| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第14-27页 |
| 1.1 菌膜的重要性与研究进展 | 第14-20页 |
| 1.1.1 菌膜的定义 | 第14页 |
| 1.1.2 菌膜的形成 | 第14-16页 |
| 1.1.3 菌膜的危害 | 第16-17页 |
| 1.1.4 菌膜的研究的热点 | 第17-20页 |
| 1.1.5 菌膜与食品安全 | 第20页 |
| 1.2 单核细胞增生李斯特菌与食品安全 | 第20-22页 |
| 1.2.1 单核细胞增生李斯特菌的生物学特性 | 第20-21页 |
| 1.2.2 单核细胞增生李斯特菌的流行病学特征 | 第21-22页 |
| 1.2.3 单核细胞增生李斯特菌对食品安全的影响 | 第22页 |
| 1.3 本课题研究意义及方法 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-27页 |
| 2 单核细胞增生李斯特菌TN917 转座突变株库的构建 | 第27-38页 |
| 前言 | 第27页 |
| 2.1 材料 | 第27-31页 |
| 2.1.1 菌种 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂 | 第27-29页 |
| 2.1.3 培养基 | 第29-31页 |
| 2.1.4 仪器 | 第31页 |
| 2.2 方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 质粒pTV1-OK 的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.2 质粒pTV1-OK 的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.3 单核细胞增生李斯特菌感受态的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.4 电转化质粒pTV1-OK 进入单核细胞增生李斯特菌感受态 | 第34页 |
| 2.2.5 电转化单核细胞李斯特菌的T11917 转座突变 | 第34页 |
| 2.3 结果 | 第34-36页 |
| 2.3.1 质粒pTV1-OK 酶切电泳 | 第34-35页 |
| 2.3.2 电转化单核细胞增生李斯特菌T11917 转座率及突变株库构建 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36页 |
| 2.4.1 电转化 | 第36页 |
| 2.4.2 转座率 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 3 单核细胞增生李斯特菌菌膜形成减少突变株的筛选 | 第38-55页 |
| 前言 | 第38页 |
| 3.1 材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 菌株 | 第38页 |
| 3.1.2 试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.3 仪器耗材 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 96 孔细胞培养板筛选单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株 | 第39页 |
| 3.2.2 PCR 验证突变株 | 第39-41页 |
| 3.2.3 荧光显微镜观察突变株菌膜形成量 | 第41-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-52页 |
| 3.3.1 菌膜形成量筛选 | 第42-47页 |
| 3.3.2 PCR 验证突变株的T11917 插入 | 第47页 |
| 3.3.3 荧光显微镜观察菌膜 | 第47-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 3.4.1 结晶紫染色法 | 第52-53页 |
| 3.4.2 荧光显微镜观察 | 第53页 |
| 3.4.3 菌膜形成特性推测 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 4 转座子插入基因位点的确定 | 第55-65页 |
| 前言 | 第55页 |
| 4.1 材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 菌株 | 第55页 |
| 4.1.2 试剂 | 第55-56页 |
| 4.1.3 培养基 | 第56页 |
| 4.1.4 仪器 | 第56页 |
| 4.2 方法 | 第56-60页 |
| 4.2.1 菌株LM-301 基因组DNA 的提取 | 第56-57页 |
| 4.2.2 LM-301 基因组DNA IPCR 模板的构建 | 第57页 |
| 4.2.3 IPCR 扩增T11917 插入位点旁侧基因 | 第57-58页 |
| 4.2.4 IPCR 产物片段的回收 | 第58页 |
| 4.2.5 大肠杆菌TG-1 感受态的制备 | 第58-59页 |
| 4.2.6 IPCR 产物片段经T 载体连接转化大肠杆菌TG-1 | 第59-60页 |
| 4.2.7 基因测序 | 第60页 |
| 4.3 结果 | 第60-63页 |
| 4.3.1 IPCR 扩增T11917 插入位点旁侧基因 | 第60-61页 |
| 4.3.2 菌落PCR 挑选IPCR 阳性克隆片段 | 第61页 |
| 4.3.3 基因测序 | 第61-63页 |
| 4.4 讨论 | 第63页 |
| 4.4.1 反向PCR | 第63页 |
| 4.4.2 细胞表面锚蛋白家族 | 第63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 5 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间学术论文发表情况 | 第68页 |
