中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第14-16页 |
引言 | 第16-18页 |
第一章 头花蓼含药血清药理学方法的建立 | 第18-26页 |
1 实验材料 | 第18-19页 |
1.1 药物 | 第18页 |
1.2 动物与细胞株 | 第18页 |
1.3 试剂 | 第18-19页 |
1.4 仪器 | 第19页 |
2 方法 | 第19-21页 |
2.1 头花蓼水提醇沉提取物(PCAWE)的制备 | 第19页 |
2.2 空白血清和含药血清的制备 | 第19页 |
2.3 MTT法检测空白血清及不同时间点PCAWES对细胞活性的影响 | 第19-20页 |
2.4 Griess试剂法检测空白血清和不同时间点PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放NO的影响 | 第20页 |
2.5 数据分析 | 第20-21页 |
3 结果 | 第21-24页 |
3.1 MTT法检测空白血清及PCAWES对细胞活性的影响 | 第21-22页 |
3.2 空白血清对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的影响 | 第22-23页 |
3.3 取血时间点的确定 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-26页 |
第二章 头花蓼含药血清抗炎有效提取物的筛选及活性评价 | 第26-36页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
1.1 动物与细胞株 | 第26页 |
1.2 仪器 | 第26页 |
1.3 试剂 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-29页 |
2.1 头花蓼抗炎有效组分的筛选 | 第27-28页 |
2.1.1 头花蓼不同提取物的制备 | 第27页 |
2.1.2 头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清的制备 | 第27页 |
2.1.3 MTT法检头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对细胞活性的影响 | 第27页 |
2.1.4 Griess试剂法检测头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对LPS诱导RAW264.7 细胞释放NO的影响 | 第27-28页 |
2.1.5 ELISA法检测头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对LPS诱导RAW264.7 细胞释放TNF-α 的影响 | 第28页 |
2.2 PCAWES对LPS诱导RAW264.7细胞释放炎症因子的影响 | 第28-29页 |
2.2.1 头花蓼水提醇沉提取物含药血清(PCAWES)的制备 | 第28页 |
2.2.2 MTT法检测PCAWES对细胞活性的影响 | 第28-29页 |
2.2.3 Griess试剂法检测PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放NO的影响 | 第29页 |
2.2.4 ELISA法检测PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放TNF-α、IL-6 的影响 | 第29页 |
2.3 数据分析 | 第29页 |
3 结果与讨论 | 第29-35页 |
3.1 头花蓼抗炎有效提取物的筛选 | 第29-32页 |
3.1.1 MTT法检测头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对细胞活性的影响 | 第29-30页 |
3.1.2 头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对LPS诱 导RAW264.7 细胞释放NO的影响 | 第30-31页 |
3.1.3 头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对LPS诱 导RAW264.7 细胞释放TNF-α 的影响 | 第31-32页 |
3.2 PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放炎症因子的影响 | 第32-35页 |
3.2.1 MTT法检测PCAWES对细胞活性的影响 | 第32-33页 |
3.2.2 PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放NO的影响 | 第33-34页 |
3.2.3 PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放TNF-α、IL-6 的影响 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
第三章 头花蓼含药血清抗炎作用机制研究 | 第36-48页 |
1 实验材料 | 第36-37页 |
1.1 动物与细胞株 | 第36页 |
1.2 仪器 | 第36-37页 |
1.3 试剂 | 第37页 |
2 方法 | 第37-41页 |
2.1 Real Time-PCR检测PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞i NOS、TNF-α、IL-6 m RNA水平的影响 | 第37-39页 |
2.2 Western blot法检测PCAWES对RAW264.7 细胞NF-κB和MAPKs通路中相关蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
2.2.1 蛋白样品的制备及浓度的测定 | 第39页 |
2.2.2 蛋白上样 | 第39页 |
2.2.3 SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
2.2.4 蛋白转移(湿转法) | 第40页 |
2.2.5 免疫反应 | 第40页 |
2.3 数据分析 | 第40-41页 |
3 结果与讨论 | 第41-47页 |
3.1 PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞i NOS、TNF-α、IL-6 m RNA水平的影响 | 第41-44页 |
3.1.1 总RNA的提取及检测 | 第41页 |
3.1.2 Real Time-PCR分析 | 第41-44页 |
3.2 PCAWES对RAW264.7 细胞NF-κB和MAPKs通路中相关蛋白表达的影响 | 第44-47页 |
3.2.1 PCAWES对RAW264.7 细胞NF-κB通路中p-IκB蛋白表达的影响 | 第44-46页 |
3.2.2 PCAWES对RAW264.7 细胞MAPKs通路中p-p38蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
第四章 基于随机森林法的头花蓼含药血清直接作用物质谱效关系研究 | 第48-58页 |
1 实验材料 | 第48-49页 |
1.1 动物与细胞株 | 第48页 |
1.2 仪器 | 第48页 |
1.3 试剂 | 第48-49页 |
2 方法 | 第49-51页 |
2.1 头花蓼含药血清移行成分分析 | 第49-50页 |
2.1.1 头花蓼水提醇沉提取物含药血清(PCAWES)的制备 | 第49页 |
2.1.2 头花蓼水提醇沉提取物及血清样品处理方法 | 第49页 |
2.1.3 色谱条件 | 第49-50页 |
2.1.4 质谱条件 | 第50页 |
2.2 头花蓼体内直接作用物质的谱效关系研究 | 第50-51页 |
2.2.1 头花蓼含药血清指纹图谱的建立 | 第50页 |
2.2.2 ELISA法检测PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放TNF-α的影响 | 第50-51页 |
2.2.3 基于随机森林法的体内直接作用物质谱效关系研究 | 第51页 |
3 结果与讨论 | 第51-56页 |
3.1 头花蓼有效组分在大鼠血清中的代谢产物鉴定分析 | 第51-53页 |
3.1.1 代谢分析软件Metabolite ToolsTM设置 | 第51页 |
3.1.2 头花蓼有效组分在大鼠血清中的代谢产物鉴定分析 | 第51-53页 |
3.2 基于随机森林法的体内直接作用物质谱效关系研究 | 第53-56页 |
3.2.1 ELISA法检测PCAWES对LPS诱导RAW264.7 细胞释放TNF-α的影响 | 第53-54页 |
3.2.2 随机森林法分析体内直接作用物质的谱效关系 | 第54-56页 |
4 结论 | 第56-58页 |
论文总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
综述 | 第64-75页 |
参考文献 | 第72-75页 |
作者简历 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
学位论文数据集 | 第77页 |