摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 捕食线虫真菌及Ric8蛋白的研究进展 | 第9-17页 |
1 捕食线虫真菌的研究概况 | 第9-11页 |
2 Ric8蛋白功能研究进展 | 第11-14页 |
3 本论文的选题依据及研究意义 | 第14-17页 |
第二章 寡孢节丛孢AoRic8等5个蛋白的功能结构域预测和聚类分析 | 第17-26页 |
1 前言 | 第17页 |
2 材料与方法 | 第17-18页 |
2.1 基因和蛋白的来源 | 第17页 |
2.2 分析方法 | 第17-18页 |
3 结果 | 第18-25页 |
3.1 AOL_s00083g127和AOL_s00007g178的功能结构域预测和聚类分析 | 第18-21页 |
3.2 AOL-s00080g412的功能结构域预测和聚类分析 | 第21-22页 |
3.3 AOL-s00076g18的功能结构域预测 | 第22-23页 |
3.4 AOL_s00215g338(Ric8)的功能结构域预测和聚类分析 | 第23-25页 |
4 讨论 | 第25-26页 |
第三章 基因敲除载体的构建 | 第26-47页 |
1 前言 | 第26-29页 |
2 酵母法构建载体 | 第29-37页 |
2.1 实验材料及仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-35页 |
2.3 实验结果 | 第35-37页 |
3 In-fusion法构建载体 | 第37-45页 |
3.1 材料及仪器 | 第37-38页 |
3.2 实验方法 | 第38-43页 |
3.3 实验结果 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
5 小结 | 第46-47页 |
第四章 寡孢节丛孢原生质体转化及筛选 | 第47-60页 |
1 前言 | 第47页 |
2 实验材料及仪器 | 第47-48页 |
2.1 实验菌株 | 第47页 |
2.2 实验用溶液及培养基 | 第47-48页 |
2.3 实验药品及试剂盒 | 第48页 |
2.4 实验中仪器及设备 | 第48页 |
3 实验方法 | 第48-54页 |
3.1 敲除载体全长片段扩增及回收 | 第48-49页 |
3.2 寡孢节丛孢原生质体的制备 | 第49页 |
3.3 寡孢节丛孢原生质体的转化 | 第49页 |
3.4 敲除转化子基因组提取 | 第49页 |
3.5 敲除转化子的PCR验证 | 第49-51页 |
3.6 Southern blot验证 | 第51-54页 |
4 实验结果 | 第54-57页 |
4.1 转化子PCR验证 | 第54-56页 |
4.2 转化子Southern blot验证 | 第56-57页 |
5 讨论 | 第57-58页 |
5.1 原生质体制备及转化 | 第57-58页 |
5.2 敲除转化子的PCR验证 | 第58页 |
5.3 敲除转化子的Southern blot验证 | 第58页 |
6 小结 | 第58-60页 |
第五章 WT菌株与五个敲除株的表型对比分析 | 第60-75页 |
1 前言 | 第60页 |
2 实验材料及仪器 | 第60-61页 |
2.1 实验菌株 | 第60-61页 |
2.2 主要培养基 | 第61页 |
2.3 实验药品 | 第61页 |
2.4 实验仪器及设备 | 第61页 |
3 实验方法 | 第61-63页 |
3.1 生长速率的表型比较 | 第61页 |
3.2 产孢的比较 | 第61-62页 |
3.3 产捕器比较 | 第62页 |
3.4 逆境生长情况比较 | 第62-63页 |
4 实验结果 | 第63-72页 |
4.1 生长速率的比较 | 第63-66页 |
4.2 产孢的比较 | 第66-67页 |
4.3 产捕器(三维菌网)比较 | 第67-69页 |
4.4 抗逆性比较 | 第69-72页 |
5 讨论 | 第72-74页 |
5.1 生长速率的比较 | 第72页 |
5.2 产孢比较 | 第72-73页 |
5.3 产捕器比较 | 第73页 |
5.4 抗逆性比较 | 第73-74页 |
6 小结 | 第74-75页 |
全文小结 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
附录 | 第81-88页 |
附录1 论文中使用的缩写及中英文对照 | 第81-82页 |
附录2 论文中使用的质粒图谱 | 第82-84页 |
附录3 酵母法敲除载体构建的引物序列 | 第84-85页 |
附录4 In-fusion法敲除载体构建的引物序列 | 第85-86页 |
附录5 硕士阶段参与发表的论文 | 第86-87页 |
附录6 硕士阶段所获荣誉 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |