| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 中英缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-13页 |
| 第2章 材料 | 第13-16页 |
| 2.1 标本采集 | 第13页 |
| 2.2 细胞系 | 第13页 |
| 2.3 主要试剂和耗材 | 第13-14页 |
| 2.4 实验试剂配制 | 第14-15页 |
| 2.5 主要的设备仪器 | 第15-16页 |
| 第3章 方法 | 第16-26页 |
| 3.1 免疫组化 | 第16-17页 |
| 3.2 细胞培养 | 第17-18页 |
| 3.2.1 细胞传代 | 第17页 |
| 3.2.2 细胞冻存 | 第17页 |
| 3.2.3 细胞复苏 | 第17-18页 |
| 3.3 Western Blot检测细胞系中CHD1L蛋白的表达 | 第18-20页 |
| 3.3.1 细胞总蛋白提取 | 第18页 |
| 3.3.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第18页 |
| 3.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第18-19页 |
| 3.3.4 转膜 | 第19-20页 |
| 3.3.5 免疫反应 | 第20页 |
| 3.3.6 蛋白检测 | 第20页 |
| 3.4 qRT-PCR检测细胞系中CHD1LmRNA的表达 | 第20-22页 |
| 3.4.1 细胞总RNA的提取 | 第20页 |
| 3.4.2 RNA逆转录为cDNA | 第20-21页 |
| 3.4.3 设计CHD1L和GAPDH的引物 | 第21页 |
| 3.4.4 qRT-PCR检测CHD1L的mRNA表达水平 | 第21-22页 |
| 3.5 质粒转染 | 第22-23页 |
| 3.5.1 质粒的构建与抽提 | 第22页 |
| 3.5.2 细胞转染 | 第22-23页 |
| 3.6 CCK8增殖实验 | 第23页 |
| 3.7 平板克隆形成实验 | 第23-24页 |
| 3.8 细胞划痕实验 | 第24页 |
| 3.9 Transwell迁移和侵袭实验 | 第24-25页 |
| 3.9.1 Transwell迁移实验 | 第24页 |
| 3.9.2 Transwell侵袭实验 | 第24-25页 |
| 3.10 统计学分析 | 第25-26页 |
| 第4章 结果 | 第26-35页 |
| 4.1 CHD1L在ICC组织中的表达及其与癌症患者临床病理因素及生存预后的关系 | 第26-29页 |
| 4.1.1 CHD1L在ICC组织和正常肝内胆管组织中的表达 | 第26-27页 |
| 4.1.2 CHD1L表达与ICC患者临床病理因素的关系 | 第27-28页 |
| 4.1.3 CHD1L表达与ICC患者预后的关系 | 第28-29页 |
| 4.2 CHD1L在不同ICC细胞系中的蛋白和mRNA表达 | 第29-30页 |
| 4.3 干扰RBE细胞CHD1L后，其蛋白表达水平降低 | 第30-32页 |
| 4.3.1 转染效率的测定及筛选干扰效果最好的 CHD1L-RNAi 质粒 | 第30-31页 |
| 4.3.2 干扰 RBE 细胞 CHD1L 后，其蛋白表达水平降低 | 第31-32页 |
| 4.4 干扰RBE细胞CHD1L的表达后，其增殖能力下降 | 第32-33页 |
| 4.5 干扰RBE细胞CHD1L的表达后，其迁移与侵袭能力下降 | 第33-35页 |
| 第5章 讨论 | 第35-38页 |
| 第6章 结论与展望 | 第38-39页 |
| 6.1 结论 | 第38页 |
| 6.2 展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
| 综述 | 第44-51页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
