| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 黄曲霉的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 黄曲霉的菌落形态 | 第13页 |
| 1.1.2 黄曲霉的危害 | 第13-14页 |
| 1.1.3 黄曲霉污染的防治 | 第14-15页 |
| 1.2 麝香草酚的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 麝香草酚精油的性质特征 | 第15-16页 |
| 1.2.2 麝香草酚精油的提取 | 第16页 |
| 1.2.3 麝香草酚植物精油的应用 | 第16页 |
| 1.2.4 麝香草酚精油的毒理学特征 | 第16-17页 |
| 1.2.5 麝香草酚植物精油的抗菌机理 | 第17-18页 |
| 1.3 细胞凋亡的研究现状 | 第18-21页 |
| 1.3.1 活性氧与细胞凋亡的关系 | 第19页 |
| 1.3.2 一氧化氮与细胞凋亡的关系 | 第19页 |
| 1.3.3 真菌的细胞凋亡 | 第19-21页 |
| 1.4 细胞钾离子通道的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.4.1 细胞中的钾信号 | 第21页 |
| 1.4.2 钾信号与活性氧的关系 | 第21页 |
| 1.4.3 钾离子与细胞凋亡的关系 | 第21-22页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 麝香草酚对黄曲霉的抑制作用研究 | 第24-31页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第24页 |
| 2.1.1 培养基 | 第24页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂与仪器 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 黄曲霉孢子悬浮液的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.2 麝香草酚对黄曲霉最小抑制浓度的测定 | 第25页 |
| 2.2.3 麝香草酚处理下孢子存活情况的测定 | 第25页 |
| 2.2.4 麝香草酚对黄曲霉菌丝的抑制作用 | 第25页 |
| 2.2.5 扫描电镜观察麝香草酚处理的黄曲霉孢子 | 第25-26页 |
| 2.2.6 数据统计分析 | 第26页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第26-28页 |
| 2.3.1 麝香草酚对黄曲霉生长最小抑制浓度的测定 | 第26-27页 |
| 2.3.2 麝香草酚对黄曲霉菌丝的抑制作用 | 第27-28页 |
| 2.3.3 麝香草酚对黄曲霉孢子形态的影响 | 第28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-31页 |
| 第三章 麝香草酚诱导黄曲霉孢子产生活性氧和一氧化氮的研究 | 第31-42页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.1 培养基 | 第31页 |
| 3.1.2 实验菌株 | 第31页 |
| 3.1.3 试剂与仪器 | 第31-32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 麝香草酚处理黄曲霉孢子后活性氧的检测 | 第32页 |
| 3.2.2 麝香草酚处理黄曲霉孢子后一氧化氮的检测 | 第32页 |
| 3.2.3 麝香草酚处理黄曲霉孢子后NOS和NR酶活的检测 | 第32页 |
| 3.2.4 麝香草酚处理黄曲霉孢子后NOS和NR基因的转录水平 | 第32-33页 |
| 3.2.5 麝香草酚处理黄曲霉孢子后一氧化氮与活性氧的相互作用 | 第33页 |
| 3.2.6 麝香草酚处理黄曲霉孢子后存活孢子的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.7 数据统计分析 | 第34页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第34-40页 |
| 3.3.1 麝香草酚诱导黄曲霉孢子内活性氧的迸发 | 第34-36页 |
| 3.3.2 麝香草酚诱导黄曲霉孢子内一氧化氮的积累 | 第36-37页 |
| 3.3.3 麝香草酚诱导黄曲霉孢子NOS和NR基因的表达及酶活变化 | 第37-38页 |
| 3.3.4 麝香草酚诱导黄曲霉孢子产生的一氧化氮受活性氧的调控 | 第38页 |
