| 本课题受如下基金资助 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 目录 | 第15-18页 |
| 英文縮写注解 | 第18-19页 |
| 第一章 EB病毒致瘤蛋白LMP1通过多聚泛素化修饰调控P53稳定性的分子机制研究 | 第19-48页 |
| 1.1 前言 | 第19-25页 |
| 1.2 材料 | 第25-28页 |
| 1.2.1 细胞系 | 第25页 |
| 1.2.2 质粒 | 第25-26页 |
| 1.2.3 主要抗体 | 第26-27页 |
| 1.2.4 主要试剂/试剂盒 | 第27页 |
| 1.2.5 主要仪器 | 第27-28页 |
| 1.3 方法 | 第28-31页 |
| 1.3.1 细胞全蛋白的提取和浓度测定 | 第28页 |
| 1.3.2 Western blot | 第28页 |
| 1.3.3 Western blot二次发光检测 | 第28-29页 |
| 1.3.4 感受态细菌制备 | 第29页 |
| 1.3.5 质粒转化与酶切鉴定 | 第29页 |
| 1.3.6 QIAGEN Plasmid Purification Kit大规模抽提质粒 | 第29页 |
| 1.3.7 免疫共沉淀(Immunoprecipitation) | 第29-30页 |
| 1.3.8 LipofectamineTM 2000 transfection reagent介导的瞬间转染 | 第30页 |
| 1.3.9 流式细胞术检测细胞周期和凋亡 | 第30-31页 |
| 1.4 实验结果 | 第31-44页 |
| 1.4.1 EB病毒LMP1对p53的表达和活性及泛素化修饰状态的影响 | 第31-34页 |
| 1.4.2 EB病毒LMP1调控p53泛素化的分子机制 | 第34-41页 |
| 1.4.3 EB病毒LMP1调控p53泛素化的生物学功能 | 第41-44页 |
| 1.5 分析与讨论 | 第44-47页 |
| 1.6 结论 | 第47-48页 |
| 第二章 TRAF4调控AKT活性参与肺癌发生的分子机制研究 | 第48-101页 |
| 2.1 前言 | 第48-52页 |
| 2.2 材料 | 第52-55页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第52-53页 |
| 2.2.2 质粒 | 第53页 |
| 2.2.3 主要抗体 | 第53-54页 |
| 2.2.4 主要试剂/试剂盒 | 第54-55页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第55页 |
| 2.3 方法 | 第55-61页 |
| 2.3.1 感受态细菌制备 | 第55-56页 |
| 2.3.2 质粒转化与酶切鉴定 | 第56页 |
| 2.3.3 QIAGEN Plasmid Purification Kit大规模抽提质粒 | 第56页 |
| 2.3.4 细胞增值能力检测 | 第56页 |
| 2.3.5 软琼脂克隆形成实验 | 第56-57页 |
| 2.3.6 LipofectamineTM 2000 transfection reagent和JetPei介导的瞬时转染 | 第57-58页 |
| 2.3.7 慢病毒感染介导的基因沉默 | 第58页 |
| 2.3.8 细胞全蛋白的抽提和浓度测定 | 第58页 |
| 2.3.9 胞浆胞膜蛋白抽提 | 第58-59页 |
| 2.3.10 Western blot和Western blot二次曝光检测目的蛋白 | 第59页 |
| 2.3.11 免疫共沉淀(Immunoprecipitation) | 第59页 |
| 2.3.12 免疫荧光 | 第59页 |
| 2.3.13 免疫组化 | 第59-60页 |
| 2.3.14 细胞葡萄糖摄取及乳酸生成速率测定 | 第60页 |
| 2.3.15 裸鼠异种移植瘤模型 | 第60-61页 |
| 2.3.16 泛素化实验 | 第61页 |
| 2.3.17 统计学分析 | 第61页 |
| 2.4 结果 | 第61-95页 |
| 2.4.1 TRAF4在肺癌组织及肺癌细胞系中高表达 | 第62-63页 |
| 2.4.2 TRAF4促进细胞恶性转化 | 第63-66页 |
| 2.4.3 基因沉默TRAF4表达抑制肺癌细胞的恶性表型 | 第66-71页 |
| 2.4.4 TRAF4调节EGF诱导的Akt活化 | 第71-78页 |
| 2.4.5 EGF促进TRAF4与Akt的相互结合 | 第78-83页 |
| 2.4.6 TRAF4促进Akt Ub-K63泛素化 | 第83-91页 |
| 2.4.7 TRAF4通过上调Akt活性促进肺癌细胞糖代谢 | 第91-95页 |
| 2.5 分析与讨论 | 第95-100页 |
| 2.6 结论 | 第100-101页 |
| 总结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-115页 |
| 综述 | 第115-121页 |
| 参考文献 | 第119-121页 |
| 攻读学位期间发表的主要论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
