| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第18-30页 |
| 1.1 生防真菌淡紫拟青霉 | 第18-19页 |
| 1.1.1 淡紫拟青霉对线虫的生防作用 | 第18-19页 |
| 1.1.2 淡紫拟青霉对其他病害的生防作用 | 第19页 |
| 1.2 淡紫拟青霉生防作用的机制 | 第19-21页 |
| 1.2.1 水解酶类 | 第19-20页 |
| 1.2.2 次级代谢产物 | 第20页 |
| 1.2.3 根际定殖 | 第20-21页 |
| 1.3 真菌基因组研究 | 第21-22页 |
| 1.3.1 线虫生防真菌基因组 | 第21页 |
| 1.3.2 基因组与次级代谢产物 | 第21-22页 |
| 1.4 真菌次级代谢产物的合成与调控 | 第22-26页 |
| 1.4.1 聚酮类化合物的生物合成 | 第22-23页 |
| 1.4.2 非核糖体肽类化合物的生物合成 | 第23-25页 |
| 1.4.3 PKS-NRPS杂合体的生物合成 | 第25页 |
| 1.4.4 真菌的其他次级代谢产物 | 第25-26页 |
| 1.4.5 次级代谢产物合成的调控机制 | 第26页 |
| 1.5 淡紫拟青霉的次级代谢产物 | 第26-28页 |
| 1.6 科学问题的提出 | 第28-29页 |
| 1.7 研究内容与技术路线 | 第29-30页 |
| 1.7.1 研究内容 | 第29页 |
| 1.7.2 技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 淡紫拟青霉的遗传转化 | 第30-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-34页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第30页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第30页 |
| 2.1.3 培养基与试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.4 p KOV-GFP的构建 | 第31-32页 |
| 2.1.5 G418对淡紫拟青霉抑制浓度筛选 | 第32页 |
| 2.1.6 原生质体制备 | 第32-33页 |
| 2.1.7 PEG介导的原生质体转化 | 第33页 |
| 2.1.8 转化子的验证 | 第33页 |
| 2.1.9 野生菌株和转化菌株的生长速率比较 | 第33页 |
| 2.1.10 转化菌株的荧光遗传稳定性分析 | 第33-34页 |
| 2.2 结果与分析 | 第34-37页 |
| 2.2.1 p KOV-GFP载体构建 | 第34页 |
| 2.2.2 不同细胞壁裂解酶制备原生质体的效率 | 第34-35页 |
| 2.2.3 淡紫拟青霉对G418抗性浓度筛选结果 | 第35-36页 |
| 2.2.4 转化菌株的PCR分子鉴定及荧光表型鉴定 | 第36页 |
| 2.2.5 野生菌株与转化菌株的生长速率比较 | 第36-37页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 淡紫拟青霉基因组分析 | 第38-66页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-41页 |
| 3.1.1 测序菌株 | 第38页 |
| 3.1.2 DNA样品提取 | 第38页 |
| 3.1.3 RNA样品提取 | 第38-39页 |
| 3.1.4 基因组测序和组装 | 第39页 |
| 3.1.5 基因预测及功能注释 | 第39页 |
| 3.1.6 基因家族分析 | 第39-40页 |
| 3.1.7 系统发育树和比较基因组分析 | 第40-41页 |
| 3.1.8 次级代谢产物合成酶基因分析 | 第41页 |
| 3.2 结果与分析 | 第41-65页 |
| 3.2.1 淡紫拟青霉基因组基本特征 | 第41-44页 |
| 3.2.2 重复序列 | 第44-45页 |
| 3.2.3 基因功能分类 | 第45-47页 |
| 3.2.4 水解酶类 | 第47-53页 |
| 3.2.5 系统发育分析 | 第53-56页 |
| 3.2.6 基因家族扩张分析 | 第56-59页 |
| 3.2.7 淡紫拟青霉基因组编码的次级代谢产物 | 第59-65页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第65-66页 |
| 第四章 Leucinostatin合成途径的研究 | 第66-89页 |
| 4.1 材料与方法 | 第66-72页 |
| 4.1.1 供试菌株 | 第66页 |
| 4.1.2 质粒载体 | 第66页 |
| 4.1.3 培养基与试剂 | 第66-67页 |
| 4.1.4 普通PCR扩增体系与引物序列 | 第67页 |
| 4.1.5 敲除载体与过表达载体的构建 | 第67-69页 |
| 4.1.6 同源敲除方法 | 第69-70页 |
| 4.1.7 qRT-PCR | 第70-71页 |
| 4.1.8 淡紫拟青霉的发酵培养 | 第71-72页 |
| 4.1.9 粗提物的HPLC-MS检测 | 第72页 |
| 4.1.10 化合物的分离纯化 | 第72页 |
| 4.1.11 抗真菌活性实验 | 第72页 |
| 4.2 结果与分析 | 第72-87页 |
| 4.2.1 对于VFPBJ_02539（lcs A）的分析 | 第72-73页 |
| 4.2.2 lcs A基因敲除 | 第73-75页 |
| 4.2.3 lcs基因簇边界的确定 | 第75-78页 |
| 4.2.4 lcs基因簇中关键基因的敲除 | 第78-79页 |
| 4.2.5 转录因子过表达 | 第79-82页 |
| 4.2.6 Leucinostatins的合成途径 | 第82-85页 |
| 4.2.7 Leucinostatins对于卵菌的生物活性 | 第85-87页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第87-89页 |
| 第五章 全文结论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 作者简历 | 第102页 |