| 3.3.5 麝香草酚处理黄曲霉孢子后孢子的存活情况 | 第38-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第四章 麝香草酚诱导黄曲霉孢子凋亡现象的研究 | 第42-51页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第42页 |
| 4.1.1 培养基 | 第42页 |
| 4.1.2 实验菌株 | 第42页 |
| 4.1.3 试剂与仪器 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 细胞凋亡检测 | 第42-43页 |
| 4.2.2 线粒体膜电位检测 | 第43页 |
| 4.2.3 TUNEL染色DNA损伤检测 | 第43-44页 |
| 4.2.4 抑制Caspase检测麝香草酚诱导黄曲霉孢子的凋亡情况 | 第44页 |
| 4.2.5 Caspase-9 酶活的测定 | 第44-45页 |
| 4.2.6 数据统计分析 | 第45页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第45-49页 |
| 4.3.1 麝香草酚诱导黄曲霉发生凋亡 | 第45-46页 |
| 4.3.2 麝香草酚诱导黄曲霉孢子线粒体膜电位发生变化 | 第46-47页 |
| 4.3.3 麝香草酚诱导黄曲霉孢子DNA损伤 | 第47-48页 |
| 4.3.4 Caspase参与了麝香草酚诱导黄曲霉孢子的凋亡 | 第48-49页 |
| 4.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第五章 麝香草酚作用黄曲霉孢子靶标的预测及验证 | 第51-64页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第51页 |
| 5.1.1 培养基 | 第51页 |
| 5.1.2 实验菌株 | 第51页 |
| 5.1.3 试剂与仪器 | 第51页 |
| 5.2 试验方法 | 第51-54页 |
| 5.2.1 麝香草酚作用黄曲霉孢子靶标的预测 | 第51-52页 |
| 5.2.2 麝香草酚诱导黄曲霉孢子钾离子浓度的变化 | 第52页 |
| 5.2.3 抑制活性氧的产生检测钾离子的变化 | 第52-53页 |
| 5.2.4 抑制钾离子通道活性的产生检测活性氧的变化 | 第53页 |
| 5.2.5 抑制活性氧的产生检测黄曲霉孢子的凋亡情况 | 第53页 |
| 5.2.6 抑制钾离子通道活性检测黄曲霉孢子的凋亡情况 | 第53-54页 |
| 5.2.7 数据统计分析 | 第54页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第54-62页 |
| 5.3.1 麝香草酚与黄曲霉电压门控钾离子通道相互作用 | 第54-57页 |
| 5.3.2 麝香草酚诱导黄曲霉孢子钾离子浓度升高 | 第57-58页 |
| 5.3.3 麝香草酚诱导黄曲霉孢子钾离子浓度升高受活性氧的影响 | 第58-59页 |
| 5.3.4 麝香草酚诱导黄曲霉孢子活性氧的产生受到钾离子变化的影响 | 第59-60页 |
| 5.3.5 活性氧和钾离子参与了黄曲霉孢子的凋亡 | 第60-62页 |
| 5.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第六章 黄曲霉KCNAB基因的敲除及表型变化 | 第64-75页 |
| 6.1 实验材料与仪器 | 第64-65页 |
| 6.1.1 培养基 | 第64页 |
| 6.1.2 实验菌株 | 第64-65页 |
| 6.1.3 试剂与仪器 | 第65页 |
| 6.2 试验方法 | 第65-68页 |
| 6.2.1 敲除载体构建 | 第65-66页 |
| 6.2.2 质粒提取及电转化 | 第66页 |
| 6.2.3 引物设计及PCR验证 | 第66-67页 |
| 6.2.4 ΔKCNAB黄曲霉敲除体表型实验 | 第67-68页 |
| 6.2.5 麝香草酚导致ΔKCNAB黄曲霉敲除体孢子钾离子及凋亡的变化 | 第68页 |
| 6.2.6 数据统计分析 | 第68页 |
| 6.3 实验结果与分析 | 第68-73页 |
| 6.3.1 黄曲霉KCNAB基因的敲除及PCR验证 | 第68-69页 |
| 6.3.2 黄曲霉ΔKCNAB敲除菌株表型变化 | 第69-71页 |
| 6.3.3 麝香草酚导致ΔKCNAB黄曲霉敲除体孢子钾离子及凋亡的变化 | 第71-73页 |
| 6.4 本章小结 | 第73-75页 |
| 第七章 全文总结与创新点 | 第75-79页 |
| 7.1 全文总结 | 第75-77页 |
| 7.2 创新点 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第88页 |
