| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第7-11页 |
| 第一部分 文献综述及选题的目的意义 | 第11-24页 |
| 1. 马立克病的研究进展 | 第11-23页 |
| 1.1 病原学概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 MDV分类与血清型 | 第11-12页 |
| 1.1.2 MDV形态与理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2 MDV的基因组 | 第13-16页 |
| 1.2.1 MDV基因组结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 MDV的相关致病基因 | 第14-16页 |
| 1.3 MDV发病机理 | 第16-18页 |
| 1.3.1 早期溶细胞阶段 | 第17页 |
| 1.3.2 潜伏感染 | 第17-18页 |
| 1.3.3 第二次溶细胞性感染期 | 第18页 |
| 1.3.4 转化,肿瘤形成期 | 第18页 |
| 1.4 MD流行病学 | 第18页 |
| 1.5 临床症状和病理变化 | 第18-19页 |
| 1.5.1 神经型 | 第19页 |
| 1.5.2 内脏型 | 第19页 |
| 1.5.3 眼型 | 第19页 |
| 1.5.4 皮肤型 | 第19页 |
| 1.6 诊断技术 | 第19-21页 |
| 1.6.1 病毒分离 | 第19-20页 |
| 1.6.2 血清学实验 | 第20页 |
| 1.6.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第20页 |
| 1.6.4 DNA探针诊断 | 第20-21页 |
| 1.6.5 实时荧光定量 | 第21页 |
| 1.7 防控 | 第21-23页 |
| 1.7.1 疫苗防控 | 第21-22页 |
| 1.7.2 疫苗失败原因 | 第22页 |
| 1.7.3 抗病育种 | 第22-23页 |
| 2 研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 第二部分 实验研究 | 第24-48页 |
| 1. 材料 | 第24-25页 |
| 1.1 病毒 | 第24页 |
| 1.2 SPF鸡、鸡胚、鸭胚 | 第24页 |
| 1.3 载体与受体菌 | 第24页 |
| 1.4 主要试剂 | 第24页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 1.6 试剂配制 | 第25页 |
| 1.7 引物设计 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-34页 |
| 2.1 病料检测 | 第25-27页 |
| 2.1.1 病料来源 | 第25页 |
| 2.1.2 淋巴细胞分离 | 第25-26页 |
| 2.1.3 外周淋巴细胞总DNA提取 | 第26页 |
| 2.1.4 样品PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.2 病毒分离与鉴定 | 第27-29页 |
| 2.2.1 鸭胚成纤维细胞制备 | 第27页 |
| 2.2.2 细胞接毒和传代 | 第27-28页 |
| 2.2.3 细胞收毒 | 第28页 |
| 2.2.4 病毒的亚克隆 | 第28页 |
| 2.2.5 分离株滴度测定 | 第28-29页 |
| 2.3 Meq基因的序列测定分析 | 第29-32页 |
| 2.3.1 PCR反应体系与条件 | 第29页 |
| 2.3.2 DNA胶回收 | 第29-30页 |
| 2.3.3 目的基因与pMD19-T载体连接 | 第30页 |
| 2.3.4 重组质粒转化 | 第30-31页 |
| 2.3.5 重组质粒的筛选和鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4 免疫保护实验 | 第32-33页 |
| 2.5 指标测定 | 第33页 |
| 2.6 数据统计 | 第33-34页 |
| 3 结果和分析 | 第34-44页 |
| 3.1 PCR检测结果 | 第34页 |
| 3.2 NC株的分离培养和滴度测定 | 第34-35页 |
| 3.3 致病基因Meq的扩增和序列分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 Meq基因的PCR扩增 | 第35页 |
| 3.3.2 Meq基因的序列分析 | 第35-38页 |
| 3.4 MDV疫苗免疫保护实验结果 | 第38-44页 |
| 3.4.1 发病率 | 第40-41页 |
| 3.4.2 死亡率 | 第41页 |
| 3.4.3 肿瘤发生率 | 第41页 |
| 3.4.4 疫苗的保护指数 | 第41-42页 |
| 3.4.5 体重变化 | 第42页 |
| 3.4.6 外周淋巴细胞带毒检测结果 | 第42-43页 |
| 3.4.7 羽毛囊带毒检测结果 | 第43-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 MDV NC株Meq基因 | 第44页 |
| 4.2 MDV NC株毒力检测及CVI988/Rispens疫苗的保护力 | 第44-45页 |
| 4.3 鸡外周血和羽毛囊中MDV的带毒规律 | 第45-46页 |
| 4.4 肿瘤的体内分布 | 第46-47页 |
| 5. 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56页 |