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日本血吸虫热休克蛋白70诱导小鼠先天免疫的初步研究

硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表第5-6页
摘要第6-8页
abstract第8-9页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-19页
    1.1 血吸虫及血吸虫疫苗研究概况第14-15页
    1.2 先天免疫及先天免疫细胞研究概况第15-16页
    1.3 HSP70的生物学功能及其研究概况第16页
    1.4 巨噬细胞功能及其作用机制概述第16-17页
    1.5 树突状细胞(DC)功能及其作用机制概述第17-19页
第二章 日本血吸虫热休克蛋白诱导小鼠RAW264.7细胞极化的研究第19-26页
    2.1 实验材料第19-20页
        2.1.1 实验主要试剂及仪器第19页
        2.1.2 实验细胞第19-20页
    2.2 实验方法第20-21页
        2.2.1 RAW264.7巨噬细胞系的传代培养及体外刺激第20页
        2.2.2 诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性检测第20页
        2.2.3 精氨酸酶(ArginaseⅠ)活性检测第20页
        2.2.4 流式细胞术(FCM)检测细胞膜蛋白CD206、CD16/32和膜内蛋白iNOS的表达第20页
        2.2.5 总RNA的抽提及RT-PCR第20-21页
    2.3 实验结果第21-24页
        2.3.1 SjHSP70蛋白对巨噬细胞分泌NO的影响第21-22页
        2.3.2 巨噬细胞精氨酸酶(ArginaseⅠ)活性的变化第22页
        2.3.3 流式细胞术(FCM)检测细胞膜蛋白CD206、CD16/32和膜内蛋白iNOS的表达第22-23页
        2.3.4 巨噬细胞表面标志及细胞因子的相对表达第23-24页
    2.4 讨论第24-26页
第三章 SjHSP70诱导致敏小鼠淋巴细胞反应的研究第26-34页
    3.1 实验材料第26页
        3.1.1 实验主要试剂及仪器第26页
        3.1.2 实验动物第26页
    3.2 实验方法第26-28页
        3.2.1 致敏小鼠脾脏混合淋巴细胞的制备第26-27页
        3.2.2 MTT法检测SjHSP70蛋白致敏小鼠脾脏混合淋巴细胞增殖第27页
        3.2.3 FCM检测SjHSP70蛋白致敏小鼠脾脏淋巴细胞亚群第27页
        3.2.4 FCM进行混合淋巴细胞胞内细胞因子检测第27-28页
        3.2.5 RT-PCR检测淋巴细胞细胞因子表达第28页
        3.2.6 SjHSP70致敏小鼠感染日本血吸虫尾蚴42d后脾脏淋巴细胞亚群第28页
    3.3 实验结果第28-32页
        3.3.1 SjHSP70蛋白促进脾脏混合淋巴细胞增殖第28-29页
        3.3.2 SjHSP70蛋白致敏小鼠脾脏淋巴细胞亚群的测定第29-30页
        3.3.3 混合淋巴细胞胞内细胞因子检测第30页
        3.3.4 细胞因子mRNA转录水平第30-31页
        3.3.5 致敏小鼠感染日本血吸虫尾蚴 42d后脾脏淋巴细胞亚群第31-32页
    3.4 讨论第32-34页
第四章 SjHSP70活化DC的TLRs信号途径鉴定第34-42页
    4.1 实验材料第34-35页
        4.1.1 实验主要试剂及仪器第34页
        4.1.2 实验动物第34页
        4.1.3 实验主要试剂配制第34-35页
    4.2 实验方法第35-37页
        4.2.1 骨髓树突状细胞培养及分选第35页
        4.2.2 扫描电镜(SEM)观察细胞形态第35-36页
        4.2.3 FCM检测TLR2和TLR4的表达第36页
        4.2.4 RT-PCR检测DC上细胞因子mRNA相对表达第36-37页
    4.3 实验结果第37-41页
        4.3.1 扫描电镜(SEM)观察DC细胞形态第37-38页
        4.3.2 FCM检测TLR2和TLR4表达结果第38-39页
        4.3.3 RT-PCR检测DC上细胞因子mRNA转录水平的情况第39-40页
        4.3.4 IкBα在mRNA转录水平的表达第40-41页
    4.4 讨论第41-42页
第五章 全文总结第42-43页
参考文献第43-50页
致谢第50-51页
作者简历第51页

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