| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 Rac1以及Cdc42在免疫系统中发挥的功能 | 第10-18页 |
| 1.1 Rac1在细胞学、免疫、以及信号通路方面研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 Rac1在细胞学上的功能 | 第11页 |
| 1.1.2 Rac1在免疫方面的作用 | 第11-13页 |
| 1.1.3 Rac1在免疫通路中的作用 | 第13-15页 |
| 1.2 Cdc42先天免疫系统中发挥的作用 | 第15-18页 |
| 1.2.1 Cdc42在细胞吞噬作用中发挥的功能 | 第15-17页 |
| 1.2.2 Cdc42与MAPK通路以及促炎症细胞因子的关系 | 第17-18页 |
| 第二章 草鱼Rac1基因的cDNA全序列克隆以及免疫功能分析 | 第18-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 草鱼的投喂以及细菌注射 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验细胞、质粒、菌株以及siRNA的准备 | 第20页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第20-22页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 总RNA抽提方法 | 第22-23页 |
| 2.2.2 gcRac1的cDNA序列克隆 | 第23-25页 |
| 2.2.3 gcRac1序列分析 | 第25页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR | 第25-26页 |
| 2.2.5 过表达载体构建以及RNA干扰效率测定 | 第26页 |
| 2.2.6 CIK细胞感染嗜水气单胞菌、脂多糖(LPS)以及鞭毛蛋白后gcRac1的时间表达谱 | 第26-27页 |
| 2.2.7 gcRac1过表达细胞以及RNA干扰细胞中Rac1下游基因对于细菌和细菌相关病原体的反应 | 第27页 |
| 2.2.8 gcRac1对CIK细胞嗜水气单胞菌侵袭力的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.9 荧光素酶报告基因分析 | 第28页 |
| 2.3. 实验结果 | 第28-43页 |
| 2.3.1 cDNA的克隆及序列分析 | 第28-30页 |
| 2.3.2 系统发育树分析以及系列多重比对 | 第30-34页 |
| 2.3.3 gcRac1基因mRNA的组织分布和成体攻毒后的时间表达谱 | 第34-35页 |
| 2.3.4 重组载体的转染和siRNA的有效性测试 | 第35-37页 |
| 2.3.5 CIK细胞经嗜水气单胞菌、鞭毛蛋白和脂多糖刺激后gcRac1的时间表达谱 | 第37-38页 |
| 2.3.6 在Rac1过表达细胞中以及Rac1敲降细胞中gcPAK1，gcIL1-β，gcTNF-α 和gcIFN对于细菌和细菌相关病原体刺激的反应 | 第38-41页 |
| 2.3.7 CIK细胞中gcRac1对嗜水气单胞菌侵袭力的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.8 gcRac1在CIK细胞中激活NF-κB信号通路 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-49页 |
| 第三章 草鱼Cdc42基因的cDNA序列克隆以及免疫功能分析 | 第49-69页 |
| 3.1 实验材料 | 第50页 |
| 3.2. 实验方法 | 第50-54页 |
| 3.2.1. 总RNA抽提方法 | 第50页 |
| 3.2.2. CiCdc42的cDNA序列分子克隆 | 第50-52页 |
| 3.2.3. CiCdc42的生物信息学分析 | 第52页 |
| 3.2.4. 荧光定量PCR | 第52页 |
| 3.2.5. 过表达重组载体构建以及siRNA干扰效果检测 | 第52-53页 |
| 3.2.6 CIK细胞感染嗜水气单胞菌、脂多糖(LPS)以及鞭毛蛋白后CiCdc42的时间表达谱 | 第53页 |
| 3.2.7 CiCdc42过表达细胞以及RNA干扰细胞中Cdc42下游基因对于细菌和细菌相关病原体的反应 | 第53-54页 |
| 3.2.8 CiCdc42对CIK细胞嗜水气单胞菌侵袭力的影响 | 第54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-66页 |
| 3.3.1 cDNA序列以及预测氨基酸序列信息 | 第54-57页 |
| 3.3.2 系统进化树以及多重序列比对分析 | 第57页 |
| 3.3.3 CiCdc42基因的表达谱以及嗜水气单胞菌攻毒后的时间表达谱 | 第57-61页 |
| 3.3.4 pEGFP-N1-Cdc42重组载体转染CIK细胞以及siRNA- CiCdc42的干扰效果测试 | 第61页 |
| 3.3.5 CIK细胞经嗜水气单胞菌、鞭毛蛋白和脂多糖刺激后CiCdc42的时间表达谱 | 第61-62页 |
| 3.3.6 CiCdc42过表达以及RNA干扰细胞在细菌以及PAMPs刺激后CiPAK1, CiIL-1β, CiTNF-α 以及CiIFN的表达量变化 | 第62-65页 |
| 3.3.7 CiCdc42对于抵抗细菌侵染的效果测定 | 第65-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
