| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略词(中英文对照表) | 第15-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-49页 |
| 1.1 鸡抗病育种相关研究 | 第18-22页 |
| 1.1.1 家禽产业面临的挑战 | 第18-19页 |
| 1.1.2 鸡抗病育种相关研究的新技术 | 第19-22页 |
| 1.2 天然免疫系统 | 第22-30页 |
| 1.2.1 天然免疫和适应性免疫 | 第22-24页 |
| 1.2.2 天然免疫中的模式识别受体 | 第24-26页 |
| 1.2.3 鸡天然免疫系统 | 第26-30页 |
| 1.3 RLRs介导的天然免疫信号通路 | 第30-42页 |
| 1.3.1 RLRs家族成员概述 | 第30-32页 |
| 1.3.2 RLRs对病原体的识别 | 第32-33页 |
| 1.3.3 RLRs介导的信号通路 | 第33-37页 |
| 1.3.4 RLRs信号通路的调节 | 第37-40页 |
| 1.3.5 病毒靶向RLRs信号通路的免疫逃避 | 第40-42页 |
| 1.4 MDA5 | 第42-46页 |
| 1.4.1 MDA5及其纤维丝状结构 | 第42-44页 |
| 1.4.2 MDA5纤维丝对RNA的识别和信号激活 | 第44-45页 |
| 1.4.3 MDA5与自身免疫疾病 | 第45-46页 |
| 1.5 启动子 | 第46-49页 |
| 1.5.1 启动子概述 | 第46-47页 |
| 1.5.2 启动子元件概述 | 第47-48页 |
| 1.5.3 启动子的位置 | 第48-49页 |
| 第二章 鸡MDA5启动子的克隆及结构分析 | 第49-60页 |
| 2.1 材料与方法 | 第49-54页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第49页 |
| 2.1.2 主要试剂及溶液配置 | 第49-50页 |
| 2.1.3 主要仪器设 | 第50页 |
| 2.1.4 试验方法 | 第50-54页 |
| 2.2 试验结果 | 第54-58页 |
| 2.2.1 鸡MDA5启动子序列 | 第54-55页 |
| 2.2.2 鸡MDA5启动子结构分析 | 第55-56页 |
| 2.2.3 鸡MDA5启动子与其他物种进化关系分析 | 第56-57页 |
| 2.2.4 不同长度启动子的活性分析 | 第57-58页 |
| 2.3 讨论 | 第58-59页 |
| 2.4 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 鸡MDA5启动子真核报告载体质粒的构建 | 第60-72页 |
| 3.1 材料与方法 | 第60-65页 |
| 3.1.1 材料 | 第60-61页 |
| 3.1.2 主要试剂与溶液配置 | 第61-62页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第62页 |
| 3.1.4 试验方法 | 第62-65页 |
| 3.2 试验结果 | 第65-70页 |
| 3.2.1 质粒MDA5-pEASY-T1和pDsRed1-N1的双酶切和回收 | 第66-67页 |
| 3.2.2 质粒重组质粒MDA5-DsRed的获得和鉴定 | 第67-68页 |
| 3.2.3 引入SfiI和NheI酶切位点序列和质粒piggybac-GFP的双酶切与胶回收 | 第68-69页 |
| 3.2.4 重组质粒piggybac-MDA5-DsRed的获得与双酶切鉴定 | 第69-70页 |
| 3.3 讨论 | 第70-71页 |
| 3.4 小结 | 第71-72页 |
| 第四章 鸡MDA5启动子功能验证 | 第72-86页 |
| 4.1 材料与方法 | 第72-77页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第72页 |
| 4.1.2 主要试剂与溶液配置 | 第72-73页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第73-74页 |
| 4.1.4 试验方法 | 第74-77页 |
| 4.2 试验结果 | 第77-83页 |
| 4.2.1 细胞稳定转染质粒piggybac-MDA5-DsRed细胞系的获得 | 第77页 |
| 4.2.2 Poly (I:C)刺激增强了鸡MDA5启动子活性且上调了内源性MDA5基因的表达 | 第77-79页 |
| 4.2.3 IFN-β处理增强了鸡MDA5启动子活性且上调了内源性MDA5基因的表达 | 第79-81页 |
| 4.2.4 不同病毒对细胞的刺激 | 第81-83页 |
| 4.3 讨论 | 第83-85页 |
| 4.4 小结 | 第85-86页 |
| 第五章 鸡MDA5启动子启动鸭RIG-I基因表达 | 第86-93页 |
| 5.1 材料与方法 | 第86-88页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第86页 |
| 5.1.2 主要试剂与溶液配置 | 第86页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第86-87页 |
| 5.1.4 试验方法 | 第87-88页 |
| 5.2 试验结果 | 第88-91页 |
| 5.2.1 质粒图谱与鉴定 | 第88-90页 |
| 5.2.2 长链Poly (I:C)对细胞的刺激 | 第90-91页 |
| 5.2.3 RT-PCR分析 | 第91页 |
| 5.3 讨论 | 第91-92页 |
| 5.4 小结 | 第92-93页 |
| 总结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 攻读学位期间发表论文及专利情况 | 第112-113页 |
