| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-23页 |
| ·风疹病毒的生物学特性 | 第9-13页 |
| ·风疹病毒基因组成和功能 | 第9-10页 |
| ·风疹病毒结构蛋白的功能 | 第10-13页 |
| ·风疹病毒感染及其危害性 | 第13-16页 |
| ·后天感染 | 第13-14页 |
| ·先天感染 | 第14-15页 |
| ·国内外风疹流行病学研究情况 | 第15-16页 |
| ·风疹病毒感染的实验室主要检测方法 | 第16-22页 |
| ·病毒分离 | 第16-17页 |
| ·血清学诊断技术 | 第17-19页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第19-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 重叠PCR-酶切连接法人工合成风疹病毒E1基因及其表达 | 第23-42页 |
| ·前言 | 第23页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第23-25页 |
| ·主要实验材料 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·RV E1基因的密码子优化以及引物设计合成 | 第25页 |
| ·重叠PCR合成EF1、EF2、EF3序列片段 | 第25-28页 |
| ·酶切连接法将EF1、EF2、EF3拼接得到全长RV E1并构建重组质粒 | 第28-30页 |
| ·IPTG诱导目的蛋白的表达 | 第30页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE分析及Western blot鉴定 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-39页 |
| ·RV E1序列分析及密码子优化 | 第31-32页 |
| ·设计EF1、EF2、EF3各大段序列的寡核苷酸引物 | 第32-33页 |
| ·重叠PCR合成EF1、EF2、EF3序列 | 第33-35页 |
| ·EF1、EF2、EF3酶切拼接成全长RV E1并构建重组质粒pET32-RV E1 | 第35-38页 |
| ·重组蛋白E1的表达和鉴定 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·结论 | 第41-42页 |
| 第三章 风疹病毒E1蛋白抗原肽的表达鉴定 | 第42-51页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第42页 |
| ·主要实验材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·E1抗原肽基因E1_(epitope)的扩增 | 第42-44页 |
| ·构建原核表达载体pET32-E1_(epitope) | 第44页 |
| ·抗原肽E1_(epitope)的诱导表达 | 第44-45页 |
| ·重组抗原肽E1_(epitope)的鉴定 | 第45页 |
| ·优化重组抗原肽E1_(epitope)的表达 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-48页 |
| ·抗原肽E1_(epitope)基因的扩增及鉴定 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体pET32-El_(epitope)的构建 | 第46-47页 |
| ·重组抗原肽E1_(epitope)的表达 | 第47页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组抗原肽E1_(epitope)的表达优化 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-65页 |
| 附录Ⅰ RV E1全长基因及抗原肽基因测序结果 | 第57-60页 |
| 附录Ⅱ 风疹病毒密码子优化后的E1基因(Query)与天然E1基因(Sbjct)比对 | 第60-61页 |
| 附录Ⅲ 本实验中所用试剂配方 | 第61-63页 |
| 附录Ⅳ 本研究中所用的常规实验方法 | 第63-64页 |
| 附录Ⅴ 主要英文缩略词索引 | 第64-65页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
