| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| 1 角膜与角膜病 | 第13页 |
| 2 角膜组织工程概述 | 第13-24页 |
| 2.1 组织工程种子细胞的研究进展 | 第14-16页 |
| 2.1.1 种子细胞的来源 | 第14-15页 |
| 2.1.2 种子细胞扩增 | 第15页 |
| 2.1.3 种子细胞复合方法 | 第15-16页 |
| 2.2 组织工程载体支架研究进展 | 第16-24页 |
| 2.2.1 组织工程载体支架的分类 | 第17-21页 |
| 2.2.2 组织工程载体支架的制备方法 | 第21-24页 |
| 3 本文的研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 胶原蛋白复合支架的制备与鉴定 | 第25-34页 |
| 1 实验仪器与材料 | 第25-27页 |
| 1.1 实验仪器 | 第25-26页 |
| 1.2 实验材料与试剂配制方法 | 第26-27页 |
| 1.2.1 实验材料 | 第26页 |
| 1.2.2 试剂配制方法 | 第26-27页 |
| 2 实验内容 | 第27-29页 |
| 2.1 胶原蛋白复合支架的制备 | 第27-28页 |
| 2.2 胶原蛋白复合支架的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.1 胶原蛋白复合支架透明度观察 | 第28页 |
| 2.2.2 胶原蛋白复合支架透光率测定 | 第28页 |
| 2.2.3 胶原蛋白复合支架含水量测定 | 第28页 |
| 2.2.4 胶原蛋白复合支架扫描电镜观察 | 第28-29页 |
| 2.2.5 胶原蛋白复合支架 HE 染色 | 第29页 |
| 2.2.6 胶原蛋白复合支架透射电镜观察 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-32页 |
| 3.1 胶原蛋白复合支架的透明度 | 第29-30页 |
| 3.2 胶原蛋白复合支架的透光率 | 第30页 |
| 3.3 胶原蛋白复合支架的含水量 | 第30页 |
| 3.4 胶原蛋白复合支架的表面结构 | 第30-31页 |
| 3.5 胶原蛋白复合支架的组织结构 | 第31页 |
| 3.6 胶原蛋白复合支架的超微结构 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32页 |
| 5 本章小结 | 第32-34页 |
| 第三章 人角膜基质种子细胞的培养及其鉴定 | 第34-47页 |
| 1 实验仪器与材料 | 第34-36页 |
| 1.1 实验仪器 | 第34-35页 |
| 1.2 实验材料与试剂配制方法 | 第35-36页 |
| 1.2.1 实验材料 | 第35页 |
| 1.2.2 试剂配制方法 | 第35-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-41页 |
| 2.1 人角膜基质细胞的体外培养 | 第36-37页 |
| 2.2 人角膜基质细胞生长特性分析 | 第37页 |
| 2.3 人角膜基质细胞细胞免疫化学检测 | 第37-38页 |
| 2.4 人角膜基质细胞细胞实时荧光定量 PCR 检测 | 第38-41页 |
| 2.4.1 RNA 提取 | 第38-39页 |
| 2.4.2 cDNA 的合成 | 第39页 |
| 2.4.3 引物设计 | 第39-40页 |
| 2.4.4 引物特异性验证 | 第40-41页 |
| 2.4.5 实时荧光定量 PCR | 第41页 |
| 3 实验结果 | 第41-45页 |
| 3.1 人角膜基质细胞的生长状态 | 第41-42页 |
| 3.2 人角膜基质细胞的增殖情况 | 第42-43页 |
| 3.3 人角膜基质细胞结构蛋白和功能蛋白表达情况 | 第43页 |
| 3.4 人角膜基质细胞细胞生长、增殖和分化相关因子表达情况 | 第43-45页 |
| 3.4.1 提取总 RNA 质量检测结果 | 第43-44页 |
| 3.4.2 引物特异性检测结果 | 第44页 |
| 3.4.3 生长、增殖和分化相关因子表达情况 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 胶原蛋白复合支架与人角膜基质细胞的生物相容性研究 | 第47-62页 |
| 1 实验仪器与材料 | 第47-50页 |
| 1.1 实验仪器 | 第47-48页 |
| 1.2 实验材料和试剂配制方法 | 第48-50页 |
| 1.2.1 实验材料 | 第48页 |
| 1.2.2 试剂配制方法 | 第48-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-53页 |
| 2.1 胶原蛋白复合支架灭菌处理 | 第50页 |
| 2.2 人角膜基质细胞的 DiI 标记 | 第50页 |
| 2.3 人角膜基质细胞的接种与体外培养 | 第50-51页 |
| 2.4 胶原蛋白复合支架的生物相容性检测 | 第51-53页 |
| 2.4.1 人角膜基质细胞与支架复合物的 DiI 荧光观察 | 第51页 |
| 2.4.2 人角膜基质细胞与支架复合物的扫描电镜观察 | 第51页 |
| 2.4.3 人角膜基质细胞与支架复合物的 HE 染色 | 第51页 |
| 2.4.4 人角膜基质细胞与支架复合物的透射电镜观察 | 第51页 |
| 2.4.5 人角膜基质细胞与支架复合物的免疫荧光检测 | 第51-52页 |
| 2.4.6 人角膜基质细胞与支架复合物的实时荧光定量 PCR 检测 | 第52-53页 |
| 3 实验结果 | 第53-58页 |
| 3.1 人角膜基质细胞在支架中的生长和分布情况 | 第53-54页 |
| 3.2 人角膜基质细胞与支架复合物的表面结构 | 第54页 |
| 3.3 人角膜基质细胞与支架复合物的组织结构 | 第54-55页 |
| 3.4 人角膜基质细胞与支架复合物的的超微结构 | 第55页 |
| 3.5 复合物中人角膜基质细胞标志蛋白和功能蛋白表达情况 | 第55-56页 |
| 3.6 复合物中人角膜基质细胞生长、分化和增殖相关因子表达情况 | 第56-58页 |
| 3.6.1 提取总 RNA 质量检测结果 | 第56-57页 |
| 3.6.2 引物特异性验证结果 | 第57页 |
| 3.6.3 实时荧光定量 PCR | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 5 本章小结 | 第61-62页 |
| 全文总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
| 发表论文及专利 | 第71-72页 |
