| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 研究背景 | 第9-14页 |
| 1.1.1 双生病毒的发生与危害 | 第9页 |
| 1.1.2 双生病毒分子结构和致病相关因子 | 第9-10页 |
| 1.1.3 双生病毒启动子 | 第10-14页 |
| 1.1.4 双生病毒启动子的调控 | 第14页 |
| 1.2 国内外研究现状及趋势 | 第14-15页 |
| 1.2.1 国内 | 第14-15页 |
| 1.2.2 国外 | 第15页 |
| 1.3 课题研究的意义、目的 | 第15-16页 |
| 1.4 课题研究的主要内容 | 第16-17页 |
| 第2章 材料和方法 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第17页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 引物及测序 | 第17-19页 |
| 2.1.5 所用生物软件 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.2.1 小量快速提取番茄DNA | 第20页 |
| 2.2.2 PCR产物纯化 | 第20页 |
| 2.2.3 胶回收 | 第20-21页 |
| 2.2.4 大肠杆菌DH5α 感受态的制备 | 第21页 |
| 2.2.5 大肠杆菌热激转化 | 第21页 |
| 2.2.6 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.7 农杆菌感受态细胞电击转化 | 第22页 |
| 2.2.8 质粒小量提取 | 第22-23页 |
| 2.2.9 侵染性克隆的构建 | 第23页 |
| 2.2.10 TYLCV北京分离物DNA-A全序列的扩增及检测 | 第23页 |
| 2.2.11 序列拼接与分析及系统发生树的构建 | 第23-25页 |
| 第3章 TYLCV启动子缺失的发现与证实 | 第25-30页 |
| 3.1 实验过程 | 第25-26页 |
| 3.1.1 样品制备 | 第25页 |
| 3.1.2 引物设计 | 第25页 |
| 3.1.3 目的片段的扩增 | 第25页 |
| 3.1.4 序列拼接与分析 | 第25-26页 |
| 3.2 实验结果 | 第26-29页 |
| 3.2.1 PCR检测结果 | 第26页 |
| 3.2.2 病毒IR区缺失突变体的确认 | 第26-27页 |
| 3.2.3 序列分析与系统进化树分析 | 第27-29页 |
| 3.3 讨论 | 第29-30页 |
| 第4章 TYLCV侵染性克隆构建与侵染 | 第30-40页 |
| 4.1 实验过程 | 第30-34页 |
| 4.1.1 植物总DNA制备 | 第30页 |
| 4.1.2 载体构建 | 第30-33页 |
| 4.1.3 序列分析 | 第33页 |
| 4.1.4 番茄侵染 | 第33-34页 |
| 4.1.5 观察感病植株表型及PCR鉴定 | 第34页 |
| 4.2 实验结果 | 第34-39页 |
| 4.2.1 侵染性克隆构建结果 | 第34-36页 |
| 4.2.2 感病番茄症状及PCR鉴定 | 第36-39页 |
| 4.3 讨论 | 第39-40页 |
| 第5章 TYLCV双向启动子活性检测及缺失分析 | 第40-49页 |
| 5.1 实验过程 | 第40-42页 |
| 5.1.1 引物设计 | 第40页 |
| 5.1.2 序列分析 | 第40页 |
| 5.1.3 载体构建 | 第40-42页 |
| 5.2 实验结果 | 第42-48页 |
| 5.2.1 TYLCV全长启动子序列分析 | 第42-43页 |
| 5.2.2 TYLCV启动子表达载体构建 | 第43-45页 |
| 5.2.3 GUS活性组织化学分析 | 第45-48页 |
| 5.3 讨论 | 第48-49页 |
| 第6章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录A 缩略词表 | 第56-57页 |
| 附录B 常用培养基、缓冲液、抗生素及生长素配方 | 第57-61页 |
| 在学研究成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |