摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
文献综述 | 第13-30页 |
第一章 脂肪细胞甘油三酯积累的研究进展 | 第13-18页 |
·成脂分化的一般过程 | 第13-15页 |
·脂肪细胞分化相关因子的转录调控 | 第15-18页 |
·C/EBPs | 第15-16页 |
·PPARγ | 第16-17页 |
·SREBP-1c | 第17-18页 |
第二章 ERRα 和 Wnt/β-catenin 信号通路对成脂分化的影响 | 第18-30页 |
·ERRα 简介 | 第18-22页 |
·ERRα 的组织表达 | 第18页 |
·ERR 受体结构 | 第18-19页 |
·ERRα 与辅助调控因子 | 第19-20页 |
·ERRα 调控代谢过程 | 第20-21页 |
·ERRα 在成脂分化过程中的作用 | 第21-22页 |
·Wnt 信号通路简介 | 第22-28页 |
·Wnt 信号通路转导过程 | 第22-24页 |
·Wnt 信号通路调控成脂分化 | 第24-25页 |
·Wnt 信号通路拮抗剂的分子调控 | 第25-26页 |
·Wnt 信号通路与其它转录因子互相作用 | 第26-27页 |
·Wnt 分子在人类肥胖和 II 型糖尿病中的发生机理 | 第27-28页 |
·ERRα 与 β-catenin 之间的互作 | 第28-30页 |
实验研究 | 第30-53页 |
前言 | 第30-31页 |
第三章 β-catenin 逆转录病毒载体的包装与侵染 | 第31-39页 |
·材料与方法 | 第31-33页 |
·材料 | 第31页 |
·主要仪器与设备 | 第31页 |
·主要溶液、试剂配制 | 第31页 |
·质粒转化 DH5α 感受态细胞 | 第31-32页 |
·质粒的小量提取 | 第32页 |
·PCR 鉴定 β-catenin 逆转录病毒质粒 | 第32页 |
·质粒的大量提取 | 第32页 |
·逆转录病毒的产生 | 第32-33页 |
·逆转录病毒侵染猪前体脂肪细胞 | 第33页 |
·猪前体脂肪细胞的分离培养 | 第33页 |
·β-catenin 逆转录病毒侵染猪前体脂肪细胞 | 第33页 |
·结果 | 第33-37页 |
·β-catenin 逆转录病毒相关检测 | 第33-34页 |
·猪前体脂肪细胞培养 | 第34页 |
·β-catenin 逆转录病毒脂质体法包装 | 第34-35页 |
·β-catenin 逆转录病毒 CaCl2法包装 | 第35-36页 |
·β-catenin 逆转录病毒侵染猪前体脂肪细胞 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第四章 Ad-ERRα 包装、侵染与检测 | 第39-45页 |
·材料与方法 | 第39-41页 |
·质粒、细胞株及实验动物 | 第39页 |
·主要仪器与设备 | 第39页 |
·主要溶液、试剂配制 | 第39页 |
·重组病毒的包装、扩繁 | 第39-41页 |
·细胞的总蛋白提取 | 第41页 |
·Western blotting | 第41页 |
·数据分析 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-44页 |
·pAd-ERRα 质粒的提取及鉴定 | 第41-42页 |
·pAd-ERRα 质粒的包装 | 第42页 |
·Ad-ERRα 的扩增、病毒滴度测定及侵染猪前体脂肪细胞 | 第42-43页 |
·Western Bloting 检测 ERRα 表达 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第五章 成脂分化过程中,ERRα 抑制 β-catenin 基因表达 | 第45-53页 |
·材料与方法 | 第45-47页 |
·材料 | 第45页 |
·主要仪器与设备 | 第45页 |
·主要溶液、试剂配制 | 第45页 |
·猪前体脂肪细胞分离培养和处理 | 第45页 |
·细胞的油红 0 染色 | 第45-46页 |
·Western Bloting | 第46页 |
·RNA 提取 | 第46页 |
·反转录合成 cDNA 第一链 | 第46页 |
·实时定量 PCR 检测基因表达 | 第46-47页 |
·统计学分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-51页 |
·Western Bloting 检测 ERRα、β-catenin 成脂时序表达 | 第47-48页 |
·油红 O 染色检测成脂分化 | 第48-49页 |
·Western Bloting 检测 ERRα 抑制 β-catenin 蛋白表达 | 第49-50页 |
·RT-PCR 检测 ERRα 抑制 β-catenin 基因表达 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53页 |
创新点 | 第53页 |
进一步研究内容 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |