摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
1. 文献综述 | 第9-21页 |
1.1 植物转录因子研究进展 | 第9-12页 |
1.1.1 植物转录因子研究概述 | 第9-10页 |
1.1.2 植物转录因子功能结构域 | 第10-11页 |
1.1.3 植物转录因子分类 | 第11-12页 |
1.2 植物MYB转录因子研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 植物MYB转录因子结构特征 | 第12-13页 |
1.2.2 植物MYB转录因子功能研究进展 | 第13-14页 |
1.2.3 互作转录因子bHLH/WD40研究 | 第14-16页 |
1.3 转录组测序技术研究 | 第16-18页 |
1.4 蜡梅分子生物学研究进展 | 第18-20页 |
1.4.1 蜡梅品种分类及种质资源遗传多样性 | 第18-19页 |
1.4.2 蜡梅抗性相关基因研究进展 | 第19-20页 |
1.5 研究目的、意义及内容 | 第20-21页 |
2 蜡梅花转录组MYB及相关转录因子生物信息学分析 | 第21-31页 |
2.1 前言 | 第21-22页 |
2.2 实验材料与生物学网站 | 第22页 |
2.2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2.2 实验软件及生物信息学网站 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-23页 |
2.3.1 蜡梅花转录组数据库构建 | 第22-23页 |
2.3.2 蜡梅转录组库MYB转录因子初步分析 | 第23页 |
2.3.3 转录组库抗逆性MYB转录因子初步分析 | 第23页 |
2.3.4 转录组库中WD40/bHLH初步分析 | 第23页 |
2.4 结果与分析 | 第23-30页 |
2.4.1 蜡梅花转录组库数据初步分析 | 第23-25页 |
2.4.2 蜡梅MYB转录因子组装数据初步分析 | 第25页 |
2.4.3 转录组库MYB氨基酸分析及抗逆性基因筛选 | 第25-27页 |
2.4.4 转录组库WD40/bHLH部分氨基酸聚类分析 | 第27-30页 |
2.5 讨论 | 第30-31页 |
3 蜡梅抗逆MYB及其他相关基因克隆和序列分析 | 第31-43页 |
3.1 前言 | 第31页 |
3.2 实验材料与试剂 | 第31-33页 |
3.2.1 植物材料、菌株和载体 | 第31页 |
3.2.2 主要仪器和试剂 | 第31-33页 |
3.3 实验方法 | 第33-35页 |
3.3.1 蜡梅基因组DNA提取 | 第33页 |
3.3.2. 蜡梅花瓣RNA提取及第一链eDNA合成 | 第33-34页 |
3.3.3 用TAIL-PCR及RACE克隆基因 | 第34页 |
3.3.4 蜡梅目的基因全长序列获得 | 第34-35页 |
3.3.5 蜡梅目的基因生物信息学分析 | 第35页 |
3.4 结果与分析 | 第35-40页 |
3.4.1 RACE产物与转录组Unigene比较 | 第35-36页 |
3.4.2 抗逆性MYB及其他相关基因全长获得 | 第36-37页 |
3.4.3 蜡梅目的基因全长序列分析 | 第37-38页 |
3.4.4 蜡梅目的基因蛋白聚类分析 | 第38-40页 |
3.5 讨论 | 第40-43页 |
3.5.1 有关PCR技术的使用 | 第40页 |
3.5.2 蜡梅目的基因功能分析 | 第40-43页 |
4 植物表达载体的构建和转基因植株的获得 | 第43-53页 |
4.1 前言 | 第43页 |
4.2 实验材料与试剂 | 第43-44页 |
4.2.1 植物材料、菌株和质粒 | 第43页 |
4.2.2 主要试剂和仪器 | 第43-44页 |
4.3 实验方法 | 第44-48页 |
4.3.1 克隆载体质粒提取及双酶切 | 第44-45页 |
4.3.2 表达载体质粒重组和筛选 | 第45-46页 |
4.3.3 电击转化农杆菌感受态细胞 | 第46页 |
4.3.4 转化烟草、拟南芥及阳性植株的筛选 | 第46-47页 |
4.3.5 转基因植株的PCR检测及表型观察 | 第47-48页 |
4.4 结果与分析 | 第48-51页 |
4.4.1 目的基因和pBI121酶切的检测 | 第48-49页 |
4.4.2 植物表达载体的构建 | 第49页 |
4.4.3 转基因植株初步鉴定 | 第49-50页 |
4.4.4 转基因植株表型的初步分析 | 第50-51页 |
4.5 讨论 | 第51-53页 |
5 总结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62页 |