| 致谢 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| 英文摘要 | 第16-19页 |
| 论文创新点 | 第20-21页 |
| 缩略词表 | 第21-28页 |
| 1 马兜铃酸-I致比格犬肝急性炎症伴肿瘤祖细胞形成 | 第28-50页 |
| 引言 | 第28-29页 |
| 1.1 仪器和试剂 | 第29-32页 |
| 1.1.1 仪器 | 第29页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第29页 |
| 1.1.3 实验药物 | 第29-30页 |
| 1.1.4 主要抗体及试剂盒 | 第30页 |
| 1.1.5 实验主要试剂及配制 | 第30-31页 |
| 1.1.6 其它试剂 | 第31-32页 |
| 1.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 1.2.1 动物分组及给药处理 | 第32页 |
| 1.2.2 比格犬肝脏切片苏木素-伊红(Hematoxylin & eosin,H&E)染色 | 第32-33页 |
| 1.2.3 比格犬肝脏切片TUNEL染色 | 第33页 |
| 1.2.4 比格犬肝脏切片免疫组织化学 | 第33页 |
| 1.2.5 比格犬肝脏切片免疫荧光 | 第33-34页 |
| 1.2.6 ELISA法检测比格犬肝组织IL-6浓度 | 第34页 |
| 1.2.7 比格犬肝组织Western-blot检测 | 第34-35页 |
| 1.2.8 比格犬肝组织免疫共沉淀检测 | 第35页 |
| 1.2.9 比格犬肝组织RT-PCR检测基因表达 | 第35-36页 |
| 1.2.10 数据分析 | 第36页 |
| 1.3 实验结果 | 第36-45页 |
| 1.3.1 AA I致比格犬肝组织损伤及肝细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 1.3.2 AAI促比格犬炎症细胞因子IL-6释放及IL-6Rα受体表达 | 第37页 |
| 1.3.3 AAI激活比格犬肝组织IL-6/STAT3通路 | 第37-38页 |
| 1.3.4 AAI致比格犬肝组织炎症相关通路Akt/NF-κB激活 | 第38-39页 |
| 1.3.5 AAI致比格犬肝脏前体细胞发生 | 第39-40页 |
| 1.3.6 TGF-β1通路促进比格犬肝前体细胞发生 | 第40-41页 |
| 1.3.7 AAI致比格犬肝肿瘤祖细胞发生 | 第41-45页 |
| 1.4 讨论 | 第45-48页 |
| 1.5 小结 | 第48-50页 |
| 2 马兜铃酸-I致比格犬miRNome改变与肿瘤祖细胞形成的相关性 | 第50-60页 |
| 引言 | 第50页 |
| 2.1 仪器和试剂 | 第50-51页 |
| 2.1.1 仪器 | 第50-51页 |
| 2.1.2 抗体信息 | 第51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 2.2.1 MicroRNAs芯片检测 | 第51页 |
| 2.2.2 MicroRNAs靶点预测 | 第51页 |
| 2.2.3 MicroRNAs靶点验证 | 第51-52页 |
| 2.2.4 数据分析 | 第52页 |
| 2.2.5 比格犬肝脏切片免疫荧光 | 第52页 |
| 2.3 实验结果 | 第52-56页 |
| 2.3.1 AAI致比格犬肝急性炎症伴miRNAs差异表达 | 第52页 |
| 2.3.2 qRT-PCR验证比格犬肝组织差异表达miRNAs | 第52-54页 |
| 2.3.3 基于生物信息学检测比格犬肝组织miRNAs靶蛋白表达 | 第54-55页 |
| 2.3.4 AAI促比格犬肝组织Lin28B及c-Myc表达上调 | 第55-56页 |
| 2.4 讨论 | 第56-58页 |
| 2.5 小结 | 第58-60页 |
| 3 Let-7b及miR-27a参与调控IL-6引发的HepG2细胞炎性恶变体外分子机制研究 | 第60-72页 |
| 引言 | 第60-61页 |
| 3.1 仪器和试剂 | 第61页 |
| 3.1.1 仪器 | 第61页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第61页 |
| 3.1.3 抗体信息 | 第61页 |
| 3.2 实验方法 | 第61-63页 |
| 3.2.1 HepG2细胞软琼脂糖增殖实验 | 第61-62页 |
| 3.2.2 HepG2细胞miRNAs拟似物及抑制剂转染 | 第62-63页 |
| 3.2.3 数据分析 | 第63页 |
| 3.3 实验结果 | 第63-68页 |
| 3.3.1 IL-6与let-7b抑制剂促进HepG2克隆形成 | 第63-64页 |
| 3.3.2 IL-6及let-7b抑制剂上调Lin28B | 第64页 |
| 3.3.3 IL-6协同let-7b抑制剂激活NF-κB(P50,P65)及p-FOXO1 | 第64-65页 |
| 3.3.4 MiR-27a负向调节FOXO1 | 第65-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-70页 |
| 3.5 小结 | 第70-72页 |
| 附.4：白细胞介素-6参与调控C/ebpβ及Oct4介导HepG2细胞炎性恶变 | 第72-87页 |
| 引言 | 第72-73页 |
| 4.1 仪器和试剂 | 第73-74页 |
| 4.1.1 仪器 | 第73页 |
| 4.1.2 主要试剂及配制 | 第73-74页 |
| 4.2 实验方法 | 第74-77页 |
| 4.2.1 HepG2细胞培养及冻存 | 第74页 |
| 4.2.2 HepG2细胞MTT法检测细胞活力 | 第74页 |
| 4.2.3 DAPI染色检测HepG2细胞凋亡状态 | 第74-75页 |
| 4.2.4 JC-1染色结合流式细胞术检测HepG2细胞线粒体膜电位变化 | 第75页 |
| 4.2.5 Western-blot检测IL-6,AAI作用HepG2细胞不同时间IL-6相关蛋白表达 | 第75页 |
| 4.2.6 ELISA法检测HepG2细胞上清液中IL-6浓度 | 第75-76页 |
| 4.2.7 RT-PCR法检测HepG2细胞C/ebp基因表达 | 第76页 |
| 4.2.8 HepG2细胞IL-6Rα小干扰 | 第76-77页 |
| 4.2.9 数据分析 | 第77页 |
| 4.3 实验结果 | 第77-84页 |
| 4.3.1 AAI引起HepG2细胞凋亡 | 第77页 |
| 4.3.2 流式细胞术检测AAI处理HepG2细胞8小时后线粒体膜电位变化 | 第77-78页 |
| 4.3.3 IL-6介导HepG2细胞JAK2/STAT3通路激活 | 第78-79页 |
| 4.3.4 HepG2细胞不具备IL-6分泌功能 | 第79-81页 |
| 4.3.5 IL-6激活HepG2细胞C/ebpβ基因 | 第81-82页 |
| 4.3.6 IL-6通过激活Akt调控HepG2细胞Oct4的表达 | 第82-83页 |
| 4.3.7 HepG2细胞Oct4的激活不依赖IL-6Rα/STAT3通路 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-86页 |
| 4.5 小结 | 第86-87页 |
| 附图 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 综述 肝脏炎症癌症恶性转化的网络调控及其分子机制研究进展 | 第98-116页 |
| 参考文献 | 第110-116页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第116-118页 |
