| 中文摘要 | 第2-3页 |
| abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第8-12页 |
| 一 实验材料 | 第12-16页 |
| 1.1 药物与试剂 | 第12-14页 |
| 1.2 细胞株 | 第14页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第14-15页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第15-16页 |
| 1.4.1 人恶性皮肤黑色素瘤A375细胞完全培养基DMEM的配制 | 第15页 |
| 1.4.2 细胞冻存液的配制 | 第15页 |
| 1.4.3 封闭液的配制 | 第15页 |
| 1.4.4 PBS缓冲液的配制 | 第15页 |
| 1.4.5 RIPA裂解液的配制 | 第15页 |
| 1.4.6 10ml 10%SDS-PAGE分离胶配制 | 第15页 |
| 1.4.7 3ml 10%SDS-PAGE分离胶配制 | 第15-16页 |
| 二 实验方法 | 第16-25页 |
| 2.1 细胞培养与传代 | 第16页 |
| 2.2 细胞冻存与复苏 | 第16-17页 |
| 2.3 实验分组 | 第17页 |
| 2.4 CCK-8 法测定细胞存活率 | 第17-18页 |
| 2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第18页 |
| 2.6 免疫印迹法检测蛋白表达 | 第18-20页 |
| 2.6.1 提取细胞总蛋白质 | 第18-19页 |
| 2.6.2 蛋白质浓度的测定 | 第19页 |
| 2.6.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) | 第19页 |
| 2.6.4 转膜 | 第19-20页 |
| 2.6.5 抗原抗体反应 | 第20页 |
| 2.6.6 显影 | 第20页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR检测COX-2 mRNA的表达 | 第20-22页 |
| 2.7.1 利用Trizol Reagent提取细胞总RNA | 第20-21页 |
| 2.7.2 RNA纯度及浓度检测 | 第21页 |
| 2.7.3 反转录 | 第21-22页 |
| 2.7.4 实时荧光定量分析 | 第22页 |
| 2.8 caspase-8 和caspase-9 活性测定 | 第22-23页 |
| 2.9 线粒体膜电位测定 | 第23页 |
| 2.10 转染质粒 | 第23-24页 |
| 2.11 统计学分析 | 第24-25页 |
| 三 实验结果 | 第25-36页 |
| 3.1 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞活性的影响 | 第25-26页 |
| 3.2 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞凋亡的影响 | 第26-28页 |
| 3.3 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞caspase-8 和caspase-9活性的影响 | 第28-29页 |
| 3.4 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞线粒体膜电位的影响22 | 第29-30页 |
| 3.5 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞中细胞色素C的影响23 | 第30-31页 |
| 3.6 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞中COX-2 蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.7 大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞中 COX-2m RNA 转录的影响 | 第32-33页 |
| 3.8 COX-2 沉默或过表达及大黄素甲醚 8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤细胞凋亡的影响 | 第33-36页 |
| 四 讨论 | 第36-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 综述 | 第46-75页 |
| 综述参考文献 | 第60-75页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第75-76页 |
| 缩略词表 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
