| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 第1章 引言 | 第15-17页 |
| 第2章 牛磺酸对人结直肠癌细胞凋亡与Mst1、JNK蛋白表达及JNK磷酸化的影响 | 第17-28页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 细胞 | 第17页 |
| 1.2 主要仪器 | 第17页 |
| 1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-23页 |
| 2.1 配制溶液 | 第18-19页 |
| 2.2 细胞培养 | 第19-20页 |
| 2.3 Western Blot检测不同人结直肠癌细胞Mst1、JNK蛋白表达及JNK磷酸化的水平 | 第20-22页 |
| 2.4 MTS比色法检测不同浓度牛磺酸对Caco-2和SW620细胞增殖的影响 | 第22页 |
| 2.5 流式细胞术检测高浓度牛磺酸对Caco-2和SW620细胞凋亡的影响 | 第22页 |
| 2.6 Western Blot分析高浓度牛磺酸对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达及JNK磷酸化的影响 | 第22页 |
| 2.7 统计学处理 | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-27页 |
| 3.1 细胞筛选 | 第23页 |
| 3.2 牛磺酸对Caco-2和SW620细胞增殖活性的影响 | 第23-25页 |
| 3.3 牛磺酸对Caco-2和SW620细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
| 3.4 牛磺酸对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK蛋白表达及JNK磷酸化的影响 | 第26-27页 |
| 4 小结 | 第27-28页 |
| 第3章 Mst1基因对人结直肠癌细胞的作用的体外研究 | 第28-48页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| 1.1 细胞 | 第28页 |
| 1.2 菌株 | 第28页 |
| 1.3 质粒载体 | 第28页 |
| 1.4 主要仪器 | 第28页 |
| 1.5 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-34页 |
| 2.1 溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.2 Mst1基因对Caco-2和SW620细胞增殖和凋亡影响的实验分组 | 第30页 |
| 2.3 重组质粒的扩增、提取及定量 | 第30-31页 |
| 2.4 转染 | 第31页 |
| 2.5 MTS比色法检测Caco-2和SW620细胞的增殖抑制率 | 第31页 |
| 2.6 流式细胞术检测Caco-2和SW620细胞的凋亡率 | 第31页 |
| 2.7 Hoechst 33342染色观察Caco-2和SW620细胞的凋亡形态 | 第31-32页 |
| 2.8 RT-qPCR分析Caco-2和SW620细胞中Mst1、JNK、p53、Bax、Bcl-2及caspase-3 mRNA的表达变化 | 第32-34页 |
| 2.9 Western blotting分析Caco-2和SW620细胞中Mst1、JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达及JNK磷酸化水平的变化 | 第34页 |
| 2.10 统计学处理 | 第34页 |
| 3 实验结果 | 第34-45页 |
| 3.1 MTS法分析Mst1基因高表达对Caco-2和SW620细胞增殖的影响 | 第34-36页 |
| 3.2 流式细胞术分析Mst1基因高表达对Caco-2和SW620细胞凋亡的影响 | 第36页 |
| 3.3 Hoechst 33342染色观察Mst1基因高表达对Caco-2和SW620细胞凋亡形态的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 RT-qPCR分析Mst1基因高表达对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、p53、Bax、Bcl-2及caspase-3 mRNA表达的影响 | 第37-39页 |
| 3.5 Western Blot分析Mst1基因高表达对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达及JNK磷酸化的影响 | 第39-41页 |
| 3.6 MTS法分析沉默Mst1基因对Caco-2和SW620细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
| 3.7 流式细胞术分析沉默Mst1基因对Caco-2和SW620细胞凋亡的影响 | 第42页 |
| 3.8 Hoechst 33342染色观察沉默Mst1基因对Caco-2和SW620细胞凋亡形态的影响 | 第42-43页 |
| 3.9 RT-qPCR分析沉默Mst1基因对人结直肠癌细胞Mst1、JNK、p53、Bax、Bcl-2及caspase-3 mRNA表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.10 Western Blot分析沉默Mst1基因对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达及JNK磷酸化的影响 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 第4章 阻断JNK信号通路对人结直肠癌细胞中凋亡相关mRNA及蛋白表达的影响 | 第48-54页 |
| 1 材料 | 第48页 |
| 1.1 细胞 | 第48页 |
| 1.2 主要仪器 | 第48页 |
| 1.3 主要试剂 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-49页 |
| 2.1 溶液配制 | 第48页 |
| 2.2 阻断JNK信号通路对Caco-2和SW620细胞中凋亡相关mRNA和蛋白表达的影响的实验分组 | 第48-49页 |
| 2.3 RT-qPCR分析Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、p53、Bax、Bcl-2及caspase-3 mRNA的表达变化 | 第49页 |
| 2.4 Western Blot分析Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达及JNK磷酸化水平的变化 | 第49页 |
| 2.5 统计学处理 | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-52页 |
| 3.1 RT-qPCR分析JNK抑制剂SP600125对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、p53、Bax、Bcl-2及caspase-3 mRNA表达的影响 | 第49-51页 |
| 3.2 Western Blot分析JNK抑制剂SP600125对Caco-2和SW620细胞Mst1、JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达及JNK磷酸化的影响 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第5章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 5.1 结论 | 第54页 |
| 5.2 进一步研究方向 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附图 | 第60-65页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第65-66页 |
| 综述 | 第66-76页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
