摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
縮写词表(Abbreviations) | 第13-14页 |
前言 | 第14-30页 |
1 种子油脂合成与积累相关研究进展 | 第14-19页 |
1.1 乙酰辅酶A羧化酶基因对种子含油量的调控 | 第15-16页 |
1.2 肯尼迪途径中的酶对种子含油量的调控 | 第16-17页 |
1.3 碳分配与种子含油量 | 第17页 |
1.4 转录因子与种子含油量 | 第17-18页 |
1.5 油体蛋白与种子含油量 | 第18-19页 |
1.6 影响种子含油量的其他因素 | 第19页 |
2 甘油代谢及有关研究进展 | 第19-25页 |
2.1 植物三磷酸甘油脱氢酶分类及其催化的反应 | 第19-20页 |
2.2 三磷酸甘油脱氢酶的结构特点 | 第20-21页 |
2.3 植物中三磷酸甘油脱氢酶基因有关功能研究 | 第21-25页 |
2.3.1 GPDHp基因及其植物中有关研究 | 第21-23页 |
2.3.2 GPDHc基因及其植物中有关研究 | 第23-24页 |
2.3.3 FAD-GPDH基因及其植物中有关研究 | 第24页 |
2.3.4 甘油代谢中的其他主要酶 | 第24-25页 |
3 根系生长发育相关研究进展 | 第25-29页 |
3.1 生长素信号影响根发育多个阶段 | 第25-28页 |
3.2 细胞周期基因参与根生长发育 | 第28页 |
3.3 氧化还原平衡影响根生长发育 | 第28-29页 |
3.4 营养元素调节根生长发育 | 第29页 |
4 本研究目的与意义 | 第29-30页 |
第一章 甘蓝型油菜三磷酸甘油脱氢酶基因克隆及功能分析 | 第30-62页 |
1 研究背景 | 第30页 |
2 材料与方法 | 第30-42页 |
2.1 主要实验材料 | 第30-31页 |
2.2 生化试剂与试剂盒 | 第31页 |
2.3 引物与测序分析 | 第31页 |
2.4 主要实验方法与步骤 | 第31-42页 |
2.4.1 同源片段克隆 | 第31-36页 |
2.4.2 表达载体构建与转化农杆菌 | 第36-38页 |
2.4.3 拟南芥侵染与阳性苗筛选及有关检测 | 第38-40页 |
2.4.4 表型分析 | 第40-42页 |
3 结果 | 第42-58页 |
3.1 基因克隆与序列分析 | 第42-43页 |
3.2 组织表达分析 | 第43-45页 |
3.3 拷贝数分析 | 第45-46页 |
3.4 转化大肠杆菌突变菌株验证 | 第46-47页 |
3.5 构建过表达载体与转化农杆菌 | 第47-48页 |
3.6 转基因家系插入拷贝数检测 | 第48-49页 |
3.7 目的基因表达分析 | 第49-50页 |
3.8 种子有关性状比较 | 第50-51页 |
3.9 种子特异性过表达BnGPDHp1家系 | 第51-52页 |
3.10 油菜BnGPDHs家系胁迫处理 | 第52-56页 |
3.11 拟南芥中甘油代谢有关突变体生长状况与表达检测 | 第56页 |
3.12 突变体T-DNA插入拷贝数分析 | 第56-57页 |
3.13 三磷酸甘油脱氢酶突变体有关种子性状比较 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
4.1 三磷酸甘油脱氢酶基因序列与进化分析 | 第58页 |
4.2 三磷酸甘油脱氢酶调控甘油脂途径 | 第58-60页 |
4.3 三磷酸甘油脱氢酶与抗逆胁迫途径 | 第60页 |
5 本章小结 | 第60-62页 |
第二章 甘油代谢基因对拟南芥根发育调控的生化和分子基础 | 第62-94页 |
1 研究背景 | 第62页 |
2 材料与方法 | 第62-68页 |
2.1 实验材料 | 第62-63页 |
2.1.1 植物材料 | 第62-63页 |
2.1.2 试剂与耗材 | 第63页 |
2.1.3 软件与数据分析的方法 | 第63页 |
2.2 实验方法 | 第63-68页 |
2.2.1 载体构建与植物转化 | 第63-64页 |
2.2.2 显微观察与表型分析 | 第64页 |
2.2.3 GUS组织化学分析 | 第64页 |
2.2.4 定量PCR分析 | 第64页 |
2.2.5 IAA含量分析 | 第64-65页 |
2.2.6 细胞内无机磷含量分析 | 第65页 |
2.2.7 过氧化氢含量分析 | 第65页 |
2.2.8 三磷酸甘油、DHAP和甘油含量分析 | 第65-67页 |
2.2.9 脂肪酸含量分析 | 第67-68页 |
3 结果与分析 | 第68-89页 |
3.1 外源甘油抑制主根生长改变侧根发育 | 第68-71页 |
3.2 甘油代谢有关基因参与甘油对根生长的影响 | 第71-72页 |
3.3 甘油处理下根生长变化与幼苗中三磷酸甘油含量累积有关 | 第72-75页 |
3.4 过表达FAD-GPDH消除甘油对根系生长的影响 | 第75-78页 |
3.5 甘油处理下细胞内无机磷和过氧化氢含量变化 | 第78-81页 |
3.6 甘油影响根尖生长素分布和内源IAA含量 | 第81-84页 |
3.7 甘油影响生长素转运基因PINs表达和活性 | 第84-86页 |
3.8 甘油影响根发育需要生长素有关基因参与 | 第86-87页 |
3.9 甘油处理使分生区细胞数目减少 | 第87-89页 |
4 讨论 | 第89-93页 |
4.1 三磷酸甘油与FAD-GPDH在甘油代谢中起着关键作用 | 第90页 |
4.2 甘油处理下的磷含量变化 | 第90-91页 |
4.3 甘油影响根系生长至少部分不依赖于外源蔗糖 | 第91-92页 |
4.4 甘油代谢引发氧化还原信号变化可能影响根系生长 | 第92页 |
4.5 甘油代谢影响生长素转运 | 第92-93页 |
4.6 甘油对根尖细胞分生活性的影响 | 第93页 |
5 本章小结 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-108页 |
附录 | 第108-117页 |
附录1 拟南芥甘油代谢有关T-DNA突变体信息 | 第108页 |
附录2 过表达载体建构相关信息 | 第108-109页 |
附录3 本研究所用引物序列信息 | 第109-111页 |
附录4 SOUTHERN杂交程序 | 第111-116页 |
附录5 作者简介和在读期间发表的论文 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |