| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 引言 | 第7页 |
| 1.2 类固醇类化合物的研究进展 | 第7-9页 |
| 1.3 睾丸酮丛毛单胞杆菌的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.3.1 睾丸酮丛毛单胞杆菌简介 | 第9-10页 |
| 1.3.2 3,17β-HSD对甾体激素的降解机理 | 第10页 |
| 1.3.3 3α-HSD对甾体激素的降解机理 | 第10-12页 |
| 1.4 睾丸酮丛毛单胞杆菌一些功能酶的表达调节基因 | 第12-13页 |
| 1.4.1 LysR基因和其对 3,17β-HSD/3α-HSD表达的调控作用 | 第12页 |
| 1.4.2 TetR操纵子和其对 3,17β-HSD/3α-HSD表达的调控作用 | 第12-13页 |
| 1.4.3 phaR基因和其对 3,17β-HSD/3α-HSD表达的调控作用 | 第13页 |
| 1.5 研究目的和方法 | 第13-16页 |
| 1.5.1 研究的目的意义 | 第13-14页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第14-16页 |
| 第二章 TetR的克隆及对 3α-HSD和 3,17β-HSD表达调控研究 | 第16-43页 |
| 2.1.实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1. 菌株 | 第16页 |
| 2.1.2 仪器与药品 | 第16-17页 |
| 2.1.3 溶液及培养基 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 TetR基因的克隆 | 第19-23页 |
| 2.2.2 TetR基因对 3α-HSD表达调控研究 | 第23-28页 |
| 2.2.3 TetR基因对 3,17β-HSD表达调控研究 | 第28-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-41页 |
| 2.3.1 pUCm-T-TetR重组质粒的构建及鉴定 | 第31-34页 |
| 2.3.2 pK18-TetR质粒的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.3 TetR基因对 3α-HSD蛋白表达的调控 | 第35-37页 |
| 2.3.4 TetR基因对 3,17β-HSD蛋白表达的调控 | 第37-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-43页 |
| 第三章 TetR多克隆抗体的制备及甾体激素对其表达诱导作用 | 第43-54页 |
| 3.1 实验材料 | 第43页 |
| 3.1.1. 菌株 | 第43页 |
| 3.1.2 仪器与药品 | 第43页 |
| 3.1.3 溶液及培养基 | 第43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-49页 |
| 3.2.1 pET-15b-TetR表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 3.2.2 TetR蛋白的诱导表达和提取 | 第45页 |
| 3.2.3 TetR蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| 3.2.4 SDS凝胶电泳鉴定TetR蛋白表达情况 | 第46-47页 |
| 3.2.5 TetR蛋白的多克隆抗体的制备 | 第47页 |
| 3.2.6 兔血清效价测定 | 第47-48页 |
| 3.2.7 甾体激素诱导表达睾丸酮丛毛单胞菌中的TetR | 第48-49页 |
| 3.3 结果 | 第49-53页 |
| 3.3.1 TetR基因连接pET-15b载体鉴定 | 第49-51页 |
| 3.3.2 TetR蛋白的提取和纯化 | 第51页 |
| 3.3.3 TetR蛋白的ELISA检测数据 | 第51-53页 |
| 3.4 小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
