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三磷酸甘油脱氢酶基因和甘油代谢对拟南芥种子含油量与根系发育的影响

摘要第7-10页
Abstract第10-12页
縮写词表(Abbreviations)第13-14页
前言第14-30页
    1 种子油脂合成与积累相关研究进展第14-19页
        1.1 乙酰辅酶A羧化酶基因对种子含油量的调控第15-16页
        1.2 肯尼迪途径中的酶对种子含油量的调控第16-17页
        1.3 碳分配与种子含油量第17页
        1.4 转录因子与种子含油量第17-18页
        1.5 油体蛋白与种子含油量第18-19页
        1.6 影响种子含油量的其他因素第19页
    2 甘油代谢及有关研究进展第19-25页
        2.1 植物三磷酸甘油脱氢酶分类及其催化的反应第19-20页
        2.2 三磷酸甘油脱氢酶的结构特点第20-21页
        2.3 植物中三磷酸甘油脱氢酶基因有关功能研究第21-25页
            2.3.1 GPDHp基因及其植物中有关研究第21-23页
            2.3.2 GPDHc基因及其植物中有关研究第23-24页
            2.3.3 FAD-GPDH基因及其植物中有关研究第24页
            2.3.4 甘油代谢中的其他主要酶第24-25页
    3 根系生长发育相关研究进展第25-29页
        3.1 生长素信号影响根发育多个阶段第25-28页
        3.2 细胞周期基因参与根生长发育第28页
        3.3 氧化还原平衡影响根生长发育第28-29页
        3.4 营养元素调节根生长发育第29页
    4 本研究目的与意义第29-30页
第一章 甘蓝型油菜三磷酸甘油脱氢酶基因克隆及功能分析第30-62页
    1 研究背景第30页
    2 材料与方法第30-42页
        2.1 主要实验材料第30-31页
        2.2 生化试剂与试剂盒第31页
        2.3 引物与测序分析第31页
        2.4 主要实验方法与步骤第31-42页
            2.4.1 同源片段克隆第31-36页
            2.4.2 表达载体构建与转化农杆菌第36-38页
            2.4.3 拟南芥侵染与阳性苗筛选及有关检测第38-40页
            2.4.4 表型分析第40-42页
    3 结果第42-58页
        3.1 基因克隆与序列分析第42-43页
        3.2 组织表达分析第43-45页
        3.3 拷贝数分析第45-46页
        3.4 转化大肠杆菌突变菌株验证第46-47页
        3.5 构建过表达载体与转化农杆菌第47-48页
        3.6 转基因家系插入拷贝数检测第48-49页
        3.7 目的基因表达分析第49-50页
        3.8 种子有关性状比较第50-51页
        3.9 种子特异性过表达BnGPDHp1家系第51-52页
        3.10 油菜BnGPDHs家系胁迫处理第52-56页
        3.11 拟南芥中甘油代谢有关突变体生长状况与表达检测第56页
        3.12 突变体T-DNA插入拷贝数分析第56-57页
        3.13 三磷酸甘油脱氢酶突变体有关种子性状比较第57-58页
    4 讨论第58-60页
        4.1 三磷酸甘油脱氢酶基因序列与进化分析第58页
        4.2 三磷酸甘油脱氢酶调控甘油脂途径第58-60页
        4.3 三磷酸甘油脱氢酶与抗逆胁迫途径第60页
    5 本章小结第60-62页
第二章 甘油代谢基因对拟南芥根发育调控的生化和分子基础第62-94页
    1 研究背景第62页
    2 材料与方法第62-68页
        2.1 实验材料第62-63页
            2.1.1 植物材料第62-63页
            2.1.2 试剂与耗材第63页
            2.1.3 软件与数据分析的方法第63页
        2.2 实验方法第63-68页
            2.2.1 载体构建与植物转化第63-64页
            2.2.2 显微观察与表型分析第64页
            2.2.3 GUS组织化学分析第64页
            2.2.4 定量PCR分析第64页
            2.2.5 IAA含量分析第64-65页
            2.2.6 细胞内无机磷含量分析第65页
            2.2.7 过氧化氢含量分析第65页
            2.2.8 三磷酸甘油、DHAP和甘油含量分析第65-67页
            2.2.9 脂肪酸含量分析第67-68页
    3 结果与分析第68-89页
        3.1 外源甘油抑制主根生长改变侧根发育第68-71页
        3.2 甘油代谢有关基因参与甘油对根生长的影响第71-72页
        3.3 甘油处理下根生长变化与幼苗中三磷酸甘油含量累积有关第72-75页
        3.4 过表达FAD-GPDH消除甘油对根系生长的影响第75-78页
        3.5 甘油处理下细胞内无机磷和过氧化氢含量变化第78-81页
        3.6 甘油影响根尖生长素分布和内源IAA含量第81-84页
        3.7 甘油影响生长素转运基因PINs表达和活性第84-86页
        3.8 甘油影响根发育需要生长素有关基因参与第86-87页
        3.9 甘油处理使分生区细胞数目减少第87-89页
    4 讨论第89-93页
        4.1 三磷酸甘油与FAD-GPDH在甘油代谢中起着关键作用第90页
        4.2 甘油处理下的磷含量变化第90-91页
        4.3 甘油影响根系生长至少部分不依赖于外源蔗糖第91-92页
        4.4 甘油代谢引发氧化还原信号变化可能影响根系生长第92页
        4.5 甘油代谢影响生长素转运第92-93页
        4.6 甘油对根尖细胞分生活性的影响第93页
    5 本章小结第93-94页
参考文献第94-108页
附录第108-117页
    附录1 拟南芥甘油代谢有关T-DNA突变体信息第108页
    附录2 过表达载体建构相关信息第108-109页
    附录3 本研究所用引物序列信息第109-111页
    附录4 SOUTHERN杂交程序第111-116页
    附录5 作者简介和在读期间发表的论文第116-117页
致谢第117页

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