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蜡梅MYB抗逆转录因子和其他相关基因的克隆及功能初探

摘要第7-8页
Abstract第8页
1. 文献综述第9-21页
    1.1 植物转录因子研究进展第9-12页
        1.1.1 植物转录因子研究概述第9-10页
        1.1.2 植物转录因子功能结构域第10-11页
        1.1.3 植物转录因子分类第11-12页
    1.2 植物MYB转录因子研究进展第12-16页
        1.2.1 植物MYB转录因子结构特征第12-13页
        1.2.2 植物MYB转录因子功能研究进展第13-14页
        1.2.3 互作转录因子bHLH/WD40研究第14-16页
    1.3 转录组测序技术研究第16-18页
    1.4 蜡梅分子生物学研究进展第18-20页
        1.4.1 蜡梅品种分类及种质资源遗传多样性第18-19页
        1.4.2 蜡梅抗性相关基因研究进展第19-20页
    1.5 研究目的、意义及内容第20-21页
2 蜡梅花转录组MYB及相关转录因子生物信息学分析第21-31页
    2.1 前言第21-22页
    2.2 实验材料与生物学网站第22页
        2.2.1 实验材料第22页
        2.2.2 实验软件及生物信息学网站第22页
    2.3 实验方法第22-23页
        2.3.1 蜡梅花转录组数据库构建第22-23页
        2.3.2 蜡梅转录组库MYB转录因子初步分析第23页
        2.3.3 转录组库抗逆性MYB转录因子初步分析第23页
        2.3.4 转录组库中WD40/bHLH初步分析第23页
    2.4 结果与分析第23-30页
        2.4.1 蜡梅花转录组库数据初步分析第23-25页
        2.4.2 蜡梅MYB转录因子组装数据初步分析第25页
        2.4.3 转录组库MYB氨基酸分析及抗逆性基因筛选第25-27页
        2.4.4 转录组库WD40/bHLH部分氨基酸聚类分析第27-30页
    2.5 讨论第30-31页
3 蜡梅抗逆MYB及其他相关基因克隆和序列分析第31-43页
    3.1 前言第31页
    3.2 实验材料与试剂第31-33页
        3.2.1 植物材料、菌株和载体第31页
        3.2.2 主要仪器和试剂第31-33页
    3.3 实验方法第33-35页
        3.3.1 蜡梅基因组DNA提取第33页
        3.3.2. 蜡梅花瓣RNA提取及第一链eDNA合成第33-34页
        3.3.3 用TAIL-PCR及RACE克隆基因第34页
        3.3.4 蜡梅目的基因全长序列获得第34-35页
        3.3.5 蜡梅目的基因生物信息学分析第35页
    3.4 结果与分析第35-40页
        3.4.1 RACE产物与转录组Unigene比较第35-36页
        3.4.2 抗逆性MYB及其他相关基因全长获得第36-37页
        3.4.3 蜡梅目的基因全长序列分析第37-38页
        3.4.4 蜡梅目的基因蛋白聚类分析第38-40页
    3.5 讨论第40-43页
        3.5.1 有关PCR技术的使用第40页
        3.5.2 蜡梅目的基因功能分析第40-43页
4 植物表达载体的构建和转基因植株的获得第43-53页
    4.1 前言第43页
    4.2 实验材料与试剂第43-44页
        4.2.1 植物材料、菌株和质粒第43页
        4.2.2 主要试剂和仪器第43-44页
    4.3 实验方法第44-48页
        4.3.1 克隆载体质粒提取及双酶切第44-45页
        4.3.2 表达载体质粒重组和筛选第45-46页
        4.3.3 电击转化农杆菌感受态细胞第46页
        4.3.4 转化烟草、拟南芥及阳性植株的筛选第46-47页
        4.3.5 转基因植株的PCR检测及表型观察第47-48页
    4.4 结果与分析第48-51页
        4.4.1 目的基因和pBI121酶切的检测第48-49页
        4.4.2 植物表达载体的构建第49页
        4.4.3 转基因植株初步鉴定第49-50页
        4.4.4 转基因植株表型的初步分析第50-51页
    4.5 讨论第51-53页
5 总结第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62页

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