1.3.1 工具酶 | 第19页 |
1.3.2 化学试剂 | 第19-20页 |
1.4 培养基与溶液 | 第20-22页 |
1.4.1 培养基 | 第20-21页 |
1.4.2 溶液 | 第21-22页 |
1.5 实验仪器 | 第22-23页 |
1.6 Git2基因分型PCR引物信息 | 第23页 |
2 实验方法 | 第23-29页 |
2.1 小鼠基因型鉴定 | 第23-24页 |
2.1.1 鼠尾基因组DNA提取 | 第23页 |
2.1.2 聚合酶链式反应 | 第23-24页 |
2.1.3 琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第24页 |
2.2 内毒素休克模型实验 | 第24页 |
2.3 小鼠脓毒性腹膜炎实验 | 第24-25页 |
2.3.1 大肠杆菌培养 | 第24-25页 |
2.3.2 大肠杆菌感染 | 第25页 |
2.4 生存率分析 | 第25页 |
2.5 ELISA检测血清中炎性细胞因子的含量 | 第25页 |
2.5.1 准备工作 | 第25页 |
2.5.2 实验流程 | 第25页 |
2.6 苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining,HE) | 第25-26页 |
2.7 免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC) | 第26-27页 |
2.7.1 脱蜡和水化 | 第26页 |
2.7.2 抗原修复 | 第26-27页 |
2.7.3 免疫组织化学染色 | 第27页 |
2.8 实时定量PCR | 第27-28页 |
2.8.1 Trizol法提取总RNA | 第27页 |
2.8.2 反转录cDNA | 第27-28页 |
2.8.3 定量PCR分析 | 第28页 |
2.9 各种脏器的荷菌量分析 | 第28-29页 |
二 实验结果 | 第29-37页 |
1 小鼠基因分型 | 第29页 |
2 GIT2负调控LPS引起的全身性炎症反应 | 第29-33页 |
3 GIT2保护小鼠免于大肠杆菌感染引起的脓毒性腹膜炎 | 第33-37页 |
三 本章小结 | 第37-38页 |
四 本章讨论 | 第38-41页 |
第三章 GIT2负调控炎性细胞因子的表达 | 第41-51页 |
一 实验材料与方法 | 第41-44页 |
1 实验材料 | 第41-42页 |
1.1 实验动物 | 第41页 |
1.2 试剂 | 第41页 |
1.3 溶液 | 第41-42页 |
1.4 实验仪器 | 第42页 |
2 实验方法 | 第42-44页 |
2.1 骨髓源巨噬细胞(BMDM)的分离与诱导 | 第42-43页 |
2.2 鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离 | 第43页 |
2.3 BMDM与MEF刺激实验 | 第43页 |
2.4 细胞因子检测实验(ELISA) | 第43-44页 |
2.4.1 实验准备 | 第43-44页 |
2.4.2 实验流程 | 第44页 |
二 实验结果 | 第44-48页 |
三 本章小结 | 第48页 |
四 本章讨论 | 第48-51页 |
第四章 GIT2在实验性结肠炎中的病理作用 | 第51-75页 |
一 实验材料与方法 | 第51-58页 |
1 实验材料 | 第51-54页 |
1.1 实验动物 | 第51页 |
1.2 试剂 | 第51-52页 |
1.3 溶液 | 第52-53页 |
1.4 实验仪器 | 第53-54页 |
2 实验方法 | 第54-58页 |
2.1 DSS诱导的实验性结肠炎 | 第54页 |
2.2 DSS诱导的慢性结肠炎 | 第54页 |
2.3 肠道菌群清除与结肠炎诱导 | 第54-55页 |
2.4 HE染色分析 | 第55页 |
2.5 IHC分析 | 第55-56页 |
2.6 ELISA分析 | 第56-57页 |
2.7 急性结肠炎组织病理学评分 | 第57页 |
2.8 慢性结肠炎组织病理学评分 | 第57页 |
2.9 肠道菌群检测 | 第57-58页 |
2.10 小鼠脏器荷菌量分析 | 第58页 |
二实验结果 | 第58-71页 |
1 Git2~(-/-)小鼠对DSS诱导的结肠炎敏感 | 第58-64页 |
2 Git2~(-/-)小鼠对DSS诱导的结肠炎易感性依赖于肠道菌群 | 第64-68页 |
3 Git2 缺失促进慢性结肠炎的发生 | 第68-71页 |
4 GIT2在人炎性肠炎中的表达 | 第71页 |
三 本章小结 | 第71-72页 |
四 本章讨论 | 第72-75页 |
参考文献 | 第75-94页 |
全文总结 | 第94-95页 |
综述一 | 第95-100页 |
综述二 | 第100-104页 |
附录一 | 第104-105页 |
博士期间投稿或发表的文章 | 第105-106页 |
致谢 | 第106-107页 |